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文档简介
实验报告实验项目:植物组织游离脯氨酸含量的测定实验时间:2015.04.11小组成员:一、 实验目的:了解植物体内水分亏缺与脯氨酸积累的关系二、 实验所用仪器、药品、材料:1.仪器分光光度计,水浴锅,漏斗,大试管(20ml),具塞刻度试管(20ml),注射器或滴管(5-10ml)。2.材料植物小麦叶片3.试剂(1)3%磺基水杨酸(2)甲苯(3)2.5%酸性茚三酮显色液:冰乙酸和6moll-1磷酸以3:2混合,作为溶剂进行配制,此液在4下2-3天有效(4)脯氨酸标准溶液:准确称取25mg脯氨酸,用蒸馏水溶解后定容至250ml,其浓度为100gml-1。再取此液10ml,用蒸馏水稀释至100ml,即成10gml-1的脯氨酸标准溶液。三、 实验步骤:1、 标准曲线的绘制:(1)取7支具塞刻度试管按表9.2-1加入各试剂。混匀后加玻璃球塞,在沸水中加热40min。(2)取出冷却后向各管加入5ml甲苯充分振荡,以萃取红色物质。静置待分层后吸取甲苯层以0号管匀对照在波长520nm下比色。(3)以消光值为纵坐标,脯氨酸含量为横坐标,绘制标准曲线,求线性回归方程。表921各试管中试剂加入量试管0123456脯氨酸标准溶液(ml)00.20.40.81.21.62水(ml)21.81.61.20.80.40冰乙酸(ml)2222222茚三酮显色液(ml)3333333Pro含量(g)0248121620消光值00.0240.0450.0880.1260.1730.2322、 待测物的提取、显色、比色等测定的数据记录:3、 计算结果:从标准曲线中查出测定液中脯氨酸浓度脯氨酸g.g-1(干或鲜重) =(CV)(AW)1 式中:C一提取液中脯氨酸浓度(PS),由标准曲线求得: V 提取液总体积(ml) A - 测定时所吸取得体积(ml) W- 样品重(g)脯氨酸g.g-1(干或鲜重) =(CV)(AW)1=四、 实验小结:(本次实验成败之处和原因分析以及改进措施)1.配置的酸性茚三酮溶液仅在24h内稳定,因
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