外周血细胞形态检验.ppt

外周血细胞形态检验 赣州市妇幼保健院丁克文 外周血细胞检验程序涂片 染色与镜检 外周血细胞形态检验报告方式 外周血红细胞异常形态检验大小 形态 染色与结构异常 点彩红细胞 外周血白细胞异常形态检验中性粒细胞异常变化 异常淋巴细胞 血小板形态与寄生虫检验血小板大小 形态 数量变化 寄生虫 讲授内容 外周血细胞检验程序 血涂片的制备 器材清洁 干燥 无尘 无油脂的载玻片 操作在玻片近一端1 3处 加一滴血液 握住另一张边缘光滑的推片 以30 45 角使血滴沿推片迅速散开 快速 平稳地推动推片至载玻片的另一端 注意事项 血膜呈舌状 头 体 尾分明 空气中晃动 尽快干燥 37 恒温箱中促干 涂片的厚薄 长度与血滴大小 10 20 l 与血片质量 1h内染色或在1h内甲醇固定 正确清洁玻片 抗凝血或毛细血管血涂片 EDTA能阻止PLT聚集 抗凝血液4h内涂片 血涂片染色 原理瑞氏 Wright 染色法 经典染色法 瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应 又有物理吸附作用 试剂 瑞氏染液瑞氏染料0 1g甲醇 AR 60ml pH6 8磷酸盐缓冲液 pH6 4 6 8 磷酸二氢钾 KH2PO4 0 3g磷酸氢二钠 Na2HPO4 0 2g加少量蒸馏水溶解 再加至1000ml 操作 加瑞氏染液数滴 固定血膜约1min 滴加约等量的缓冲液与染液混合 室温下染色5 10min 用流水冲去染液 待干燥后镜检 注意事项 PH对细胞染色有影响 未干透的血膜不能染色 染色时间与染液浓度 染色时温度成反比 不能先倒掉染液 用流水冲去 血膜上有染料颗粒沉积 可加少许甲醇 先在低倍镜下浏览全片 了解染色好坏和细胞分布情况 观察有无异常细胞 选择涂片体尾交界处染色良好的区域 在油镜下计数100个白细胞 按其形态特征进行分类计数 求出各类细胞所占百分数 血涂片镜检 注意事项 分类时应从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈城垛状迂回移动 计数使不能重复和遗漏 白细胞数明显减少的血片 应检查多张血片 分类见有核红细胞 不计入100个白细胞内 以分类100个白细胞过程中见到多少有核红细胞报告 并注明所属阶段 除慢淋外 破碎细胞或不能识别细胞不超过白细胞总数的2 若破碎细胞仍能明确鉴别 如破碎的嗜酸性粒细胞 应包括在分类计数中 在结果报告中应对破碎细胞或不能识别细胞作适当描述 分类中应注意观察成熟红细胞 血小板的形态 染色及分布情况 注意有无寄生虫和其他异常所见 白细胞形态变化较大 遇有疑问应请示上级主管或主任进行核实 以减少错误 异常红细胞形态检查 大小异常 正常红细胞大小较为一致 直径6 9um在各种贫血时 红细胞可出现大 小不一 直径 10um为大红细胞 15um为巨红细胞 常见于巨幼贫 肝脏疾病等 直径 6um为小红细胞 多见于缺铁性贫血等 直径相差1倍以上为大小不均右图 大红细胞 上 小红细胞 下 中央苍白区扩大 形态异常 RBC直径通常2 6um 呈小圆形 细胞中心区蛋白含量较正常多 见于遗传性球形红细胞增多症 25 以上 自身免疫性溶贫和异常Hb病 HBS HBC病等 球形红细胞 红细胞呈椭圆形 横短 长大 有时呈畸形 正常人可见到 15 见于以下疾病 1 遗传性椭圆性RBC增多症 高于25 50 才有诊断价值 2 大细胞性贫血时可达25 3 其他各类贫血有不同程度的增多 椭圆形红细胞 比正常红细胞扁薄 中心有少许血红蛋白 部分可与周围的血红蛋白连接 边缘部染色较中央深 故呈靶状 主要见于以下疾病 1 珠蛋白生成障碍性贫血2 严重缺铁性贫血3 一些血红蛋白病 血红蛋白C D E S病 4 肝病 脾切除后及阻塞性黄疸等 靶形红细胞 细胞狭长似镰刀 也可呈麦粒状或冬青叶样 主要见于遗传性镰形红细胞增多症 镰形红细胞 红细胞淡染区呈裂口状狭孔 正常 4 增多见于以下疾病 1 