高等仪器分析课件-1-总论.pptx

高等仪器分析 陈海峰厦门大学药学院仪器分析测试中心 课程目标 熟悉公共仪器使用的各种规定及预约方法 熟悉并掌握仪器中心各种仪器的操作规范及使用规则 了解各种仪器的使用原理 了解各种仪器在医药相关领域中的应用 授课安排 厦门大学药学院仪器分析测试中心简介 厦门大学药学院分析测试中心成立于2012年 旨在为药学及相关学科高层次人才的培养和药物的研究与开发 提供优良的实验环境和技术条件 中心 侧重于大型仪器的资源共享和各学科项目的交叉研究 是学校公共仪器服务平台重要的组成部分 中心 占地700多平方米 拥有各类大型分析仪器40余台 总价值3000多万元 仪器分析中心现有专职技术人员6人 负责大型仪器的日常维护和使用 中心 实行 专管共用 开放共享 的管理模式 建立网上机时预约统计系统 FTP数据统计体系 实现了管理的自动化 网络化 在充分满足学校师生科研测试需求的同时 也面向国内外的各企业及事业单位开放 提供优质的测试服务 厦门大学药学院分析测试中心规章制度 厦门大学药学院分析测试中心规章制度 1 学院分析测试中心的仪器由专人负责管理和维护 需要使用本中心仪器的人员必须持有本中心授权的ID方能上机使用 初次使用实验仪器人员 必须经过管理人员的培训并获得上机ID 2 院内所有大型公用仪器的使用必须在预约系统内进行登记 若不进行预约 管理者有权拒绝开放该仪器 小型仪器使用原则上也应先进行预约登记 若遇使用时间冲突 有预约的具有优先使用权 详见预约管理制度 3 使用设备前 首先检查仪器周边卫生情况 若未检查实验室环境卫生不达标时 请先向管理人员汇报或自行整理 清扫 否则该室的卫生将由正在进行实验的人员负责 4 开机前应检查上次仪器使用记录及仪器零配件是否完好 有无短缺 发现问题立即与管理人员联系 管理人员应立即前往检查核实并酌情处理 必要时将追究前一位使用者的责任 开机30分钟后未发现任何故障 则视为仪器状况良好 如果在此之后仪器出现异常 则该异常被视为在该实验人员使用中出现 5 请在使用仪器前登记仪器使用履历表的日期 单位 实验内容 实验人 若实验有涉及剧毒化学物品须显著注明 并告知实验管理人员 实验完毕后登记仪器工作情况及工作时间 6 仪器在使用过程中出现异常 实验人员必须及时与管理人员联系 自己不得随意维修仪器 否则造成仪器损坏等一切不良后果将追究该实验人员的责任 厦门大学药学院分析测试中心规章制度 7 禁止在中心实验室内吸烟 进食 大声喧哗 使用明火和进行溶液配制 严禁在仪器设备上摆放任何物品 实验记录本除外 8 实验结束后必须整理好设备及配件 同时打扫干净实验室 室内如有别人在进行实验 则需要将自己实验所在的桌子 凳子 地面打扫干净 物品摆放整齐 注销已登录的ID 登记 公用仪器使用履历表 若被发现仪器使用者未按上述规定执行 中心将视情节轻重在一定的时间内取消其使用仪器的资格 9 未经分析测试中心批准 所有师生不得擅自将学院外部的样品带入分析测试中心的仪器室进行测试 一经发现 将视情节轻重作出相应的处罚 10 凡违反 分析测试中心规章制度 者 管理人员有权取消其使用该仪器的资格 直至注销其中心实验室ID 如造成不良后果 将追究当事人的责任 厦门大学药学院分析测试中心规章制度 1 药学院 中心实验室 网上预约系统服务对象为本院所有教师 研究生及各年级本科生 2 使用者须进入学院仪器预约系统下载 实验身份认证申请表 按要求详细填写后由所在课题组导师签字并送至 中心 方可开通预约认证 3 预约规范 实验者根据现有仪器预约情况合理安排个人实验 并做出正确的预约选择 预约原则上只能提前1 3天 若有变故 尽量提前一天以上取消预约 若必须当天取消 应与管理人员联系 大型仪器管理办法 仪器使用预约 4 预约取消提前3小时者 可以正常取消 提前1小时需收取本次预约费用的30 到点再取消者 收取本次预约费用的70 不预约者不能使用仪器 否则按违规处理 为了保证预约的公平性 让大多数用户都有测试的机会 规定每个PI实验室一周内机时最多18小时 若本周机时空闲 可酌情处理 5 预约后对于在约定时间内未到场 造成仪器空置时间达一小时者 仪器管理人员有权将机时转给其他需要使用仪器的用户 仪器中心并收取本次预约时长的全部费用 