FK506作用机理刘志红.ppt

普乐可复作用机制的临床及实验研究 南京军区总医院解放军肾脏病研究所全军医学研究重点实验室 Molecularstructureoftacrolimus Molecularformula C44H69NO12 H2O HO H3CO CH3 OH O CH3 H2O CH3 H3CO OCH3 N O O O O H3C HC3 O OH Cyclophilin Cyclophilin Cyclophilin Cs Cs Cs CnB CaM CnA CnB CaM CnA Antigen NF AT IL 2production Ca2 Ca2 FKBP FKBP FKBP Prograf Prograf Prograf CnB CaM Ca2 Ca2 CnA Molecularmechanismofactionoftacrolimus Antigenpresentingcell HelperTcell Peptide MHC IIclass ActivatedTCR CD3 B7 CD28 ZAP70 PLCg1 IP3 Ca2 Calcineurin Activation NF ATc p Inhibition FKBP12 Tacrolimus DAG PKC Ras GAP Raf MEK MAPK Jun Fos Jun Fos NF ATc p NF ATc p NF AT CD28RE CD28RC IL 2 P P P Nucleus FK506的免疫抑制作用 除IL2之外可以抑制IL1 IL3 IL4 IL6 IL7 IL8 IL10及IFN 的表达 抑制T淋巴细胞的活化 抑制细胞毒性T淋巴细胞的产生 包括 Naive 及 Primed 细胞 抑制特异性T辅助细胞增生的诱导 FK506的临床应用 FK506用于肾移植排异反应的治疗急性排异反应难治性急性排异反应CsA中毒的切换慢性排异反应 慢性移植性肾病 FK506用于非移植性肾病的治疗狼疮性肾炎膜性肾病 Tcell Recipient APC DonorAPC Sheddonorantigens indirect MHC peptide Secondsignal MHC peptide Secondsignal direct TCR FK506抑制急性和慢性排异反应的机制 Directrejection Acuterejection Indirectrejection Chronicrejection NaiveTcells PrimedTcells FK506对细胞因子产生的影响 AfferentPhase APC Tcell HLA TCR EfferentPhase RegulatoryPhase CytokineproductionTcellproliferationCTLgenerationMacrophageactivationNKcellactivationAlloantibodyproduction CellcyclearrestTcellapoptosis ImmunologicMemory Rejection 肾移急性排异肾组织中细胞因子mRNA表达谱的变化 n急性排异无排异pIL 210100 00 014IFNr5671 4 28 5 0 185IL 105583 6 16 3 0 0001TGF 5867 2 32 7 0 58 SuthanthiranM KidneyInt 1997 58 S15 肾移慢性排异肾组织中细胞因子mRNA表达谱的变化 n慢性排异无排异pIL 21020 80 0 72IFNr5626 7 73 2 0 82IL 105521 8 78 1 0 16TGF 5887 7 17 2 0 01 SuthanthiranM KidneyInt 1997 58 S15 IL 10急性排异反应TGF 慢性排异反应 FK506vs CsA FK506能更有效地抑制IL 10的产生 CsA刺激TGF 的产生 FK506抑制TGF 的产生 IL 10免疫刺激作用 活化IL 2非依赖性T细胞的活性 提高B细胞的功能 使抗体产生增加 增加CD8 T细胞和NK细胞的活性 IL 10在急性排异反应中的作用 急性排异肾组织中IL 10表达增加 给予外源性IL 10可以加重移植物排异反应 而用IL 10抗体则能明显延长移植物的存活时间 IL 10在狼疮性肾炎中的作用 SLE患者外周血IL 10分泌细胞数明显较正常人多SLE活动时 血清中IL 10水平明显增高动物实验发现给予外源性IL 10能诱发SLENZB W小鼠给予抗IL 10抗体能预防SLE的发生 FK506具有拟激素样作用 Corticosteroidtherapy mechanismofaction Theeffectsofcorticosteroidtherapyarelargelyanti inflammatory butmanyadverseeffectsincludefluidretention weightgain diabetes bonemineralloss andthinningoftheskin Usuallycorticosteroidsareadministeredincombinationwithotherdrugstokeepthetoxicsideeffectsataminimum FK506的拟激素效应 不仅可以使激素在较低剂量发挥其作用 也为采用不含激素的免疫抑制治疗方案提供了依据 FK506具有保护内皮细胞抗血栓形成的作用 TGF Solubleorvitronectin boundactivePAI 1 U PAactivity Plasminformation Fibrinolysis MMPactivation ECMdegradation Fibroblastsinvationofthefibrinmatrix ECMproteinaccumulation Collagendeposition FibrosisThrombosis FK506具有促进肝细胞再生的功能 肝细胞再生 Hepaticregeneration 抑制作用 