口形红细胞增多症2 急性乙醇中毒 口形红细胞 棘形红细胞是一种带刺状的红细胞 刺呈针刺状或尖刺状 见于以下疾病 1 棘细胞增多症 遗传性血浆 脂蛋白缺乏症时 棘形红细胞可高达70 80 2 严重肝病或制片不当 棘形红细胞 锯齿细胞也称短棘形细胞 细胞突出较棘细胞短 但分布均匀 主要见于尿毒症 微血管病性溶血性贫血 丙铜酸激酶缺乏症 阵发性睡眠性血红蛋白尿症等 锯齿细胞 裂红细胞指红细胞碎片 包括盔形红细胞等 多见于DIC和心源性溶血性贫血等 其他也多见于化学中毒 肾功能不全 血栓性血小板减少性紫癜等 裂红细胞 红细胞中心淡染区扩大 多见于缺铁性贫血 地中海贫血及其他血红蛋白病 着色过浅 染色异常 中心淡染区不见 着色较深 多见于溶血性贫血及大细胞性贫血 着色过深 红细胞经瑞氏染色染成灰蓝色 灰红色 淡灰色 包体较正常红细胞稍大 这是一种尚未完全成熟的网织红细胞 多染性物质是核糖体 随着细胞的成熟而逐渐消失 主要见于各种增生性贫血 嗜多色性红细胞 结构异常 用亚甲蓝染色 成熟红细胞内有散在的深蓝色嗜碱性颗粒 外周血中点彩红细胞增多 表示贫血时骨髓再生旺盛或有紊乱现象 某些重金属中毒时可大量出现 嗜碱性点彩红细胞 成熟红细胞内有染成紫红色的细线状环 呈圆形或8字形 可能是残留核膜所致 见于恶性贫血 溶血性贫血 铅中毒等 卡波环 成熟红细胞中含有紫红色圆形小体 大小不等 1 2 m 数量不一 可能是残留的核染色质微粒 见于增生性贫血 脾切除后 巨幼红细胞性贫血 恶性贫血等 注意与血小板区别 豪乔氏小体 染色质小体 有核红细胞 正常成人血片中不会出现 新生儿出生1周内可能有少量有核红细胞出现 溶贫 急 慢性白血病 红白血病 髓外造血及严重缺氧等常见有核红细胞 主要是晚幼红 右图 中幼红 上 晚幼红 下 异常白细胞形态检验 中性粒细胞的异常变化 核象变化包括核左移和核右移 反映中性粒细胞的成熟程度 正常血象中有少量杆状核细胞出现 它与分叶核细胞之间的比值约为1 13 核左移 外周血液中出现不分叶粒细胞 指杆状核粒细胞 正常 1 5 幼稚粒细胞 正常 不出现 5 常见于感染 特别是急性化脓性感染 急性中毒 急性失血及急性溶血等 如晚幼粒 中幼粒等细胞增多为极度左移 多见于类白血病反应或白血病 具体表现为 伴白细胞总数增高的核左移称再生性移 常见于急性化脓性感染 如大叶性肺炎等 白细胞总数不增加或减低的核左移称退行性左移 常见于严重感染 机体抵抗力低下时 如伤寒 感染中毒性休克的败血症等 中性粒细胞核出现4 5叶 正常时多为3叶 占50 70 或更多 其百分数 3 这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现 常见于巨幼细胞性贫血和使用抗代谢药物后 此外 在疾病进行期突然出现核象右移 提示预后不良 核右移 毒性变化 严重感染 恶性肿瘤 各种重金属或药物中毒 大面积烧伤等 中性粒细胞可出现形态变化 具体表现为 细胞大小不均 为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致 中毒颗粒 细胞质中部分或全部颗粒变粗 着色深 颗粒的分布及大小等 可能为中性颗粒成熟过程中发生变性所致 可在细胞质或核中出现 常为多个 被认为是细胞脂肪变性后未能着色所致 空泡 细胞质内出现嗜碱性多呈斑块 梨形或云雾状 可能为核浆发育不平衡所致 为细胞严重毒性变的表现 杜勒小体 胞核有各种形态的芽状突出 临床意义尚不明确 可能与中毒 癌转移 严重的放射损伤等有关 核棘突 退行性变 表现为胞体肿大 结构模糊 边缘不清 胞核可呈固缩 肿胀 破碎 溶解等变化 退行性变是细胞衰老死亡的表现 淋巴细胞的异常变化 异形淋巴细胞 细胞大小为10 25 l 形态各异 呈圆形 卵圆形或不规则形 细胞核形各异 呈圆形 卵圆形 凹陷形 折叠形 裂隙形或分叶形 核染色质可为细致 中度致密或粗颗粒 副染色质无或少量 核仁无或偶见 大小和染色性各异 细胞质中等至大量 染