Agilent1260型高效液相色谱仪再验证报告

Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 1 页 共 15 页 Agilent1260Agilent1260 型高效液相色谱仪型高效液相色谱仪验证报告验证报告 文件编号 VR SB 3020 版本 00 起草人 修订人 日期 年 月 日 审核人 日期 年 月 日 审核人日期 年 月 日 批准人 日期 年 月 日 执行日期 年 月 日 印刷份数 份发出份数 份 分发部门 质量管理部 供 应 部 生产技术部 行 政 部 仓 库 备注 请在需要使用本文件的部门后 里打 不需使用的打 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 2 页 共 15 页 目目 录录 1 概述 2 验证目的 3 验证时间计划 4 验证培训 5 验证人员及职责 6 验证所需文件 7 验证内容 8 偏差处理 9 方案修改记录 10 风险的接受与评价 11 验证结果及评价 12 验证周期 13 最终批准 14 附件 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 3 页 共 15 页 1 概述 1260 型高效液相色谱仪安捷伦公司生产 用于本公司成品 原料 中间品定性或定分析检 测 由输液泵 自动进样器 柱温箱 紫外检测器 色谱工作站组成由高压输液泵将规定的 流动相泵入色谱柱 自动进样器注入供试品 由流动相带入色谱柱内 各组分在柱内被分离 并依次进入检测器 由色谱工作站软件记录和处理色谱信号 1 1 设备原理 二元泵基于双通道 双活塞杆串联设计 包括了溶剂传输系统必输实现的所有基本功能 才通过两个可产生最高为 600bar 压力泵组件 可对溶剂进行计量并将溶剂传输至高压位置 每个通道由一套泵组件组成 包括泵驱动器 泵头 带有可更换滤芯的主动输入阀和出口球 阀 两个通道在一个低容积混合腔中连接 混合腔通过限毛细管连接到缓冲单元和混合器上 压力传感器会检测泵压力 集成有 PTFE 过滤芯的冲洗阀装在泵的出口处 便于向泵头灌注 流体 1 2 设备组成 本仪器主要由二元泵 G1312B 变波长紫外检测器 G1314F 自动进样器 G1329B 柱 温箱 G1316A 等模块组成 可进行高效液相色谱的分析 1 3 技术参数 设备名称高效液相色谱仪 设备型号Agilent1260 型 进样瓶数100 个 进样量0 1ul 50ul 输液系统连个活塞串联泵 可设置的流速范围0 001ml min 5ml min 流量准确度 1 操作压力范围0 bar 600bar Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 4 页 共 15 页 梯度形成高压二元混合 电压 220V 2 验证目的 为确认高效液相色谱仪测试数据准确可靠 性能稳定 特制订本验证方案 对高效液相 色谱仪进行验证 验证过程应严格按照本方案规定的内容进行 若因特殊原因确需变更时 应填写验证方案变更申请及批准书 报验证委员会批准 2 1 通过对设备技术指标适用性的审查 确认 Agilent1260 型高效液相色谱仪的设计选型符 合检验要求及 GMP 管理要求 2 2 检查并确认 Agilent1260 型高效液相色谱仪安装符合设计要求 技术文件符合 GMP 管理 规范 2 3 检查并确认 Agilent1260 型高效液相色谱仪的运行符合设计技术参数要求 2 4 检查并确认 Agilent1260 型高效液相色谱仪在正常运行下 性能条件能够持续符合设计 和检验要求 3 验证时间计划 验证时间安排 年 月 日至 年 月 日 4 验证培训 培训人员签到表见附件 1 培训内容Agilent1260 型高效液相色谱仪验证 培训对象参与验证的检验人员 培训时间2015 年 10 月 09 日 培训讲师李敏 吴华 评估方式讨论并回答问题 培训效果评价 评价人 日期 5 验证人员及职责 姓名职务职责签名 周事农质量管理负责人兼质量受权人负责验证方案和报告的最终批准 