氮酮、二甲基亚砜对中药软膏促透效果的比较研究

中国兽药杂志 2 0 0 5 3 9 1 2 1 2 1 5 刘广文 等 氮酮 二 甲基亚砜对 中药软膏 促透效果 的比较研究 刘广文 梁运霞 宋德花 任 平 庞淑华 黑龙江畜牧兽医职业学院 黑龙 江双城1 5 0 1 1 1 收稿日期 2 0 0 5 0 4 1 0 文献标识码 A 文章编号 1 0 0 2 1 2 8 0 2 0 0 5 1 2 0 0 1 2 0 4 中图分类号 R 2 8 5 摘要 由金银花 蒲公英 连翘 紫花地丁 丹参五味中药组成复方 以水提工艺获得提取物 制成复方中药软膏剂 以绿原酸的透皮量作为考核指标 用紫外分光光度法作为检测手段 考查 二甲基亚砜 氮酮两种透皮促进剂的促透效果 试验结果表 明 氮酮的促透效果显著优 于二 甲基 亚砜 其中以含有5 氮酮的中药软膏透皮效果最好 关键词 氮酮 二甲基亚砜 中药软膏 透皮促进剂 乳房炎是危害乳 牛养殖业最常见的疾病之一 人们逐渐认识 到抗生素不能从根本上解决乳 牛乳 房炎问题 1 j 而且不按规定用药和不遵守弃乳期的 规定 会造成食用牛乳中的抗生素残留 j 危害消 费者的身体健康 中药软膏经透皮方式给药开辟 了治疗乳房炎的新途径 本实验 的目的是通过 比较 不同渗透促进剂对中药软膏透皮作用的影响 筛选 出适当的渗透促进剂 由于中药软膏中成分复杂 很难测定所有成分 的透皮量 研究复方制剂的透皮效果一般选择复方 制剂中某种有效成分的透皮量作为评价指标 本 试验 的中药复方 中蒲公英 金银花是主药 其有效 成分是绿原酸 本研究通过体外法测定中药软膏中 绿原酸的透皮量 验证不同含量的氮酮 二甲基亚 砜对中药软膏的促渗效果 1 材 料 1 1 药品与试剂 1 1 1 中药 将金银花 蒲公英 连翘 紫花地丁 和丹参等按一 定 比例 混合 采 用水提法 制得干浸 膏 中药材均购于哈尔滨市中药材批发市场 1 1 2 试剂 生理盐水 硫化钠 十六醇 单硬脂 酸甘油酯 液体石蜡 羊毛脂 司盘 一 8 0 丙二醇 吐 温 一 8 0 尼泊金乙酯 二甲基亚砜 氮酮等化学试 剂 均购于哈尔滨道里化学试剂经销有限公 司 绿 原酸对照品 批号 0 7 5 3 2 0 0 1 1 1 由中国药品生物 制品检定所提供 1 2 实验动物 日 本大耳白兔 4只 实验一级 体 重 1 5 0 0 2 0 0 0 g 试验前临床健康检查均正常 购 自哈尔滨兽医研究所小动物室 1 3 主要仪器岛津紫外分光光度计 u V 1 2 0 0 2 型 日 本岛津公司生产 T P 一 3 型智能透皮扩散仪 天 津市富兰斯电子科贸有限公司生产 电热恒温水浴 锅 冰箱 恒温磁力搅拌器 电子分析天平和药物天 平等 2 方法与结果 2 1 离体兔皮的制备将兔腹部毛剪短 均匀涂 抹2 0 的硫化钠溶液 1 5 m i n 后用棉球轻擦去毛 观察脱毛情况及充血程度 2 4 h后选取皮肤脱毛干 净 充血少 无损伤的家兔 用空气栓塞法致死 剥 离腹部皮肤 去净皮下脂肪 用生理盐水洗净 置生 理盐水中并放人冰箱冷藏保存 一周内使用 试验 前兔皮不得有任何损伤 基金项目 黑龙江省科学技术厅科技攻关项 目 2 0 0 2 0 1 0 1 0 5 3 作者简介 刘广文 1 9 6 8年 一 男 硕士 副教授 主要从事兽因临床学教学与研究工作 通讯作者 梁运霞 教授 维普资讯 2 0 0 5 3 9 1 2 1 2 1 5 刘广文 等 中国兽药杂志 2 2 中药软膏的制备软膏由油相 水相及相应 的复方中药制剂制成水包油型 O W 软膏 软膏 油相由十六醇 单硬脂酸甘油酯 液体石蜡 羊毛脂 和司盘 一8 0组成 软膏水相 由丙二醇 吐温 一8 0 尼泊金 乙酯 中药复方制剂及纯化水制成 制备方法 按 比例称取油相各物质置水浴上加 热融化 7 0 8 0 水浴保温 另取水相各物质及 中药复方干浸膏 混溶后水浴加热至 7 0 8 0 将上述水相缓缓加人油相溶液中 