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文档简介
实验八肠道杆菌 实验目的 观察大肠杆菌 伤寒杆菌在SS琼脂平板和在EMB琼脂平板生长状态 观察大肠杆菌 伤寒杆菌在双糖含铁斜面的菌落特点 五糖发酵试验 吲哚试验 一 肠道鉴别培养基1 SS琼脂培养基 这种培养基除含有基本的营养物质外 还含有乳糖和中性红指示剂 遇酸变红 遇碱变黄 是否能够分解乳糖是鉴别肠道致病菌和非致病菌的重要依据之一 通常非致病菌能分解乳糖产酸产气 而致病菌则不能分解乳糖 观察大肠杆菌和伤寒杆菌在SS琼脂培养基上的生长现象 大肠杆菌分解乳糖产酸产气 使指示剂变红 故菌落为粉红色 伤寒杆菌不分解乳糖 则不变色 为橙黄色菌落 2 EMB 伊红 美蓝 琼脂平板培养基 在无糖琼脂内加入乳糖 加热溶化 冷至50 加入经高压灭菌的伊红及美蓝溶液 摇匀后倾注平板 现象 因大肠杆菌能分解乳糖 使指示剂变色 呈现紫黑色有金属光泽的菌落 而伤寒杆菌则不变色 3 双糖含铁培养基 分上 下两层 上层为固体斜面培养基 除基本成分外 另加有乳糖 酚红指示剂 遇碱变红 遇酸变黄 和硫酸亚铁 PH值7 6 下层为半固体培养基 含葡萄糖和酚红指示剂 分别接种大肠和伤寒杆菌在双糖含铁培养基上 观察现象 大肠杆菌 试管由红变黄 有气泡 有动力 伤寒杆菌 上层仍为红色 下层由红变黄 有黑色沉淀 有动力 硫化氢试验 有些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸 胱氨酸 半胱氨酸等 产生硫化氢气体 可与培养基中的硫酸亚铁生成黑色沉淀 为硫化氢试验阳性 二 吲哚试验 靛基质试验 原理 有些细菌能分解培养基中的色氨酸生成吲哚 无色 向其中加入吲哚指示剂 对二甲基氨基苯甲醛 可与吲哚结合生成玫瑰吲哚而呈红色 为吲哚试验阳性 蛋白胨水培养基 蛋白胨 蒸馏水 氯化钠 调PH值7 2即可 大肠杆菌的吲哚试验阳性 三 五糖发酵管试验成分 蛋白胨 水 氯化钠 酚红指示剂和各种糖类五糖 葡萄糖 乳糖 麦芽糖 甘露醇 蔗糖现
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