b型肝炎病毒基因突变遗失和造成肝病的相关性(ppt).ppt

张敏慧 B型肝炎病毒基因突变遗失和造成肝病的相关性 TheCorrelationofHepatitisBviruswithGeneDeletionandMutationstoLiverDisease 大纲 B型肝炎病毒简介临床结果病毒基因型病毒基因突变体外实验方法体外实验结果总结 B型肝炎带原者变成严重肝疾病的因子 宿主例如年纪 性别 种族 环境例如C型 D型肝炎病毒的合并感染 爱滋病毒的合并感染 黄麴毒素 喝酒 病毒因子病毒量 病毒的基因型 病毒基因突变 HBV B型肝炎病毒 双股DNA的病毒 全长共3215核苷酸 制造4种蛋白质 分别为表面抗原 HBsAg e抗原 HBeAg 核心抗原 HBcAg 聚合酶 polymerase 病毒的复制是以反转录酶 reversetranscriptase 来复制 因为复制时缺少proofreading的功能 因此病毒会随着感染的时间愈长基因突变的病毒也会在人体内积累 A分布在北欧和非洲地区 B和C分布在东亚地区 D分布在南欧 北非和中东地区 E分布在非洲地区 F则分布在中南美地区 Okamotoetal 1988 Norderetal 1992 Stuyveretal 2000 B型肝炎病毒基因型 全世界B型肝炎病毒可分为A到H8种基因型 Leeetal 2003 Kaoetal 2000 基因型C病人对于严重肝疾病的发生比基因型B病人有更强的相关性 B型肝炎病毒precore和corepromoter区域的基因是制造和控制e抗原表现的位置 研究显示自发性的e抗原反转可以侦测到90 precore区域的基因突变 而自发性的e抗原反转时precore区域的基因突变的比率愈高也较会发生e抗原反转后持续的肝炎发作而增加肝硬化和肝癌的危险性 最常见的precore区域的基因突变是位在第1896个核苷酸发生G到A的点突变 A1896 Chuetal 2002 Okamotoetal 1994 Kurosakietal 1996 病毒基因突变 研究发现e抗原阴性的B型肝炎病人时常侦测到corepromoter区域基因突变 最常见的corepromoter区域基因突变是两个核苷酸的改变 分别是核苷酸1762由A变至T和核苷酸1764由G变至A T1762 A1764 A1896和T1762 A1764突变株由于可以防止和降低e抗原的制造 因此强烈被认为是造成e抗原反转的因子之一 Chuetal 2002 Okamotoetal 1994 Kurosakietal 1996 病毒基因突变 Liuetal 2011 除了宿主因素之外 B型肝炎病毒基因型C和precore和corepromoter区域的基因突变在e抗原反转后肝炎再复发也扮演一个重要的角色 在e抗原阳性病人T1762 A1764突变株在预测肝硬化是一个很重要的独立因子 而B型肝炎病毒基因型C和肝硬化的关联性应该是因为基因型C和T1762 A1764突变株的关系密切所致 临床结论 establishmentofvariousHBVDNAclonescarryingdifferentgenotype GT precore PC andbasalcorepromoter BCP sequences Liuetal 2011 体外实验方法 b assaysforintracellularandextracellularviralDNAandantigens Wt wildtype Mt mutant Liuetal 2011 体外实验方法 Expressionofintracellular Expressionofextracellular Liuetal 2011 体外实验结果 HBVDNA surfaceprotein coreprotein HBVDNA surfaceantigen eantigen Southern NorthernandWesternblottingassays Real timePCRassay Liuetal 2011 体外实验结果 Liuetal 2011 于基因型C病毒株中precore突变或基因型Cprecore野生型病毒株中corepromoter突变时 细胞内核蛋白表现增加 与基因型Bprecore野生型病毒株相比 基因型Cprecore野生型病毒株的细胞外表面蛋白表现量显着较低 不论何种HBV基因型和corepromoter序列组合 precore突变的存在与细胞外HBVDNA表现相关较低 总结 Liuetal 2011 不论何种precore和corepromoter序列组合 基因型C的HBsAg分泌较低 基因型B的HBeAg分泌低于基因型C precore和cor