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原理 常规制备的染色体标本经烤片后 用热碱 各种蛋白酶 尿素 去垢剂或其它溶液等预处理再以Giemsa染色 在油镜下可看到染色体两臂显示出着色深浅不同的横纹 最常用的是胰蛋白酶法 可能的机理是 G带区含有较丰富的A T对 在间期核呈固缩状态 而且是DNA晚复制区之一 Giemsa染料在G带区是与DNA结合 而且与结合DNA的染色质非组蛋白有关 Giemsa染料是噻嗪 曙红染料 染色体的着色有赖于在原位形成噻嗪 曙红 2 1 的沉淀物 着色首先取决于二个噻嗪分子同DNA结合 在此基础上再结合一个曙红分子 其次取决于一个疏水环境 以利于染料沉淀而着色 通过胰酶的显带预处理可除去阴性G带区的疏水蛋白 或使它们的结构变成更亲水状态 由此可知 在G显带中抽取的蛋白往往是疏水的 且主要来自阴性G带区 试剂及器材 试剂 胰蛋白酶 0 4 酚红 5 NaHCO3 Giemsa原液 pH7 4磷酸盐缓冲液 0 85 生理盐水 器材 37 恒温水浴箱 染色缸 刻度吸管 滴头 实验步骤 取胰酶25mg 溶解于盛有50ml0 85 生理盐水的染色缸中 置37 恒温水浴箱中 加入0 4 酚红2滴 混匀 以5 NaHCO3调节pH为6 6 7 0 实验步骤 待胰酶液温度升至37 后 将染色体标本片 37 烘箱烤片 放入胰酶液中 并轻轻摆动 数秒 视烤片时间而定 后取出 立即自来水冲洗 实验步骤 染色 pH7 4磷酸盐缓冲液4 5mlGiemsa原液0 5ml染色8 10分钟 自来水冲洗 空气干燥 镜检 注意事项 良好的培养效果为 标本片上中期分裂相要多 且染色体分散要好 染色体长度应能适应显带分析技术的要求 G显带成败之关键取决于胰酶液的浓度和处理时间之搭配 实验结果 低倍镜下可看到中期分裂相 进而转至高倍镜及油镜下观察 可见23对染色体较为饱满 分布均匀 着色较好 沿染色体长轴可显出深浅不同的G带横纹 人类染色体G带歌谣 一秃二蛇三蝶飘 四像鞭炮五黑腰 六号像个小白脸 七盖八下九苗条 十号长臂近带好 十一低来十二高 十三 四 五一二一 十六长臂缢痕大 十七长臂带脚镣 十八白头肚子饱 十九中间一点腰 二十头重
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