李敏质量管理部部长负责验证方案和报告的审核及评价 朱长富QC 主管负责验证方案和报告的审核及评价 陈亚玲QA 主管负责全面协调各项验证试验 吴华 QC 负责验证方案的具体操作 检验和记录 宁遵红 QC 负责验证方案的具体操作 检验和记录 6 验证所需文件 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 5 页 共 15 页 文件名称文件编号生效日期存放处 高效液相色谱法标准操作规程 SOP QCTY 005 2015 年 9 月 1 日档案室 Agilent1260 型高效液相色谱仪 使用 维护 保养标准操作规程 SOP SB SY 363 2015 年 9 月 1 日档案室 质量风险管理规程 SMP Z7 002 2015 年 9 月 1 日档案室 偏差处理管理规程 SMP QA 011 2015 年 9 月 1 日档案室 确认与验证管理规程 SMP YZ 001 2015 年 9 月 1 日档案室 7 验证内容 7 1 设计确认 7 1 1 设计确认的目的 确认质量管理部新购 AGILENT1260 型高效液相色谱仪是否按照我公司 URS 进行设计 并 符合 GMP 安全 环保等方面标准 7 1 2 设计确认的范围 本设计确认的范围包含质量管理部 AGILENT1260 型高效液相色谱仪及其附属设备 并包 括相配套的公用工程 7 1 3 设计确认的内容 7 1 3 1 URS 符合性评估 将该设备的文件及图纸与公司提出的 URS 进行比较 确认该设备已符合用户需求规范 检查及确认结果记入 附表 2URS 符合性评估表 7 1 3 2 GMP 符合性评估 将该设备的文件及图纸对照 GMP 有关设备功能和设计的规定 作出符合性判定 检查及 确认结果记入 附表 3GMP 符合性评估表 7 1 3 3 职业健康 安全与环保符合性评估 将设备的文件及图纸与公司提出的 URS 进行比较 确认该设备已符合用户需求规范中有 关职业健康 安全与环保内容 检查及确认结果记入 附表 4 职业健康 安全与环保符合性 评估表 7 1 4 设计确认的结论 评价人 日期 年 月 日 7 2 安装确认 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 6 页 共 15 页 7 2 1 安装确认的目的 检查并确认 Agilent1260 型高效液相色谱仪的随机文件以及附件应符合使用和管理要求 同时 检查并确认 Agilent1260 型高效液相色谱仪的安装符合设计要求 7 2 2 开箱检查和资料附件的确认 7 2 2 1 依据 Agilent1260 型高效液相色谱仪的装箱单 确认高效液相色谱仪的规格型号 随机附件及文件资料 7 2 2 2 根据产品使用说明书 确认高效液相色谱仪的使用范围是否符合设计要求 7 2 2 3 对文件资料进行清点 收集和保管 7 2 3 确认检查结果计入下表 并作出评价 Agilent1260 型高效液相色谱仪编号 序号确认项目确认内容及要求是否符合标准 1 高效液相色谱仪型号Agilent1260 型 是 否 2 高效液相色谱仪名称高效液相色谱仪 是 否 3 出厂编号有 是 否 4 适用范围有 是 否 5 数量1 台 是 否 6 装箱单有 是 否 7 设备说明书有 是 否 8 设备合格证有 是 否 9 设备安装图有 是 否 10 仪器仪表合格证有 是 否 11 主配套件的说明书 质保 书 有 是 否 12 备品清单及数量有 是 否 检查人日期年 月 日 结果分析与评价 评价人 日期 年 月 日 7 2 4 安装确认的内容 7 2 4 1 依据 Agilent1260 型高效液相色谱仪安装图的设计要求 检查高效液相色谱仪的安 装位置和空间能否满足检验和方便维修的需求 7 2 4 2 依据 Agilent1260 型高效液相色谱仪安装图要求 检查外接管道是否符合要求 7 2 4 3 依据 Agilent1260 型高效液相色谱仪的技术要求 检查外接电源 7 2 4 4 依据 Agilent1260 