原子吸收测定五种元素方法的改进.doc

中国儿童保健杂志2002年6月第10卷第3期 CJCHC Jun.2002, Vol 10, NO.3 185【经验交谈】文章编号：1008-6579（2002）03-0185-02原子吸收测定五种元素方法的改进谈藏文1，刘玉兰1，戴耀华1，杨奇2，张春华1（1首都儿科研究所营养研究室，北京100020；2北京博晖创新光电技术股份有限公司，北京100036）中图分类号：R151.3文献标识码：B摘 要：【目的】探讨改进法与传统法测定全血中铜（Cu）、锌（Zn）、钙（Ca）、镁（Mg）、铁（Fe）含量一致性和优越性。【方法】分别以传统消化法、单通道和五通道法测定同一对象静脉血和指血中五种元素的含量，比较同一方法测定静脉血和指血中各元素的含量；比较不同方法各元素的含量。计量资料用配对计量资料t检验和F检验处理，计数资料用配对计数资料X2检验和X2检验处理。【结果】单通道法和五通道法测定同一对象的静脉血和指血，其各元素含量及各元素缺乏检出率均相近（P均0.05）。以消化法测定静脉血，以单通道法、五通道法测定指血，其各元素含量及各元素缺乏检出率均相近（P均0.05）。以单通道法和五通道法测定指血，其各元素含量及各元素缺乏检出率均相近（P均0.05）。【结论】改进法在测定五种元素含量时，与传统消化法的测定结果一致。且具有易接受、简便、快速、准确、污染少等优越性。关键词：铜（Cu）；锌（Zn）；钙（Ca）；镁（Mg）；铁（Fe）The Improvement of Determination if Five Elements by Atomic Absorption. TAN Zang-wen1, LIU Yu-lan1, DAI Yao-hua1, TANG Qi2, ZHANG chun-hua1. (Capital Institute of Pediatrics, Beijing 100020, china; 2 Bohui Instrument Company, Beijing 100036, China).Abstract:【Objective】To explore the consistent and advantage about improvement and tradition in detecting five elements of copper (Cu), zinc(Zn), calcium(Ca), magnesium(Mg) and ferrous(Fe).【Methods】To detect the concentration of five elements in blood of venous and finger by Xiao Hua Fa, Dan Tong Dao Fa and Wu Tong Dao Fa. 【Results】There is no difference ence among various methods(P 0.05).【Conclusions】There is accordance in testing the contents of five elements by difference methods. And the new one has excellent of accessible, simple, rapid, accurate and no pollution.Key words: copper; zinc; calcium; magnesium ferrous宏量及微量元素学是现代生命科学和现代医学的新兴学科。随着国民文化素质及生活水平的提高，公众对体内锌（Zn）、钙（Ca）、铁（Fe）等元素营养状况的关注与日俱增。因为这些元素的缺乏与过量对人体皆有不良影响，所以准确检测其在人体内的含量是此方面科研和临床工作的基础。由于既往测定法存在需取静脉血、前处理繁复、污染环境及标本、耗时长等诸多弊端，现已改进为单通道及五通道的检测方法，此文旨在探讨改进法与传统方法的一致性和优越性。1 对象和方法1.1 对象婴幼儿30名，其中男18人，女12人。1.2 方法分别以传统消化法、单通道法和五通道法测定同一对象静脉血和指血中Cu、Zn、Ca、Mg、Fe的含量，比较同一方法测定静脉血和指血中各元素含量的结果及不同方法测定各元素的结果。1.2.1 仪器 Bohui9442单通道、Bohui5100多通道智能型火焰原子吸收光谱仪。1.2.2 试剂浓硝酸（HNO3）、30%双氧水（H2O2）、1:1盐酸（HC1）/去离子水（H2O）、细胞溶解液。见表1。表1各种标准液的离子含量（浓度单位g/ml）元素空白标准1标准2标准3Cu0.000.050.100.15Zn0.000.100.250.40Ca0.001.002.003.00Mg0.000.501.002.00Fe0.005.0015.0025.001.2.3 实验步骤 不同方法的操作步骤见表2。