边加边 向一个方 向搅拌 3 0 0 r m i n搅拌乳化 5 m i n 冷凝即得 制 作含氮酮的中药软膏时 在软膏中分别加人 1 3 5 7 9 的氮酮 制作含二 甲基亚砜 的中 药软膏时 在软膏中分别加人 1 2 4 6 8 的二 甲基亚砜 2 3 透皮试验T P一 3型智能透皮扩散仪的接收 池为 1 7 m L 试验温度为 3 7 1 电磁搅拌速度 为3 0 0 r m i n 释放池一端用离体兔皮覆盖 使皮 肤角质层朝向管内 在管内加中药软膏 3 g 接收池 内加 1 7 m L 生理盐水 使兔皮与接收池液面接触 在 3 7 1 条件下 连续搅拌 分别于加样后0 5 1 2 3 4 5 6 h 从接收池取样 1 m L 用于绿原酸体 外透皮量测定 每次取样后补加生理盐水 1 m L 2 4 测定绿原酸体外透皮量 2 4 1 建立标准曲线回归方程精密称取绿原酸 对照品4 m g 置 1 0 0 m L棕色量瓶中 加 5 0 甲醇 溶液溶解并稀释至刻度 然后再对倍稀释 制成每 1 m L分别含 4 0 2 0 1 0 5 g 绿原酸的系列标准溶液 1 0 以下保存 采用紫外分光光度法 在 3 1 0 3 4 0 n m波长范围内扫描 其最大吸收波长为 3 2 7 n m 在 3 2 7 n m波长处测定各绿 原酸标准溶液 的吸 光度 以绿原酸标准溶液浓度 为横坐标 吸光度 值 为纵坐标 绘制标准曲线 经计算 得回归方 程 0 0 3 7 2 一0 0 3 3 r 0 9 9 9 5 n 4 由此可见 绿原酸含量在 4 0 5 g m L之间时 吸 光度与浓度呈 良好的线性关 系 2 4 2 含量测定测定前将样 品加人 比色杯内 在 3 2 7 n m波长处 测定吸光度值 依据标准曲线 方程计算出样品所含绿原酸的浓度 由于接收池 中连续取样并每次补加生理盐水 测得数值较真实 值小 因而应用校正公式计算累计渗透量 Q n 一1 Q V C n V o L一 11 C 式 中 c 为第 n个取样时 间点测得 的药物浓 度 m L C 为第 个取样时间点测得的药物浓 度 m L V为接受池体积 1 7 m L V o为取样 体积 1 m E 2 4 3 回收率和 重复性测定选择 5 氮酮试验 组及 4 二甲基亚砜试验组扩散 2 h时接收池 内的 透出液进行回收试验 其测定值即为回收试验中的 空白值 向这两组透出液内分别加人精密称定的绿 原酸对照品 并配成高 中 低 3种已知浓度 在 3 2 7 n n l 处测定接收池透 出液加人绿原酸后 的吸光度 每 个浓度分别测定3次 再根据工作曲线方程计算出 含量 按下式计算得到的回收率 9 9 0 表 1 回收率 1 0 0 表 1 回收率的测定结果 3 氮酮试验组 当绿原酸添加量为 2 0 m L 时 重复测定 5次 其 R S D为 0 1 0 2 4 4 中药软膏体外透皮试验测定结果采用紫 外分光光度法测得 6 h内接 收池 中绿原 酸的累计 透皮量见表 2 表 3 可见氮酮的促透效果显著优于 二甲基亚砜的促透效果 二者促进绿原酸渗透皮肤 的效果与其本身浓度的关系可从表中数据看出 其 中以 5 氮酮的促透效果最好 3 结论与讨论 药物透皮试验采用了体外法 主要因为体外法 操作简单 可以控制环境 而且测得的含量是透过 皮肤的总量 不足之处是不能真实反映体内生理环 境的影响 但体内法与体外法有很好的相关性 J 本复方中药软膏中蒲公英 金银花是主药 其主要 成分是绿原酸 所以选定绿原酸为透皮实验的评 价指标 且从回收率测定结果可看出 复方中其他 药物成份及辅料不影响绿原酸的测定 从实验结果可以看 出 氮酮 二 甲基亚砜对 中 药软膏均有促渗作用 氮酮试验组的促渗效果更为 明显 氮酮是 1 9 7 6年由 N e l s o n 研究开发公司开发 维普资讯 中国兽药杂志 2 0 0 5 3 9 1 2 1 2 1 5 刘广文 等 表2 