型高效液相色谱仪的技术要求 检查主要精密组件的安装 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 7 页 共 15 页 7 2 4 5 依据 Agilent1260 型高效液相色谱仪机器外观 检查机器的完整性和其它问题 7 2 4 6 所有仪器仪表经过检定或校准 且全部在有效期内 检查及确认结果记入 附表 5 仪器仪表检定或校准检查记录 7 2 4 7 安装确认检查结果记入下表 并作出评价 Agilent1260 型高效液相色谱仪编号 序号项目名称可接受标准确认方法是否符合标准 1 检验维修空间有适当的检验维修空间对照设计图纸检查 是 否 2 仪器仪表 有计量合格证 并在有效期 内 检查计量合格证 是 否 3 安装地点质量管理部与图纸相符 是 否 4 电压 频率 220V 检查 是 否 5 外观 无划伤及凹凸现象 表面整 洁 目测 是 否 6 电脑完好目测 是 否 7 检测器完好目测 是 否 8 泵完好目测 是 否 9 柱温箱完好目测 是 否 10 进样阀完好目测 是 否 11 在线混合器完好目测 是 否 12 打印装置完好目测 是 否 13 环境通风 目测 是 否 14 环境温度10 30 测量 是 否 15 环境相对湿度小于 65 测量 是 否 16 安装位置仪器应平稳而牢固地安置在 工作台上 目测 是 否 17 接地接地良好 目测 是 否 18 电源线与插孔吻合 目测 是 否 19 其它条件 工作台不受阳光直射 室内应无腐蚀性气体或其它 影响测定的气体干扰 周围应无影响测定的强电场 磁场和强烈震动 目测 是 否 检查人日期年 月 日 结果分析与评价 评价人 日期 年 月 日 只有安装确认符合要求后 才能进行下一步的运行确认 7 3 运行确认 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 8 页 共 15 页 7 3 1 运行确认的目的 检查和测试设备运行技术参数 确定 Agilent1260 型高效液相色谱仪符合药典检验参数 要求和品种项目要求 7 3 2 运行前检查 运行前根据下表检查 并把检查结果记入下表 并作出评价 Agilent1260 型高效液相色谱仪编号 序号运行前的检查项目是否符合标准 1 检查电源电压是否正常 通电前检查电源开关位置 是 否 2 检查安全接地线的外连接线是否正常 接触是否良好 是 否 3 检查色谱柱是否连接好 是 否 检查人日期年 月 日 结果分析与评价 评价人 日期 年 月 日 7 3 3 验证用测试仪器仪表的确认 所有用于验证测试仪器仪表均应有确认 并把确认结果记入下表 并作出评价 序号检测设备名称规格型号测量范围校正单位有效期至 1 2 3 4 检查人日期 年 月 日 结果分析与评价 评价人 日期 年 月 日 7 3 4 运行项目确认 7 3 4 1 设备安全性能确认 依据 Agilent1260 型高效液相色谱仪使用说明书 对设备安全性能检查结果记入下表 并作出评价 Agilent1260 型高效液相色谱仪编号 序号控制程序确认项目是否符合标准 1 有安全保护接地 电器安全可靠 无裸露电线 是 否 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 9 页 共 15 页 检查人日期年 月 日 结果分析与评价 评价人 日期 年 月 日 7 3 4 2 泵的验证 检测泵的流速 通过测量一定时间进入泵的体积检测泵的实际流速 a 试剂与设备 项目备注 容量瓶 25mL 收集出液管流出的水 天平称量容量瓶和收集的水的重量 秒表出口管接在泵出口 b 检查过程 项目 1 设置流速为 0 500mL min 1 000mL min 1 500mL min 2 将出液管放在 25mL 预先称定的容量瓶内 3 开启泵 同时开启秒表 4 收集了 25min 15min 10min 超纯水的时候 同时关闭泵 停止秒表 5 利用公式 SR Fmax Fmin Fm 100 计算得稳定性误差 泵流量设定值误差 SS 和流量稳定性误差 SR 的确认 