6 若遇特殊情况 如设备故障等影响测试 服从仪器管理员统一安排 大型仪器管理办法 仪器使用预约 1 使用仪器请准时到场 未能准时到场须提前与管理员沟通并重新确定时间 若未与管理员联系且超时15分钟未能到场的直接取消此次预约并根据预约时间全额记录机时费用 2 大型贵重仪器 如共聚焦显微镜 流式细胞仪 核磁共振质谱仪 高内含及超速离心机等 的开关机程序由负责人操作或经负责人同意后自行开机 请勿自行随意开机使用 违规操作取消其使用权利且造成损失由所在课题组赔偿 3 仪器皆以一般组织 细胞 蛋白或化合物样本为主 若进行其他具有感染性样品处理则须先与该仪器负责人讨论后再进行 同时实验过程禁止带手套触碰仪器及配套电脑 大型仪器管理办法 仪器使用规定 4 原则上 所有大型贵重仪器均需专人操作 除经负责人培训并确定能独立操作者方能自行进行仪器操作 若需负责人协助实验的 为使实验顺利进行 送样者应尽可能全程与操作者配合 以便实验过程中能够及时的调整参数和实验方法 原则上 实验仪器使用时间不超过规定的上班时间 若必须延时须与操作人员协商 5 仪器使用过程中出现故障 切勿自行处理 须报知该仪器管理员并由管理员登记并解决 若因未向管理员报告该仪器故障 下个使用者发现时 责任应归咎于未及时报告者 且维修费用须由其所在课题组承担 大型仪器管理办法 仪器使用规定 6 仪器使用完毕后务必做好仪器清洗及实验台面的清洁工作 及时准确的记录使用时间 使用情况 是否有故障 及使用人的详细信息 仪器使用完毕后报知负责人检查后方可离开 7 请自备DVD或者CD拷录片作存取数据用 或由管理员协助将数据上传学院FTP 禁止使用USB存取 8 请务必遵守该仪器使用规定 第一次违规提出口头警告 第二次违规学院予以通报批评 若经管理者发现三次违反规定者 将停止其测试中心所有设备使用权利 大型仪器管理办法 仪器使用规定 细胞间使用规范 新进实验室的人员进入细胞间进行实验室操作前 须先了解细胞培养基本要求和规范 并进行必要的培训 首次操作必须在老师或高年级同学指导下进行 进入细胞间后首先应保证细胞间大门的电磁阀重新处于关闭状态 为保持细胞间洁净度 进出细胞间必须更换细胞间专用鞋 或鞋套 及实验服 严禁直接进入细胞间 实验服和专用鞋 或鞋套 只能在细胞间内使用 严禁穿出细胞间以外的地方 另实验服和鞋均须定期进行灭菌清洗 防止污染 细胞间入口的风淋室是进入细胞间的唯一通道 非紧急情况下实验者能且只能从风淋室进入 风淋室的风淋时间最低为10秒钟 严禁随意更改风淋时间 风淋室边的门是出细胞间的唯一通道 非紧急情况下实验者能且只能从该通道出来 尤其提示 绝对禁止从这道门进入细胞间 违者必追究其责任 为保障自身安全 进入细胞间后需观察细胞间内的紫外灯已全部处于关闭状态 若需对细胞间进行紫外消毒 需要确认细胞间内所有实验人员都已退出 确保他人人生安全 为防止细胞间出现不必要的污染情况 出入细胞间每道门都必须确认门已经重新关闭 并且电磁阀也处于锁闭状态 细胞间使用规范 细胞间有设置两个物品传递窗口 一个为进物窗 另一个为出物窗 为保证细胞间的洁净 若只需传递物品尽量通过这两个窗口操作 减少细胞间被污染的几率 细胞间使用完毕后 需自觉进行清理 尤其是细胞间的公用空间 若造成污染后不做任何处理直接离开的 学院将严肃处理 为保证细胞间的洁净度 须实验人员定期对细胞间进行清洁工作 请各实验室管理员相互协商安排好细胞间的值日工作 细胞间使用规范 药学院仪器概况 应用 SNP分型检测 生物标志物的检测 基因表达水平的定量分析 基因表达谱定量分析等 原理 实时荧光定量PCR技术是结合了PCR和DNA探针杂交技术的特点 通过实时监控PCR体系中的荧光信号 对样本中初始模板进行定量分析 原理 小动物活体成像主要采用生物发光与荧光两种标记技术 让研究人员能够直接监控活体生物体内的细胞 蛋白等的活动和行为 主要应用 动植物体内基因表达的原味跟踪 观察肿瘤的生长及转移的发展过程 肿瘤学研究 免疫学和干细胞研究基因治疗研究 蛋白质相互作用 信号传导研究 病理机制及病毒研究 基因表达和蛋白质之间相互作用 转基因动物模型构建 药物甄选与预临床检验及药物配方与剂量管理等 IVISLumina 小动物活体成像系统 