实时荧光定量PCR仪技术简介.ppt

实时荧光定量PCR仪技术简介 聂尚海博士 定量PCR仪组成概述 1 热循环仪 PCR仪 2 检测系统3 总结 定量PCR原理及Opticon 热循环技术之PCR仪组成 加热制冷控温 热循环技术之加热 电阻丝加热半导体 电阻丝加热 热循环技术之电阻丝加热 热循环技术之电阻丝 半导体加热 优点 升温快速准确 热循环技术之制冷 风扇制冷压缩机制冷半导体制冷 热循环技术之风扇制泠 优势价格低劣势精确性和均一性差不能主动致冷控温不能低于室温 热循环技术之压缩机制冷 聚乙烯醇管 压缩机 优势制冷快精确性尚可接受劣势体积大控温易过头 制冷时尤为如此 违反蒙特利尔公约 破坏臭氧层 最大可过头3 8 C DatacollectedbyCYCLERtestBV 热循环技术之制冷过头 热循环技术之半导体制冷 优势体积小控温性能出色可低于室温可主动致冷劣势技术要求高 Opticon仪器组成 Opticon的PCR仪之结构 Opticon的PCR仪结构 三传感器和双区域温度控制技术具有动态温度梯度 Opticon的PCR仪之寿命长 Lastnearlytwiceaslongasthenearestcompetitor Opticon的PCR仪之小结 先进的加热技术 电阻丝 半导体加热先进的致冷技术 半导体制冷控温技术 三点探测 双区域控制控温快速 准确精确性 均一性能良好有温度梯度寿命长 检测技术之原理概述 检测技术之原理概述 光源荧光染料检测系统 检测技术之光源 三种类型钨灯氩离子激光发光二极管 LED 检测技术之光源 钨灯 优势常用发出全光谱的光价格适中易更换劣势预热耗时寿命短需滤光片产热 检测技术之光源 氩离子激光 优势亮度高可发出单或双波长的光聚焦好劣势需要移动扫描价格昂贵产热寿命短耗电 检测技术之光源 发光二极管 优势价格便宜寿命长稳定可输出不同颜色的光体积小产热少劣势需要滤光片更换困难亮度低 最高性价比 检测技术之荧光染料 工作原理染料吸收光能跃迁至高能级 染料以荧光形式释放能量以回到基态 发出荧光 发射光和激发光的波长不同 常用的染料 FAM SYBRGreen PicoGreen等多种染料 检测技术之检测系统 三种类型ChargedCoupledDevice CCD 光电二极管光电倍增管 PMT 检测技术之检测系统 CCD 优势灵敏可检测一定范围的光谱体积小稳定 劣势检测范围窄对强光和弱光分辨率低背景高 检测技术之检测系统 半导体二极管 优势体积小价格便宜耐用劣势灵敏度低一次只能扫描一个样品 半导体二极管通过吸收光子产生电流 检测技术之检测系统 PMT 优势超灵敏 可检测到单个光子检测范围广劣势体积大一次只能读一个样品 通过把光能转化成电子能使信号得到扩增 所以PMT检测非常灵敏 检测技术之Opticon检测系统 最高性价比的光源 LED最灵敏 最实用的检测技术 PMT超灵敏 检测范围最广 VVVVVVVVVVVV 扫描的时机 频率 次数 间隔 时间等都可控制每2秒钟扫描一遍 96个发光管依发光无机械部分 Opticon实时荧光定量PCR仪之检测系统 确定初始模板的浓度 Opticon实时荧光定量PCR仪之分析方法 标准曲线 荧光检测热循环仪光色 单色光均一性 0 4 C染料 FAM SYBRGreen MolecularbeaconsTaqManProbes精确性 0 3 C发射光波长 515 545nm升降温速率 达3 C 秒 灵敏度 5nM的荧光素温度梯度 有检测范围 100 108拷贝容量 96样品反应管 0 2mL反应管 96孔板操作系统 WindowsNT Opticon实时荧光定量PCR仪之小结 Opticon实时荧光定量PCR仪之总结 荧光技术96个LED对应不同的孔通过PMT检测 515 545nm 通过把光信号转化成电信号来检测适用于SYBRgreen FAM染料 TaqManProbes和Molecularbeacons等探针热循环技术半导体 电阻丝 三传感器PCT200质量可靠 总结 MJ公司DNAEngineOpticon 优势非常灵敏检测范围广无移动部分占地面积小热循环仪技术可靠可升级有温度梯度高性价比可用机器人操作 Opticon实时荧光定量PCR仪之应用 可广泛应用于临床观测病情发展及预后多种疾病的诊断判断药物疗效基础研究其他 北京 总部 成都 分公司 沈阳 分公司 西安 分公司 广州 分公司 上海 分公司 香港 分公司 海外厂商 维修服务中心 维修服务中心 维修服务中心 东胜公司之销售渠道 谢谢 北京东胜创新科技有限公司联系方式 北京 北京海淀区中关村北二街水清木华园4 楼1708100082电话 010 82641818传真 82642191香港 香港北角