PCR难题详细解析

精品文档 1欢迎下载 PCR 难题详细解析 1 1 X X 基因基因 是是 DNADNA 分子上一个有遗传效应的片段 若要用分子上一个有遗传效应的片段 若要用 PCRPCR 技术特异性地拷贝技术特异性地拷贝 X X 基因基因 需在 需在 PCRPCR 反应中加入两种引物 两种引物及其与模板链的结合位置如图反应中加入两种引物 两种引物及其与模板链的结合位置如图 1 1 所示 经所示 经 4 4 轮循环后产物中有五种不轮循环后产物中有五种不 同的同的 DNADNA 分子 如图分子 如图 2 2 所示 其中第所示 其中第 种种 DNADNA 分子有几个分子有几个 图图 1 1 图图 2 2 A A 2 2 B B 4 4 C C 6 6D D 8 8 解析 选解析 选 D D PCRPCR 技术扩增时 由两种引物决定所扩增的片段的特定序列 上一次循环的产物为下一技术扩增时 由两种引物决定所扩增的片段的特定序列 上一次循环的产物为下一 次循环的模板 第一次循环形成次循环的模板 第一次循环形成 和和 第二次循环形成 第二次循环形成 四个四个 DNADNA 以此类推 以此类推 4 4 次循环后共形成次循环后共形成 1616 个个 DNADNA 其中 其中 各一个 各一个 各三个 各三个 共共 8 8 个 方法 可画出前个 方法 可画出前 2 2 次循环的产物的示意图 再找规次循环的产物的示意图 再找规 律 律 2 为研究基因 A 与四膜虫的耐药性是否有关 科研人员提取耐药个体的 DNA 用图 2 所示的引物组合 分别扩增 A 基因的 A1片段 A3片段 精品文档 2欢迎下载 据图分析 用引物 组合扩增后 得到的绝大部分 DNA 片段是下图中的 将大量 N 基因片段与扩增得到的 A1片段 A3片段置于 PCR 反应体系中进行扩增 得到的绝大多数 扩增产物是 回收的 PCR 扩增产物通过基因工程方法转入耐药四膜虫细胞中 并用加入 的培养液筛 选 获得 A 基因 的四膜虫 这种四膜虫在高浓度 DDT 处理下生长速率明显下降 表明 A 基因 是耐药基因 2 答案 d 解析 引物会成为子代 DNA 的一部分 A1 N A3 解析 引物 可同时和 A1片段 N 基因片段结合双向扩增 引物 III 可同时和 A3片 段 N 基因片段结合双向扩增 巴龙霉素 被敲除 3 3 2016 2016 天津高考天津高考 人血清白蛋白人血清白蛋白 HSA HSA 具有重要的医用价值 只能从人血浆中制备 如图是以基因工具有重要的医用价值 只能从人血浆中制备 如图是以基因工 程技术获取重组程技术获取重组 HSA rHSA HSA rHSA 的两条途径 的两条途径 1 1 为获取为获取 HSAHSA 基因 首先需采集人的血液 提取基因 首先需采集人的血液 提取 合成总合成总 cDNAcDNA 然后以 然后以 cDNAcDNA 为模板 使用为模板 使用 PCRPCR 技术扩增技术扩增 HSAHSA 基因 下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向 请用箭头在方框内标出另基因 下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向 请用箭头在方框内标出另 一条引物的位置及扩增方向 一条引物的位置及扩增方向 2 2 启动子通常具有物种及组织特异性 构建在水稻胚乳细胞内特异表达启动子通常具有物种及组织特异性 构建在水稻胚乳细胞内特异表达 rHSArHSA 的载体 需要选择的启的载体 需要选择的启 动子是动子是 填写字母 单选填写字母 单选 A A 人血细胞启动子 人血细胞启动子 B B 水稻胚乳细胞启动子 水稻胚乳细胞启动子 C C 大肠杆菌启动子 大肠杆菌启动子 D D 农杆菌启动子 农杆菌启动子 3 3 答案 答案 1 1 总总 RNA RNA 或或 mRNA mRNA 精品文档 3欢迎下载 2 B 2 B 解析 解析 1 1 要想合成总要想合成总 cDNAcDNA 需要采集人的血液获得总 需要采集人的血液获得总 RNARNA 由于 由于 DNADNA 的复制只能从脱氧核苷酸单链的的复制只能从脱氧核苷酸单链的 5 5 端向端向 3 3 端延伸 因而引物均应结合在端延伸 因而引物均应结合在 DNADNA 单链的单链的 3 3 端 而端 而 DNADNA 的两条链反向平行 由此可以确定引物的两条链反向平行 由此可以确定引物 在另一条脱氧核苷酸单链的位置和方向 在另一条脱氧核苷酸单链的位置和方向 2 2 若要从水稻胚乳细胞内获得目的产物 需要控制该目的基因若要从水稻胚乳细胞内获得目的产物 需要控制该目的基因 只在水稻胚乳细胞内表达 由题干中的信息只在水稻胚乳细胞内表达 由题干中的信息 启动子通常具有物种及组织特异性启动子通常具有物种及组织特异性 可知 此处需要选择水可知 此处需要选择水 稻胚乳细胞启动子 稻胚乳细胞启动子 4 4 请回答 请回答 PCRPCR 技术方面的有关问题 利用技术方面的有关问题 利用 PCRPCR 技术扩增目的基因 其原理与细胞内技术扩增目的基因 其原理与细胞内 DNADNA 复制类似复制类似 如如 下图所示下图所示 图中引物为单链 图中引物为单链 DNADNA 片段 它是子链合成延伸的基础 片段 它是子链合成延伸的基础 从理论上推测 第四轮循环产物中含有引物从理论上推测 第四轮循环产物中含有引物 A A 的的 DNADNA 片段所占的比例为片段所占的比例为 在第在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 DNADNA 片段 片段 答案 答案 三三 1 15 5 1 16 6 解析 解析 依据图解特点 第四轮循环产物中可以得到依据图解特点 第四轮循环产物中可以得到 1616 个个 DNADNA 分子 其中有分子 其中有 1515 个含引物个含引物 A A 的单链 的单链 以及一个不含引物以及一个不含引物 A A 的模板链 方法 可画出前的模板链 方法 可画出前 2 2 次循环的产物的示意图 再找规律 次循环的产物的示意图 再找规律 从图解原从图解原 DNADNA 与与 引物引物 A A B B 的比例关系分析 经三次复制后开始出现两条脱氧核苷酸链等长的的比例关系分析 经三次复制后开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 DNAD