测试标准及结果 仪器名称 型号 流量设定值 ml min 0 5ml min1 0ml min1 5ml min 测量次数 333 收集流动相时间 t min 251510 25ml 容量瓶的重量 W1 g 容量瓶 流动相的重量 W2 g 流量实测值 F ml min 流量实测值平均值 F ml min SS5 3 3 允许误差 SR3 2 2 SS 实测误差 SR Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 10 页 共 15 页 结果分析与评价 评价人 日期 年 月 日 测试条件 流动相 经 0 45 m 微孔滤膜过滤的纯化水 色谱柱 4 6mm 250mm 室 温 水的相对密度为 测试方法 启动仪器 以水作为流动相 待压力稳定后 在流动相出口处用称重过的 25ml 容量瓶收集流动相 同时用秒表计时 按各流量规定的时间收集流出的流动相 精密称定 每个流量测定三次 记录测试温度 按下列计算流量设定值误差 S1 和稳定性误差 S2 SS F Fs Fs 100 SR Fmax Fmin Fm 100 式中 SS 为泵流量设定值误差 SR 为流量稳定性误差 F W2 W1 t 为流量实测值 ml min 式中 W2 容量瓶 流动相的重量 g W1 容量瓶的重量 g 实验温度时水的密度 g cm3 t 收集流动相的时间 min Fs 流量设定值 Fm 同一组测量值的算术平均值 ml min Fmax 同一组测量中流量最大值 ml min Fmin 同一组测量中流量最小值 ml min 7 3 4 3 柱温箱的验证 检查柱温箱的准确度及精密度 检查过程 项目 1 设定柱温箱温度为 25 等待温度平稳 2 将校正过的温度计放入柱温箱 等待 10 分钟 开始计时 3 每隔 30min 读取温度计显示温度及柱温箱显示温度一次 共读取 6 次 4 依次设置柱温为 30 40 重复 2 3 的过程 5 最大偏差不超过 3 0 最大波动不超过 1 0 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 11 页 共 15 页 验证结果见 附件 6 柱温箱验证表 7 3 4 4 紫外检测器 基线漂移和基线噪声的测定 检查漂移和噪声不超过规定忽略的水平 a 检查之前的准备 项目 使用检测器与计算机工作站相连 以 1 0mL min 的流速输送甲醇 b 检测过程 项目 打开各模块的电源开关 仪器应能通过初始化 当状态指示灯为关 而电源指示灯亮时 模块处于预运行状态 做好开始分析的准备 开启工作站 设定波长为 254nm 流速 1 0mL min 使其走基线 2 小时 在走基线的第二个小时期间测量基线的最大波动 以此值作为基 线漂移值 使其走基线 10 分钟 使用此结果数据测量最大噪声值 并且以此值作为噪声值 在测 量噪声时 不考虑所有基线漂移数据 7 3 4 5 自动进样器进样精密度控制检查 a 检查之前的准备 项目 使用自动进样器与计算机工作站相连 以 1 0mL min 的流速输送甲醇 准备好萘 甲醇溶液 b 参数设定 设备参数 泵单元流速 1 0mL min 最大压强 20 0MPa 柱温箱柱箱温度 40 时间程序5 00min 停止 UV 检测器波长 273nm 灵敏度 2 1V AU 流动相甲醇 计算机工作站设定停止时间为 5 00min 进样为 6 次 验证结果见 附件 7 高效液相色谱仪运行确认记录 只有运行确认符合要求后 才能进 行下一步的性能确认 7 4 性能确认 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 12 页 共 15 页 7 4 1 性能确认的目的 确认 Agilent1260 型高效液相色谱仪是否符合检验和 GMP 管理的要求 7 4 2 所需设备 项目备注 流动相 乙腈 水 4 1 体积比 乙腈溶剂为 HPLC 级 色谱柱 4 6mm 长 150mm 的色谱柱 样品 准备 称量 10mg 吡啶 置于 100mL 容量瓶中 加入乙腈溶液至刻度 