Azathioprine corticalsteroid促进作用 FK506 CsAFK506 CsA EffectofCyAandFK506onHepatocyteDNASynthesis AdditiontotheIncubationMedium MEM Insulin NRS110 1588 971 1453 5NRS CyA92 1082 1056 857 7NRS FK50686 1183 459 952 6Vehicle treatedratserum130 18124 10106 682 10CyA treatedratserum140 7167 11 196 12 170 11 FK506 treatedratserum154 16306 28 286 26 244 17 serum5102030 3H ThymidineIncorporation cpm10 3 mgDNA Significantlydifferentfromgroupno 4 P 0 05 Significantlydifferentfromgroupno 4 P 0 02 and5 P 0 01 VehicleNo2 930 650VehicleUnilateralnephrectomy5 012 559 FK506Unilateralnephrectomy4 971 702 VehicleNo13 420 16 21640 smallintestineVehicleresection73 711 17 071 40 smallintestineFK506resection78 823 30 973 3H ThymidineIncorporation cpm mgDNA 3H ThymidineIncorporationinkidneyandSmallIntestineFromNormal Nephrectomized orSmallIntesine ResectedRatsTreatedorNorwithFK506 Treatment IM Surgey Significantlydifferentfromthymidineincorporationinkidneysfromnon operatedanimals P 0 05 Significantlydifferentfromthymidineincorporationinthesmallinntestinefromnon operatedanimals P 0 05 FK506促进肝细胞再生机制 FK506促进细胞再生作用为器官特异性 FK506对肝细胞并无直接促进再生作用 其作用的产生需借助相关调节因子 如肝细胞生长调节因子 FK506促进肝细胞再生机制 2 FK506促进细胞再生的作用能被IL 2 IL 12所阻断 提示FK506该作用与其免疫调节作用有关 FK506在慢性排异反应中的作用 免疫性因素HLA 配型 DR B A 急性排异 早期 反复发作 CMV感染持续低水平排异反应 非免疫性因素供肾 年龄 肾单位 缺血再灌注损伤高血压 高血脂肥胖 糖尿病 炎症反应 内皮细胞受损 平滑肌细胞增殖 血管腔狭窄 缺血损伤 纤维化 慢性移植肾功能衰竭 移植后肾病 缺血 排异反应 药物 移植物损伤 PDGFFGFA 细胞外基质聚积组织纤维化 细胞增殖 慢性排异慢性移植性肾病 内皮细胞损伤 凝血 高血压 TGF 1 FK506能抑制供者特异性抗体 DSA 的产生 Th0 Th0 Th2 B Th1 Mac TcellsMacrophages IL 12 IL 4 IL 4IL 10 IFN Antibodyformation 抗体介导的排异反应 Antibodymediatedrejection 体液性排异反应 Humoralrejection 循环中存在抗供者特异性抗体 肾组织管周毛细胞血管C4d染色阳性 急性排异反应 I型 II型 III型 抗体介导的排异反应 体液性排异反应 细胞介导的排异反应 体液性排异反应 Humoralrejection 不仅介导急性排异的发生 它在慢性排异的发生中同样起着重要的作用 直接关系到病人的远期预后 026912moths 100806040200 DSAtiters In ofinitialvalue Pat1Pat2Pat3Pat4 Kineticsofcirculatingdonor specificantibodies DSA infourpatientswithchronichumoralrejectionaftertherescuetherapywithtacrolimus FK506抑制急性排异反应 抑制NaiveT淋巴细胞活性 阻断直接排异反应 抑制IL 10产生 抑制血管内血栓形成 抑制抗体介导的体液免疫反应 FK506抑制慢性排异反应 抑制PrimedT淋巴细胞活性 阻断间接排异反应 Indirectrejection 抑制TGF 产生 减轻间质纤维化和硬化病变 抑制抗供者特异性抗体 DSA 的产生 保护血管内膜 防止血管硬化的发生 FK506的其它特点 FK506具有拟激素样作用 减少激素的用量 FK506具有促进肝细胞再生的作用 短期内提升血浆白蛋白水平 FK506的合理用药 CsA与FK的异同 CsAFKIL2抑制作用 防止器官移植急排 对CD4的作用 对CD8的作用 naive primed 对IL10的作用 副作用 多毛 齿龈增生 高血压 高脂血症 肾毒性 高血糖 神经系统 对TGF 的作用提高TGF 抑制TGF 受体 FK506选用应注意 1 肥胖2 糖尿病家族史 T淋巴细胞活化的三条主要途径 1 Calcineurin活化 激活细胞因子和T细胞活化基因转录 G0 G1phase 2 Denovo嘌呤合成增加 淋巴细胞增殖 3 IL 2与其受体结合 继而活化雷帕霉素靶分子 TargetofRapamycin TOR 使T细胞增殖 G1 Sphase FK506治疗方案中加用钙离子拮抗剂 CCB 1 降压作用 2 FK506所致肾毒性与其收缩血管作用有关 CCB能够拮抗FK506缩血管作用 减轻肾毒性 3 CCB与FK506均需经细胞色素P450代谢 这种竟争性作用能增加F