中国药典2010年版－－化学鉴别.ppt

化学鉴别 药物的鉴别试验 根据药物的分子结构 理化性质 采用化学 物理化学或生物学的方法来判断药物真伪的试验方法 特点 1 仅适用于鉴别药物的真伪 2 它是对已知物的确证试验 3 鉴别试验是个别分析 而不是系统分析 4 对药物制剂进行鉴别时 要注意消除制剂中辅料的干扰 5 对原料药还要检查其外观及其它物理常数 如 熔点 比旋度 吸收系数 酸值 碘值 皂化值等 化学鉴别只是药物鉴别试验的方法之一 其它鉴别方法还有光谱鉴别法 色谱鉴别法 生物学鉴别法 药物鉴别试验的原则 专属性强 再现性好 灵敏度高 操作简便 快速 1 1化学鉴别定义 根据药物的化学结构或理化性质与加入的试剂或试液产生颜色变化 生成沉淀或产生气体等反应现象进行鉴别的方法 一般特点反应迅速 现象明显 无机药物是根据其组成中的阴离子或阳离子产生的特殊反应 如无机金属盐中钠盐 钾盐 钙盐的焰色反应 方法 取铂丝 用盐酸湿润后 蘸取供试品 在无色火焰中燃烧 火焰即显各离子的焰色特征 钠离子显鲜黄色 钾离子显紫色 钙离子显砖红色 在钾盐的焰色反应中 如有钠离子的存在 因钠的焰色灵敏度高 遮盖了钾焰的紫色 需透过蓝色的钴玻璃片将钠的黄色滤去 此时火焰显粉红色 钠的火焰试验 反应灵敏度高 最低能检出量约为0 1ng的钠离子 若由于试药和所用仪器引入微量钠盐时 均能出现鲜黄色火焰 故应在测试前 将铂丝烧红 趁热浸入盐酸中 如此反复处理 直至火焰不现黄色 再蘸取试样进行试验 并只有当强烈的黄色火焰持续数秒钟不退 才能确认正反应 有机药物大都采用典型的官能团反应根据反应现象可分呈色反应 沉淀反应 荧光反应 生成气体的反应等类型 常见的呈色反应类型 三氯化铁呈色反应 具有此反应的药物 一般都含有酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物 如水杨酸类中的阿司匹林 对氨基水杨酸钠 贝诺酯与三氯化铁的反应 异羟肟酸铁反应 具有此反应的药物 一般多为芳酸及其酯类 酰胺类 如盐酸普鲁卡因具有芳酰胺结构 加入浓过氧化氢 缓缓加热至沸后 先被氧化成羟肟酸 再与三氯化铁作用形成配位化合物羟肟酸铁 显紫红色 随即变成暗棕色至棕黑色 有机药物大都采用典型的官能团反应如三氯化铁呈色反应 茚三酮反应 众氮化 偶合显色反应等 茚三酮反应 具有此反应的药物 一般在其化学结构中都含有脂肪氨基结构 如 氨基酸 多肽 蛋白质与茚三酮试液反应生成蓝紫色 红紫色或紫色 氨基糖苷类抗生素因具有 氨基苷结构 可与茚三酮缩合成蓝紫色化合物 硫酸庆大霉素的鉴别 取本品5mg 加水1ml溶解 加0 1 茚三酮的水饱和正丁醇1ml与吡啶0 5ml 在水浴中加热5min 呈蓝紫色 重氮化 偶合显色反应 具有此反应的药物 一般都有芳伯氨基或能产生芳伯氨基结构的药物 如贝诺酯具有潜在的芳伯氨基 加酸水解后能产生芳伯氨基结构 在酸性试液中与亚硝酸钠试液进行重氮化反应 生成的重氮盐与碱性 萘酚偶合生成橙红色沉淀 生成沉淀类型 与BaCl2试液的反应如硫酸阿托品的水溶液 加BaCl2试液 即生成白色沉淀 沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解 与硝酸银试液的反应 如 巴比妥类药物具有丙二酰脲 CONHCONHCO 或酰亚胺基团 在合适的pH条件下 可与某些重金属离子如Ag Cu2 Hg2 等反应呈色或产生沉淀 维生素C与硝酸银的反应 维生素C分子中含有二烯醇基结构 具有很强的还原性 可被硝酸银氧化生成银的黑色沉淀 方法 取本品0 2g 加水10ml溶解 取该液5ml 加硝酸银试液0 5ml 生成银的黑色沉淀 如与银盐的反应 取供试品约0 1g 加碳酸钠试液1ml与水10ml 振摇2min 滤过 滤液中逐滴加入硝酸银试液 即产生白色沉淀 振摇 即溶解 继续滴加过量的硝酸银试液 沉淀不溶解 维生素C与硝酸银的反应 维生素C分子中含有二烯醇基结构 具有很强的还原性 可被硝酸银氧化生成银的黑色沉淀 方法 取本品0 2g 加水10ml溶解 取该液5ml 加硝酸银试液0 5ml 生成银的黑色沉淀 与重金属Pb2 Cu2 等离子的反应硫酸阿托品的水溶液 加醋酸铅试液 生成白色沉淀 但沉淀在醋酸或氢氧化钠试液中溶解 磺胺甲噁唑与硫酸铜成盐的鉴别试验 取本品约0 1g 加水与0 4 氢氧化钠溶液各3ml 振摇使溶解 滤过 取滤液加硫酸铜试液1滴 即生成草绿色沉淀 注意NaOH溶液不可过量 吡啶类药物与重金属离子反应形成沉淀 如尼可刹米与硫酸铜试液反应生成草绿色沉淀 与生物碱沉淀剂的反应常用的生物碱沉淀剂 1 碘化汞钾试剂 在酸性溶液中与生物碱反应生成白色或淡黄色沉淀 2 碘化铋钾试剂 在酸性溶液中与生物碱反应生成桔红色沉淀 3 碘化钾碘试剂 在酸性溶液中与生物碱反应生成棕红色沉淀 4 硅钨酸试剂 在酸性溶液中与生物碱反应生成灰白色沉淀 5 磷钼酸试剂 很灵敏 在中性或酸性溶液中与生物碱反应生成鲜黄色或棕黄色沉淀 典型的例子就是维生素B1中的硫色素反应 维生素B1在碱性氢氧化钠溶液中 可被铁氰化钾氧化生成硫色素 硫色素溶于正丁醇中 显蓝色荧光 方法 取本品5mg 加氢氧化钠试液2 5ml溶解 加铁氰化钾试液0 5ml与正丁醇5ml 强力振摇2min 上面的醇层显强烈的蓝色荧光 加酸使成酸性 荧光即消失 再加碱使成碱性 荧光又重现 此反应为维生素B1的专属反应 常见的生物碱 一 烟碱又名尼古丁 属吡啶衍生物类生物碱 二 莨菪碱和阿托品莨菪碱和阿托品属莨菪烷衍生物类生物碱 三 吗啡和可待因 四 麻黄碱又叫麻黄素 五 小檗碱又叫黄连素 六 长春新碱 在试验时 通常选用三种以上不同的生物碱沉淀试剂进行试验 如均为正反应表示检液中可能有生物碱存在 如须确证 则要进一步精制后 再行检验 如再次均成正反应 即可肯定有生物碱存在 如第一次试验时就对三种沉淀剂呈负反应 即可肯定无生物碱存在 荧光反应类型药物本身可以发射荧光药物溶液加硫酸使其呈酸性后 在可见光下发射荧光药物和溴反应 在可见光下发射荧光药物和间苯二酚反应 发射荧光显 示例维生素B1中的硫色素反应 维生素B1在碱性氢氧化钠溶液中 可被铁氰化钾氧化生成硫色素 硫色素溶于正丁醇中 显蓝色荧光 方法 取本品5mg 