取上述溶液 1mL 至 10mL 容量瓶中 用乙腈溶液定容 水 HPLC 级 异丙醇 HPLC 级 7 4 3 验证过程 7 4 3 1 系统准备 项目 检查 LC 系统的所有连接 检查 LC 系统的管路 清洗系统管路 方法如下 在管路清洗之前 务必从系统中卸下色谱柱 并且在原色谱柱的位置安装一个 1 6C 螺丝 螺丝单元 首先使用异丙醇清洗管路 然后使用水清洗 每种溶剂以 2mL min 的流速清洗 10min 清洗完成后 向储液瓶中加入流动相 乙腈 水 4 1 v v 重新将色谱柱安装在系统中 7 4 3 2 验证过程中设备的参数 设备参数 泵单元流速 1mL min 最大压力 20 0MPa 柱温箱柱箱温度 40 时间程序7 00min 停止 UV 检测器波长 254nm 灵敏度 2 1V AU 计算机工作站停止时间 7min 进样次数 5 次 7 4 3 3 验证方法 项目 打开泵开关及检测器开关 通过自检 打开计算机工作站 设定参数值 在泵单元模块上设定流速为 1 00mL min 在柱箱单元模块上设定柱箱温度为 40 按泵单元模块上的开始键 柱温箱单元模块上的开始键 泵单元模块上的开始键运 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 13 页 共 15 页 行 柱箱温度开始上升 此时观察检测器池出口管是否有液体流出 并且检查所有管路连接处是否有漏液 设定检测器参数 监测基线 当基线平稳后 在进样器单元模块上设置 20ul 的进样体积 然后启动进样程序 进 入流动相 观察是否有色谱峰出现 进试验样品 进行分析 至少重复该操作 5 次 根据 5 次成功分析结果 计算保留时间 峰面积和峰高的变异系数 C V s 7 4 3 4 可接受标准 保留时间峰面积峰高 标准 0 5 1 0 1 0 7 4 3 5 计算公式 RSD C V SD X 100 1n i SD n 1i 2 X X X X1 X2 Xn 1 Xn n 式中 n 分析次数 X1 Xn 各个峰的保留时间 面积 峰高 平均值 X SD 标准偏差 C V 变异系数 验证结果见 附件 8 高效液相色谱仪性能确认记录 高效液相色谱仪性能确认记录 8 偏差处理 偏差处理情况 是否有偏差 有 记录见附表 9 无 备注 在相应的 内 9 方案修改记录 方案修改记录 是否有修改 有 记录见附表 10 无 备注 在相应的 内 10 风险的接受与评价 验证小组按验证方案中风险评定的内容进行验证 对存在的质量风险按提出的措施进 行预防和纠正 经验证小组确认 对判断为高级别的风险采取的控制措施经检查确认符合要 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 14 页 共 15 页 求 则其相应的风险可降至为可接受风险 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 15 页 共 15 页 序号风险 因素 风险可能影响效应现有控制措施 SPD RP N 风险 级别 是否符合标 准 1 流速准确度和精密 度不符合要求 1 保留时间漂移 2 峰面积不准确 导致检测结果不准确 定期校验流速 1 0ml min 23318 低 是 否 2 泵 梯度不准确检测结果不准确 保留时间漂移定期校验梯度准确度和线性 32318 低 是 否 3 柱温箱温度不准确检测结果不准确定期校验柱温箱温度 23212 低 是 否 4 进样器进样体积不准确检测结果不准确 1 定期检定进样器准确度 2 每月清洁一次仪器管路 33218 低 是 否 5 基线噪 音和基 线漂移 基线噪音大 基线 漂移 1 平衡时间延长 2 检测限降低导致小的杂质不能被 检出 检测结果不准确 3 错把基线波动当杂质 或杂质当 基线波动 1 每月清洗一次仪器 2 安装流动相在线过滤器 3 流动相离线脱气 3319 低 是 否 6 进样精 密度 进样精密度不够检测结果不准确定期进行进样精密度测试 32212 低 是 否 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 