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文档简介
紫外分光光度法测定蓝莓中的维生素C含量（一）实验目的 (1) 掌握紫外分光光度计的工作原理及使用方法。 (2) 掌握水果（或蔬菜）中的维生素C含量的测定方法。（二）实验原理紫外分光光度快速测定法是根据维生素C具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性,于波长243nm处测定样品溶液与碱处理样品两者吸光度之差,通过查校准曲线,即可计算样品中维生素C的含量。此法操作简单、快速准确、重现性好,结果令人满意。特别适合含深色样品的测定。（三）仪器与试剂仪器分析天平，蓝莓若干，研钵，容量瓶（10ml,50ml,100ml）,滤纸，漏斗，5ml移液管试剂抗坏血酸标准溶液：用分析天平准确称取抗坏血酸10 mg，加2 mL 1%盐酸，加蒸馏水定容至100 mL，混匀。此抗坏血酸溶液的浓度为100 gmL-1（四）实验步骤1. 标准曲线的绘制试管标号12345678标准VC加入体积/ml0.10.20.30.40.50.60.81.0蒸馏水9.99.89.79.69.59.49.29.0VC溶液浓度/(ug/ml)1.02.03.04.05.06.08.010.02样品的测定 1样品的提取：将果蔬样品洗净、擦干、切碎、混匀。称取5.00 g于研体中，加入25 mL 1% HCl，匀浆，转移到25 mL容量瓶中，稀释至刻度。若提取液澄清透明，则可直接取样测定，若有浑浊现象，可通过离心（10000 g, 10 min）来消除。 2样品的测定：取0.10.2 mL提取液，放入盛有0.20.4 mL 10%盐酸的10 mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度后摇匀。以蒸馏水为空白，在243 nm处测定其消光值。通过查标准曲线，计算出样品的维生素C的含量。 （五）计算与数据 V总维生素C的含量（g/g）= V1W总式中：从标准曲线上查得的抗坏血酸的含量（g）V1测消光值时吸取样品溶液的体积（mL）V总样品定容体积（mL） W总称样重量（g） 数据见excel表（六）思考与讨论除了本实验中的方法外，抗坏血酸还有哪些测定方法? 答：一、氧化还原法 1. 直接碘量法 2. 2,6-二氯酚靛酚滴定法 二、分光光度法 1. 紫外快速测定法 2. 2,4-二硝基苯肼法 3. 高铁还原法测定血浆中的抗坏血酸三、光
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