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1 3 实验汇报实验汇报 实验名称 血红蛋白电泳 项目名称 两种碱性血红蛋白样品处理方法的电泳结果 实验时间 2018 年 9 月 17 日 实 验 室 龙泉驿区妇幼保健院检验科 实验人员 杨松 报告单位 成都温伦科技有限公司 2 3 1 实验目的 实验目的 1 掌握生理盐水处理血红蛋白样品的方法 2 掌握四氯化碳处理血红蛋白样品的方法 3 掌握电泳仪实验的操作 4 分析两种碱性血红蛋白样品处理方法电泳结果的不同 2 实验原理 实验原理 血红蛋白电泳就是利用在电场的作用下 由于待分离样品中各种分子带电 性质以及分子本身大小 形状等性质的差异 使带电分子产生不同的迁移速度 从而对样品进行分离 鉴定或提纯的技术 在临床检验中 主要用于分离各类蛋 白分子 3 实验方法 实验方法 琼脂糖电泳法 4 实验器械 实验器械 样品 10 个 EDTA 抗凝管抽取的病人全血样品 试剂 0 9 生理盐水 500ml 四氯化碳 500ml 界面液 250ml 美国 Helena Spife3000 血红蛋白电泳检测试剂盒 器材 移液枪 一次性移液枪头若干 EDTA 抗凝管 10 个 玻璃试管 10 个 设备 美国 Helena Spife3000 全自动电泳仪 五 实验步骤 五 实验步骤 1 取得医院检验科 EDTA 抗凝管抽取的病人全血样品 10 个 编号为 1 2 3 10 2 将 1 10 号十个个样品分别用移液枪取 200ul 到玻璃试管中 编号为 1 1 2 1 3 1 10 1 3 将 1 10 号 10 个样品进行生理盐水前处理 处理方法如下 用 0 9 生理盐水混匀 3500 rpm 离心 10 分钟 吸走弃去清液 以上步骤连续进行三次 完全吸走弃去上清液 20ul 制作后的样本 80ul 溶血素 混匀 取溶血后的样本 17ul 加入样品孔 4 将 1 1 到 10 1 号 10 个样品进行四氯化碳前处理 处理方法如下 用 0 9 生理盐水溶液 5000 L 与样品混合 3000rpm 离心 5 分钟 弃去上清液 只留下红细胞 加入 200ul 蒸馏水溶解红细胞 加入 300ul 的四氯化碳 混合均匀 3000rpm 离心 5 分钟 取上面萃取后的血红蛋白液 17ul 加入样品孔 5 记录下这 20 个样品的样品孔编号 将样品孔放入样品板 摆放进电泳 槽中 放上加样刀锋 添加界面液 放上琼脂板 掀开琼脂板保护膜 吸取多 3 3 余界面液 放上碳棒 关上电泳槽的盖子 启动设备开始电泳 6 大约 30 分钟后 电泳完成 取出碳棒放好 铲掉琼脂板上的盐桥 取 出琼脂板 放入染色槽中进行染色脱色干燥 7 大约 30 分钟后 染色脱色干燥完成 取出琼脂板 放入扫描仪中进行 扫描 用 PT 软件进行分析数据 记录数据 六 实验数据 六 实验数据 七 实验结果 七 实验结果 采用前处理方法二 四氯化碳 处理的血红蛋白 相对于前处理方法一 生理盐水 处理的血红蛋白 电泳结果 HbA2 偏高 HbA1 偏低 电泳条带更 加聚集 8 8 参考文献 参考文献 电泳技术以及其临床应用 ISBN 7 5381 4777 2 实验室质量管理 CNAS CL27 琼脂糖电泳的发展和研究 ISBN 978703058338 专业文档是经验性极强的领域 无法思考和涵盖全面 素材和资料部分来自 网络 供参考 可复制 编制 期待你的好评与关注 前处理方法一 生理盐水 前处理方法二 四氯化碳 样品编号 HbAHbA2HbAHbA2 197 47 2 53 97 28 2 72 297 03 2 97 96 82 3 18 396 71 3 29 95 96 4 04 497 19 2 81 95 84 4 16 596 07 3 93 95 56 4 44 696 97 3 03 95 98 4 02 797 23
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