加氢氧化钠试液2 5ml溶解 加铁氰化钾试液0 5ml与正丁醇5ml 强力振摇2min 上面的醇层显强烈的蓝色荧光 加酸使成酸性 荧光即消失 再加碱使成碱性 荧光又重现 此反应为维生素B1的专属反应 生成气体的反应类型 多数胺类药物 酰脲类药物及莫些酰胺类药物 可经强碱处理后 加热 产生氨气 如氯噻酮片的鉴别方法 取本品细粉适量 约相当于氯噻酮50mg 加氢氧化钠1g 用小火熔融 即放出氨气 能使湿润的碱性碘化汞钾试纸变棕黄色 化学结构中含有硫的药物 可经强酸处理后 加热 产生硫化氢气体 含碘的有机药物 经直火加热 可生成紫色的碘蒸气 如西地碘片鉴别实验 1 取本品2片 研细 置锥形瓶中 加水10ml溶解后 加淀粉指示液2ml 即显蓝色 煮沸 蓝色即消失 放冷仍显蓝色 但经长时间煮沸 蓝色即不重显 含醋酸酯和乙酰胺类药物 经硫酸水解后 加乙醇后可产生乙酸乙酯的香味 如醋酸地塞米松的鉴别试验方法 取本品50mg 加乙醇制氢氧化钾试液2ml 置水浴中加热5分钟 放冷 加硫酸溶液 1 2 2ml 缓缓煮沸1分钟 即发生乙酸乙酯的香气 2仪器要求洁净 以免干扰化学反应 3试药与试液除另有规定外 均应按中国药典2010年版二部附录XVB项下的方法取用或进行配制 贮藏 要求临用新配的 必须新鲜配制 操作方法同中国药典2010年版二部附录 5试验条件被测物质的浓度鉴别试验中加入的试剂一般是过量的 溶液的浓度主要指被鉴别药物的浓度 溶液的浓度直接影响到生成的沉淀 颜色 吸光度值等参数的变化 因此 必须严格规定 溶液的温度一般温度上升10 可使反应速度增加2 4倍 应按各试验项下规定的温度进行试验 如达不到时 可适当加温 pH值应在有利于反应的完成的pH条件下进行试验如在丙二酰脲的反应中 要求加Na2CO3试液 目的是为了使药物形成Na盐 溶解于水中 便于鉴别 在水杨酸与FeCl3的反应中 要求pH为4 6 因为在强酸性溶液中生成的配位化合物易分解 反应时间有机化合物的反应速度一般要比无机化合物的反应要慢 所以达到预期的反应时间也要长 对于反应不够灵敏 试验条件不易掌握的试验 可用对照品进行对照试验 共存物质的干扰必要时可对干扰物质进行分离 或者选择专属性更高的鉴别方法其它注意事项5 6 1供试品和供试液应按各该药品项下的规定取用 固体供试品应研成细粉 液体供试品如果太稀可浓缩 如果太浓可稀释 5 6 2试药和试液的加入量 方法和顺序均应按各试验项下的规定进行 如未作规定 试液应逐滴加入 边加边振摇 并注 5其它注意事项 5 1 1供试品和供试液应按各该药品项下的规定取用 固体供试品应研成细粉 液体供试品如果太稀可浓缩 如果太浓可稀释 5 1 2试药和试液的加入量 方法和顺序均应按各试验项下的规定进行 如未作规定 试液应逐滴加入 边加边振摇 并注意观察反应现象 意观察反应现象 5 6 3试验在试管或离心管中进行 如需加热 应小心仔细 并使用试管夹 边加热边振摇 试管口不要对着试验操作者 5 6 4试验中需要蒸发时 应置于玻璃蒸发皿或瓷蒸发皿中 在水浴上进行 5 6 5沉淀反应有色沉淀反应宜在白色点滴板上进行 白色沉淀反应