BiacoreT200表面离子共振仪 应用 蛋白与蛋白间相互作用 蛋白与小分子间相互作用 蛋白与核酸间相互作用等 原理 通过监测金属镀膜表面的生物反应过程中SPR角的动态变化 来获得物质相互作用的信息 应用 蛋白质 蛋白质相互作用 蛋白质折叠 去折叠研究 蛋白质与小分子相互作用 酶与抑制剂的相互作用及酶促反 动力学研究等 ITC200等温量热仪 原理 ITC是一种研究生物热力学与生物动力学的重要方法 它通过高灵敏度 高自动化的微量量热仪连续 准确地监测和记录每一个变化过程的量热曲线 原位 在线和无损伤地同时提供热力学和动力学信息 通过对热量的测定可以精确的得到结合常数 KA 反应的化学计量数 n 熵 S 和焓 H 在单次实验中即可提供一整套有关分子相互作用的完整信息 原理 用激光作为光源 采用共轭聚焦原理和装置 利用计算机对所观察的对象进行数字图像处理 应用 细胞特异结构的探测和分析 活体细胞 切片样品观察和分析 胞内离子动态变化的定量测定 原位DNA杂交研究 细胞与生物材料表面相互作用研究等 Exciter5激光共聚焦显微镜 ZEISSAXIOIMAGERA1正置荧光显微镜 原理 荧光显微镜是利用一定波长的光激发标本发射荧光 通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像的成像设备 应用 细胞及组织器官的切片标本的成像 细胞分化及细胞表面结构特征的观察细胞特定功能性结构的特异分析 荧光定量表达系统和弱荧光信号的标本分析 ZEISSAXIOOBSERVERA1倒置荧光显微镜 原理 荧光显微镜是利用一定波长的光激发标本发射荧光 通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像的成像设备 倒置荧光显微镜的特点是无需制片即可以对培养皿中的细胞进行直接观察 应用 活体细胞实时成像及荧光标记实时成像 荧光定量表达系统及荧光共振能量转移标本分析等 xCeLLigenceRTCADP多功能实时无标记细胞分析仪 技术原理 xCELLigenceRTCADP多功能实时无标记细胞分析仪基于ACEABiosciences全球独有的专利核心技术 实时无标记动态细胞分析技术 实时 动态 定量跟踪细胞的迁移及浸润的动力学检测 该技术采用特殊工艺 将微电子细胞传感器芯片整合到细胞浸润迁移板 CIMPlate 的微孔膜下层 从而便利并精确地检测细胞的迁移及浸润 主要应用 细胞浸润及迁移 受体介导的信号通路 细胞与细胞相互作用 细胞增殖及分化 细胞粘附及伸展 病毒介导的细胞病变 化合物及细胞因子介导的细胞毒作用等 EpicsAltra流式细胞仪 原理 流式细胞仪是集激光技术 电子物理技术 光电测量技术 电子计算机技术 细胞荧光化学技术 单克隆抗体技术为一体的一种新型高科技仪器 它能对处在快速 直线 流动状态中的单细胞或生物颗粒进行多参数 快速定量分析 同时对特定群体加以分选 应用 细胞凋亡检测 肿瘤细胞多药耐药检测 细胞免疫表形分析 细胞周期和DNA倍体分析等 AvantiJE高速离心机 原理 利用悬浮液 或乳浊液 密度不同的各组分在离心力场中迅速沉降分层的原理 实现液 固 或液 液 分离 应用 细胞学 蛋白质组学及基因组学等各个应用领域 包括纳米颗粒 病毒及亚细胞组份分离 蛋白梯度分析 脂蛋白分离 RNA梯度沉淀 质粒DNA提纯等 OptimaL 100XP超速离心机 GETyphoonFLA9500多功能生物分子成像仪 原理 TyphoonFLA9500是一种模块式的激光成像仪 备有与光学元件和激光光源的模块接口 它可对蛋白质 核酸及其他生物分子提供全能而灵活的成像选择 从而进行准确定量 该系统提供多种成像模式 包括荧光 同位素磷屏成像 化学发光和比色法染色凝胶数字化成像 应用 核酸电泳检测 2 D蛋白质电泳凝胶 杂交芯片信息获取 组织切片成像等等 AKTAPurifierUPC100液相色谱仪 原理 AKTAPuriferUPC100制备型液相色谱仪是基于现在液相色谱仪基础上加了接收装置 通过不同的柱层析原理 对液体中的多种混合进行快速的分离纯化 应用 药用多肽及蛋白的制备 蛋白纯度的分析 单克隆抗体的纯化等 小分子化