MM_FS_CNJ_0273 出口粮谷及油籽中禾草灵残留量检验方法.DOC

MM_FS_CNJ_0273出口粮谷 油籽 禾草灵 残留量 气相色谱法 外标法定量MM_FS_CNJ_0273出口粮谷及油籽中禾草灵残留量检验方法1.适用范围本方法适用于出口糙米、玉米、小麦、大豆中禾草灵残留量的检验。2.原理概要试样中残留的禾草灵用丙酮-石油醚提取，提取液经与石油醚液-液分配，再以中性氧化铝柱净化，被测物用丙酮-石油醚洗脱，洗脱液经蒸干，残渣用石油醚溶解并定容，溶液供配有电子俘获检测器的气相色谱仪测定，外标法定量。必要时可用气相色谱质谱进行确证。3.主要试剂和仪器3.1.主要试剂丙酮：重蒸馏；石油醚：重蒸馏；无水硫酸钠：650灼烧4h，贮于密封容器中备用；硫酸钠溶液：2%水溶液。将20g无水硫酸钠溶于水中，并稀释至1 000mL；中性氧化铝：层析用，100200目，550灼烧5h，用前于130活化4h，冷却后加入5%(m/m)水脱活，贮于密封容器中备用；禾草灵标准品：纯度99%；禾草灵标准溶液：准确称取适量的禾草灵标准品，用少量的石油醚溶解，并以石油醚配制成浓度为1.00mg/mL的标准储备液。根据需要再用石油醚稀释成适用浓度的标准工作溶液。3.2.仪器气相色谱仪：配有电子俘获检测器及质谱检测器；振荡器；旋转蒸发器；无水硫酸钠柱：7.5cm1.5cm(内径)，内装5cm高无水硫酸钠；氧化铝柱：25cm1.5cm(内径)，自下而上依次填装2cm高无水硫酸钠、15g中性氧化铝、2cm高无水硫酸钠。使用前用50mL石油醚预淋洗；微量注射器：10L。4.抽样和制样4.1.检验批以不超过200t为一检验批。200t袋装玉米或大豆约2200袋；袋装糙米或小麦约4000袋。玉米或大豆有时为散装品。同一检验批的商品应具有相同特征，如包装，标记、产地、规格和等级等。4.2.抽样数量4.2.1.袋装货品按式(1)计算抽样袋数：a(1)式中：N 全批袋数；a 抽样袋数。注：a值取整数，小数部分向前进位为整数。4.2.2.散积货品(玉米或大豆)货堆高度不超过2m。按货堆面积划区设点。以50m2为一个取样区，每区设中心及四角(距边线1m处)5个点。每增加一个取样区，增设3个点。4.3.抽样工具金属单管取样器：全长55cm(包括手柄)，直径1.52.0cm，沟槽长度应超过袋对角线长度的一半；金属双套管取样器：全长分1m、2m(均包括手柄)两种。内、外管同部位分段开几个槽口，每个槽口长1520cm，口宽2.02.5cm。内管的内径为2.53.0cm；取样器的探头长约7cm；取样铲或取样勺；分样板；盛样器：筒或袋，可密封；分样布或适用铺垫物。4.4.抽样方法4.4.1.袋装抽样倒包抽样：从堆垛的各部位随机抽取4.2.1规定的应抽样袋数的10%(每批一般不少于3袋)，将袋口缝线全部拆开，平置于分样布或其他洁净的铺垫物上，双手紧握袋底两角，提起约成45倾角，倒拖约1m，使袋内货物全部倒出。查看袋内和袋间品质是否均匀，确认情况正常后，用取样铲随机在各部位抽取样品，并立即将样品倒入盛样器内。每袋抽取样品的数量应基本一致。袋内抽样：按4.2.1规定的应抽样袋数(扣除倒包抽样袋数)，在堆垛四周的上、中、下各层以曲线形走向随机抽取。然后按糙米、小麦、玉米、大豆，用下述方法进行取样：对糙米、小麦，用金属单管取样器槽口朝下，从每袋一角依斜对角方向插入袋内，然后将管槽旋转朝上，抽出取样器，立即将样品倒入盛样器内。对玉米、大豆，用1m长的金属双套管取样器，关闭槽口，从每袋一角依斜对角方向插入袋内，然后旋转内管以开启槽口，待样品流满内管后，再旋转内管以关闭槽口。抽出取样器，立即将样品倒入盛样器内。每袋抽取样品的数量应与4.4.1.1基本一致。每批所抽取的样品总量应不少于4kg。4.4.2.散积抽样(用于玉米、大豆)按4.2.2规定的取样点，逐点抽取样品。将取样器槽口关闭，以倾斜45角度插入货堆至相应深度，旋转取样器内管以开启槽口，待样品流满内管后，再旋转内管以关闭槽口。抽出取样器，立即将样品倒入盛样器内，从各点所抽取样品的数量应基本保持一致。每批所抽取的样品总量应不少于4kg。4.4.3.大样缩分袋装样品：合并从倒包和袋内抽样所取全部样品，倒于分样布上，用分样板按四分法缩分样品至不少于2kg，倒入盛样器内，加封后标明标记，并及时送交实验室。