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病原性真菌 第二十五章P418 438 温州医学院检验医学与公共卫生学院温州医学院附属第一医院周铁丽 目的 掌握深部真菌的生物学特性及鉴定了解浅部真菌的生物学特性及鉴定 真菌的基本特性 真核细胞型微生物 属于真菌界 有典型的细胞核 不含叶绿素 以腐生或寄生方式摄取营养 单细胞或多细胞 行有性生殖或无性繁殖 真菌的基本结构与形态 菌丝 成熟的孢子在基质上产生的管状结构 菌丝体 许多菌丝交织成团 孢子 是真菌的繁殖器官 真菌的分类 I 按菌落形态分霉菌 多细胞 产生菌丝和孢子 丝状菌落 酵母 单细胞 乳酪样菌落 双相真菌 菌落形态受环境因素影响 真菌的分类 II 按致病性分致病性真菌 如申克孢子丝菌 荚膜组织孢浆菌 粗球孢子菌等 条件致病性真菌 如念珠菌 曲霉菌 毛霉菌等 真菌的分类 III 按感染部位分浅部真菌 主要侵犯皮肤 指 趾 甲 毛发 深部真菌 主要侵犯深部组织 内脏及全身 真菌的检验方法 直接镜检染色 不染色 10 20 KOH处理分离培养选择培养基 高糖 低pH 培养条件 温度 湿度 生化试验同化发酵试验 牛乳分解试验 脲酶试验等动物实验确定真菌的致病性核酸检测主要用于疑难 变异菌株的早期诊断毒素检测检测食品 食物中毒的鉴别诊断 浅部感染真菌 表面感染真菌皮肤癣真菌皮下组织感染真菌 一 表面感染真菌 代表菌 糠秕马拉色菌嗜脂性酵母样菌所致疾病 侵犯皮肤角质层 导致汗斑 花斑癣 微生物检验 一 直接显微镜检查透明胶带粘贴取材 厚壁孢子 粗短菌丝 二 分离培养与鉴定37 3天生长 20天菌落约10mm 乳酪色酵母样菌 二 皮肤癣真菌 主要菌属 毛癣菌属 表皮癣菌属 小孢子癣菌属20余个种对人类致病微生物检验 一 直接显微镜检查处理 皮屑 10 KOH制成湿片 指甲 25 KOH处理 镜检 分支的菌丝 成链的孢子 二 分离培养沙氏琼脂 25 培养4周 三 皮下组织真菌感染 主要菌属着色真菌 裴氏着色真菌 卡氏枝孢霉等引起病损皮肤变黑 化脓 结痂孢子丝菌 二相真菌 申克孢子丝菌孢子丝菌病微生物检验 一 直接显微镜检着色真菌 短粗分隔的菌丝 分生孢子孢子丝菌 霉菌型 组织型 卵圆形或梭形孢子 二 分离培养沙氏琼脂10 14天 深部感染真菌 假丝酵母菌 念珠菌 81个种 其中11个种对人有致病性 隐球菌 17个种7个变种 仅新型隐球菌及其变种对人有致病性曲菌 900余种 其中10个种对人有致病性毛霉目真菌 根霉属 梨头霉属 毛霉属 根毛霉属等组织孢浆菌 组织孢浆菌 组织孢浆菌杜波变种卡氏肺孢菌 卡氏肺曩虫 一 假丝酵母菌 主要种 白色假丝酵母菌 近平滑假丝酵母菌 热带假丝酵母菌 克柔假丝酵母菌等所致疾病 肠炎 肺炎 尿道炎 阴道炎 败血症等微生物检验 一 直接镜检 二 分离培养与鉴定芽管形成试验 厚膜孢子形成试验 糖同化 发酵试验 三 血清学诊断 主要鉴定试验 I 芽管形成试验 假丝酵母菌接种到0 5ml人或动物血清中 37 培养1 4小时 镜检芽管形成情况 厚膜孢子形成试验 假丝酵母菌接种到玉米粉琼脂中 27 培养1 2天 镜检厚膜孢子形成试验 主要鉴定试验 II 糖同化发酵试验 P426酵母菌能发酵某种糖 一定能同化该糖TZC还原试验含0 05 g L氯化三苯四氮唑的培养基上菌落颜色白色假丝酵母菌无色 热带假丝酵母菌红色 主要鉴定试验 III 酵母菌显色培养法利用培养基上特殊的显色物质鉴定念珠菌商品 CHROMagarCandida培养基 柯玛嘉 培养24 48小时观察菌落白色假丝酵母菌 绿色 翠绿色 直径约2mm 热带假丝酵母菌 蓝灰色 铁蓝色 直径约1 5mm 克柔假丝酵母菌 粉红色 模糊 有微毛 直径约4 5mm 光滑假丝酵母菌 紫色 直径约2mm 其它假丝酵母菌 白色等能准确鉴定95 以上的白色假丝酵母菌 热带假丝酵母菌 克柔假丝酵母菌 85 以上的光滑假丝酵母菌 二 隐球菌 致病菌种 新型隐球菌及其变种侵入途径 呼吸道好发部位 肺 脑 脑膜 皮肤 骨 关节好发人群 细胞免疫功能低下者 恶性肿瘤 器官移植 AIDS等 微生物检验 新型隐球菌 四个血清型分离培养 病原性隐球菌37 和25 均生长 非病原性隐球菌37 不生长墨汁负染色镜检 阳性 可见菌体外宽厚荚膜 靛氧化酶试验 阳性尿素酶试验 阳性糖同化发酵试验 同化纤维二糖 肌醇 不发酵糖 三 曲霉 广泛存在于自然界 为条件致病性真菌利 酿酒造酱生产有机酸 酶制剂 抗生素弊 食物 药物霉变曲霉直接感染或变态反应毒素致食物中毒致癌 微生物检验 一 直接显微镜检查分枝菌丝 粗分生孢子 顶端小分生孢子 二 血清中曲霉抗原 抗体检测 三 分离培养接种沙氏琼脂 形成毛状菌落 四 毛霉目真菌 所致感染 鼻黏膜 肺 胃肠道 皮肤引起全身播散 发病急 进展快 病死率高微生物检验 一 直接镜检 20 KOH制成湿片镜检粗大菌丝 无隔或少数分隔 二 分离培养与鉴定沙氏琼脂生长快 菌落棉花状 白色 逐渐变深 三 血清学诊断 五 组织孢浆菌 两个种 组织孢浆菌 组织孢浆菌杜波变种所致疾病 组织孢浆菌病原发急性型组织孢浆菌病 慢性空洞型 严重播散型易感人群 淋巴瘤 白血病 霍奇金病 AIDS 肾上腺皮质激素使用者 微生物特性双相型真菌25 菌丝体 37 酵母型荚膜组织孢浆菌杜波组织孢浆菌形态卵圆形芽生孢子有荚膜圆形薄壁芽生孢子脲酶试验阳性阴性明胶液化试验阴性阳性 24 96h 肝组织胞浆菌包囊镜下 肺组织胞浆菌包囊镜下 六 卡氏肺胞菌 卡氏肺孢子虫 分类早期属于原虫抗原虫药物有效有包囊 滋养体两种形态近年归属真菌其线粒体的16s和5s核糖体RNA的核酸序列与真菌同源性好染色特性似真菌抗真菌药物对其无效 广泛分布于自然界条件致病菌健康人体内多为隐性感染免疫功能低下患者体内繁殖扩散肺炎类型流行型 浆细胞浸润为主 早产儿 营养不

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