1.2.4 正常参考值1Cu:11.839.3mol/L；Zn:76.5229.0mol/L；Ca:1550.02100.0 mol/L；Mg:1115.02060.0mol/L;Fe:7520.011818.0mol/L 1.2.5 统计学处理计量资料用配对计量资料t检验和F检验处理，计数资料配对计数资料X2检验和X2检验处理。2结 果2.1不同部分血液中各元素含量的比较两种方法测定静脉血和指血各30例。2.1.1单通道法以单通道法测定同一对象的静脉血和指血，两部位血液中各元素含量相近，各元素缺乏检出率亦相近（X2在00.25,P0.05）。见表3。表2不同方法的操作步骤1,2试剂方法传统消化法(l)单通道法(l)五通道法(l)全血静脉血500指血40指血40细胞溶解液12001200浓HNO31000030%H2O21000低温电热板消化蒸发近干、冷却1:1HCL/去离子H2O600去离子H2O2500加热溶解悬浮物、冷却去离子H2O定容至10000上机测定光度，计算各元素含量Window98平台软件人机对话，自动设置仪器参数，以优化平滑法拟合曲线。分别做出各元素的曲线及含量，打印结果一次做出各元素的曲线及含量，打印结果。表3单通道法测定静脉血和指血中五种元素的含量（mol/L）（）部位CuZnCaMgFe静脉血16.825.8373.8019.971487356131026969401444指血16.784.3270.9815.261442251128126870821382t 值-0.0801.3701.0290.6070.999p值0.9360.1810.3120.5490.3262.1.2五通道法以五通道法测定同一对象的静脉血和指血，两部位血液中各元素含量相近，各元素缺乏检出率亦相近（X2在00.25,P0.05）。见表4。表4五通道法测定静脉血和指血中五种元素的含量（mol/L）（）部位CuZnCaMgFe静脉血16.484.2173.1418.191487279135323970301430指血16.794.2471.1716.861443282129424270431410t 0.534-0.989-1.000-1.924-0.328p0.5970.3310.3250.0650.745注：五通道法中有一份静脉血可能被Mg元素污染，因此表中Mg元素配对为29对。2.2不同方法测定各元素的含量2.2.1三种方法的比较以消化法对静脉血，以单通道法、五通道法对指血进行各元素含量的测定，三种方法测定的各元素含量相近，各元素缺乏检出率亦相近（X2在0.0882.085,P0.05）。见表5。表5不同方法测定血液中五种元素的含量（mol/L）（）方法及部位CuZnCaMgFe消化静脉血16.464.1874.2518.191520340142031072901580单通道指血16.784.3270.9815.261442251128126870821382五通道指血16.794.2471.1716.861443282128025270431410F值0.0570.3580.6632.5440.258P值0.9450.7000.5180.0840.7732.2.2单通道法与五通道法的比较以单通道法和五通道法测定指血各元素含量，两方法测定的各元素含量相近，各元素缺乏检出率亦相近（X2在00.5，P0.05）。见表5。3讨论体内Cu、Zn、Ca、Mg、Fe元素的营养状况直接关系到人体健康，由于这些元素轻微缺乏时没有典型的临床症状，故被称其为“潜在饥饿”，欲诊断有赖于实验室分析。因此检测手段的优劣直接影响此方面工作在科研与临床的展开。3.1方法学的比较该文结果以同一方法（无论单通道还是五通道）测定同一对象静脉血和指血中五种元素含量的结果相近。以改进的单通道法、五通道法测定指血与传统的消化法测定静脉血中五种元素含量的结果相近。以单通道法和五通道法测定指血中五种元素含量的结果相近，由此提示：检测人体血液中五种元素含量取少量指血，无需消化等繁复处理即可，若以五通道法测定更具优越性。3.2改进法的优越性3.2.1 标准液及标准曲线的简化传统消化法需配制Cu、Zn、Ca、Mg、Fe五种元素各自不同浓度的标准液。改进法只需一个系列的标准液。测定时人机对话，以优化方法拟合曲线。单通道法分别做Cu、Zn、Ca、Mg、Fe五条标准曲线，五通道法同时发射五种元素的特征谱线，一次进样即可做Cu、Zn、Ca、Mg、Fe五条标准曲线。简化了操作步骤，加快了检测速度，减少了对环境的污染。3.2.2标本量的减少及前处理的简化改进法使取血量从500l静脉血变为40l指血。提高了受检者的可接受性。改进法省去了繁复的前处理环节（浓HNO3的消化、悬浮物的溶解、冷却和定容等），标本以细胞溶解液混匀后即可上机测定，大大简化了实验步骤，提高了检测速度，减少了对标本和环境的污染，降低了检测结果的离散性，提高了测定的准确性。使得此方面的科研和临检更易进行。3.2.3测定计算的智能化传统方法需调整仪器条件，逐个测定、人工计算各元素含量，工作量很大。改进法运用微机和专用检测软件对主机进行控制、调整仪器参数，计算和打印实验结果。减少了人为操作、计算有可能带来的错误，缩短了出报告所需时间，减少了测试者的工作量。其自动贮存数据有易于资料的统计分析。尤其五通道法一次进样既可测定出五种元素的含量，较单通道法更具有优