16 页 共 15 页 11 验证结果及评价 评价人 日期 年 月 日 12 验证周期 12 1 设备重大维修后 必须验证 12 2 设备性能达不到检验要求时 必须验证 12 3 正常情况每两年验证一次 13 最终批准 批准人 日期 年 月 日 14 附件 14 1 附件 1 人员培训签到表 14 2 附件 2 URS 符合性评估表 14 3 附件 3 GMP 符合性评估表 14 4 附件 4 职业健康 安全与环保符合性评估表 14 5 附件 5 仪器仪表检定或校准检查记录 14 6 附件 6 柱温箱验证表 14 7 附件 7 高效液相色谱仪运行确认记录 14 8 附件 8 高效液相色谱仪性能确认记录 14 9 附件 9 偏差调查处理报告 14 10 附件 10 方案修改记录 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 附件 1 人员培训签到表人员培训签到表 培训内容 培训对象 培训时间培训地点 授课人职位 参训人员签名 序号签名备注序号签名备注 121 222 323 424 525 626 727 828 929 1030 1131 1232 1333 1434 1535 1636 1737 1838 1939 2040 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 附表 2 URSURS符合性评估表符合性评估表 URS编号URS名称 结果 参考文件或图纸 URS01 设备工艺或性能要求 URS03 安装区域及位置要求 URS04 安装环境要求 URS06 设施 公用系统要求 URS07 外观及材质要求 URS08 技术要求 URS09 控制系统要求 URS10 仪表要求 URS11 清洁要求 URS12 润滑剂要求 URS13 文件要求 URS14 设备转运要求 URS15 验证 确认要求 URS16 服务与维修要求 评估结论 评估人 日期 年 月 日 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 19 页 共 15 页 附表 3 GMPGMP 符合性评估表符合性评估表 GMP要求设计符合性描述是否符合 设备的设计 选型是否符合生产要求描述 是 否 设备是否易于清洗 消毒描述 是 否 是否便于生产操作和维修 保养描述 是 否 设备的设计 选型 安装 是否符合生 产要求 易 于清洗 消 毒或灭菌 是否便于生 产操作和维 修 保养 是否能防止 差错和减少 污染 是否能防止差错和减少污染描述 是 否 评估结论 评估人 日期 年 月 日 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 20 页 共 15 页 附表 4 职业健康 安全与环保符合性评估职业健康 安全与环保符合性评估 URS编号URS名称 结果 参考文件或图纸 URS02 安全要求 URS05 电力要求 评估结论 评估人 日期 年 月 日 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 第 21 页 共 15 页 附表 5 仪器仪表检定或校准检查记录仪器仪表检定或校准检查记录 计量器具编号计量器具名称安装地点检定证书编号有效期至 检查人日期年 月 日 结果分析与评价 评价人 日期 年 月 日 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 附件 6 柱温箱验证表柱温箱验证表 温度 时间 min 253040 10 40 70 100 130 160 190 偏差 3 0 波动范围 1 0 结果分析与评价 评价人 日期 年 月 日 Agilent1260 型高效液相色谱仪验证报告 VR SB 3020 附件 7 高效液相色谱仪运行确认记录高效液相色谱仪运行确认记录 1 漂移 噪声的检查 设备编号型号 设备名称 测试项目标准规定实测结果判定 基线漂移 5 10 3AU