散积样品：将抽取的全部样品，倒于分样板上，以下按上述袋装样品方法进行。4.5.试样制备4.5.1.制样工具磨碎机；筛子：20目筛；分样板；盛样瓶：具塞广口瓶。4.5.2.制样方法将样品按四分法缩分至500g，用磨碎机全部磨碎并通过20目筛。混匀，均分成两份作为试样，分别装入洁净的盛样瓶内，密闭，标明标记。4.6.试样保存将试样于5以下避光保存。注：在抽样及制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。5.过程简述5.1.提取称取试样约20g(精确至0.1g)于250mL具塞锥形瓶中，加入100mL丙酮-石油醚(11)混合液，振荡提取30min。将提取液过滤于500mL分液漏斗中。用50mL丙酮分两次洗涤残渣，洗涤液经过滤后合并于上述分液漏斗中。5.2.净化于上述分液漏斗中加入200mL硫酸钠溶液，振摇3min，静置分层。收集上层有机相。水相再用250mL石油醚重复提取。合并有机相，经无水硫酸钠柱脱水，收集于梨形瓶中，于40水浴中旋转浓缩至近干，加入5mL石油醚以溶解残渣。将溶解液倾入氧化铝柱中，用100mL丙酮-石油醚(199)混合液洗脱，弃去最初50mL流出液后，收集随后流出液于梨形瓶中，于40水浴中旋转浓缩至近干，用石油醚溶解并定容至5.00mL，供气相色谱测定。5.3.测定5.3.1.色谱条件色谱柱：25m0.32mm(内径)，膜厚0.25m，HP-1701石英毛细管柱，或相当者；色谱柱温度：程序升温50(2min) 30/min 200(1min) 4/min 250(5min)；进样口温度：260；检测器温度：280；载气：氮气，纯度99.99%，2mL/min；尾吹气：氮气，纯度99.99%，50mL/min；进样方式：无分流进样，1.5min后开阀；进样量：2L。5.3.2.色谱测定根据样液中被测农药含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液。标准工作溶液和待测样液中农药的响应值均应在仪器检测的线性范围内。对标准工作溶液与样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，禾草灵的保留时间约为14min。标准品的气相色谱图见附录A中图A1。5.4.确证5.4.1.气相色谱-质谱条件色谱柱：30m0.25mm(内径)，膜厚0.25m，OV-17石英毛细管柱；色谱柱温度：程序升温50(2min) 30/min 220(1min) 6/min 270(5min)；进样口温度：270；色谱-质谱接口温度：260；载气：氦气，纯度99.99%，1.4mL/min；进样量：1L；进样方式：无分流进样，1.5min后开阀；电离方式：EI；电离能量：70eV；电子倍增器电压：1.65kV；测定方式：选择离子监测方式；选择监测离子(m/z)：253，281，340amu；溶剂延迟：10min。5.4.2.质谱确证试验对标准溶液及样液均按5.4.1规定的条件进行测定时，如果样液与标准溶液有保留时间相同的峰出现，则用质谱图对其确证。在上述气相色谱-质谱条件下，禾草灵的保留时间约为18min。标准品的色谱-质谱图见附录B中图B1。5.5.空白试验除不加试样外，均按上述测定步骤进行。6.结果计算用色谱数据处理机或按式(2)计算试样中禾草灵残留含量：XhcV(2)hsm式中：X 试样中禾草灵残留含量，mg/kg；h 样液中禾草灵的色谱峰高，mm；hs 标准工作液中禾草灵的色谱峰高，mm；c 标准工作液中禾草灵的浓度，g/mL；V 样液最终定容体积，mL；m 最终样液所代表的试样量，g。注：计算结果需将空白值扣除。7.测定低限、回收率7.1.测定低限本方法的测定低限为0.020mg/kg。7.2.回收率7.2.1.糙米中禾草灵的添加浓度及其回收率实验数据：在0.020mg/kg时，回收率为90.0%；在0.10mg/kg时，回收率为91.0%；在0.50mg/kg时，回收率为92.8%。7.2.2.玉米中禾草灵的添加浓度及其回收率实验数据：在0.020mg/kg时，回收率为93.8%；在0.10mg/kg时，回收率为88.5%；在0.50mg/kg时，回收率为89.7%。7.2.3.小麦中禾草灵的添加浓度及其回