氮酮试验组不同透皮时间绿原酸的累计透皮 的产品 由于其副作用小 应用最为广泛 是促渗剂 中的一个典型代表 氮酮对亲水性药物的促渗 作用大于对亲脂性药物的促渗作用 氮酮可以渗 入皮肤角质层 降低细胞间脂质排列的有序性 脱 去细胞间脂质形成孔道 增加角质层含水量 降低 角质层的相转变温度 氮酮产生最佳促渗作用的 浓度在 2 6 之间 因药而异 本试验中 5 氮 酮对中药软膏的促渗作用最强 氮酮浓度再升高 促渗效果反而降低 二甲基亚砜是使用最早的经 皮渗透促进剂之一 其促渗性质可能与其溶剂性有 关 二甲基亚砜能使皮肤角质细胞内蛋白质变性 破坏角质层细胞间脂质的有序排列 脱去角质层脂 质 脂蛋白 而增强药物的渗透作用 但高浓度 使用二甲基亚砜时 会使皮肤产生红斑 水泡及不 可逆性的皮肤损伤 目前美国已禁用 从 6 h绿 原酸的累计透皮量来看 二甲基亚砜对中药软膏也 有明显的促渗作用 但在 l 8 浓度范围内 其 最强的促渗效果仍要 比 5 氮酮组差一些 氮酮的促渗效果明显强于二甲基亚砜的另一 个原因可能是软膏基质的选择不同 制作软膏基质 时使用了丙二醇 并用羊毛脂代替了凡士林 丙二 醇与氮酮配伍对经皮渗透能产生协同作用 羊毛脂 代替凡士林可避免凡士林对氮酮促渗效果的削弱 作用 参考文献 1 O w e n s WE N i c k e rs o n S C B o d d i e R L e t a 1 P r e v a l e n c e o f m a s t i t i 8 i n d a ir y h e i f e r s a n d e ff e c t i v e n e s s o f ant i b i o t i c t h e r a p y J J D a iry S c i 2 0 0 1 8 4 4 8 1 4 8 1 7 2 胡松华 俞 斌 乳房炎治疗后牛奶中的抗生素残留 J 中国 兽医杂志 1 9 9 9 2 5 5 5 2 5 3 3 李新圃 郁 杰 罗金印 等 药物透皮吸收常用实验方法概述 J 中兽医医药杂志 2 0 0 1 6 4 0 4 2 4 凌 云 范国强 肖 樾 等 中药蒲公英的质量标准研究 J 中 草药 1 9 9 9 3 0 1 2 8 9 7 8 9 9 5 刘 强 周莉玲 李 锐 中药透皮吸收制剂的研究思路 J 中 药新药与临床药理 1 9 9 7 8 2 1 1 6 1 1 8 6 沈 琦 徐莲英 透皮吸收促进剂的研究进展 J 中成药 1 9 9 8 2 0 5 4 4 4 6 7 高 申 钟延强 现代药物新剂型新技术 M 北京 人民卫生出 版社 2 0 0 2 2 7 1 2 7 7 Co mp a r a t i v e t e s t s a b o u t t h e e f f e c t s o f a z o n e a n d d i me t h y l s u l f o x i d e o n p e n e t r a t i o n e n h a n c e me n t o f t h e t r a d i t i o n a l Ch i n e s e me d i c i n e p e r c u t a n e o u s o i n t me n t L I U Gu a n g we n L1 ANG Yu n x i a SONG De h u a REN Pi n g P ANG Sh u hu a H e il o n g fia n g V o c a t i o n a l C o l l e g e o fA n i m a l H u s b a n d r y a n d V e t e r i n a r y S c O n c e S h u a n g c h e n g H e i l o n g fia n g 1 5 0 1 1 1 C h i n a 维普资讯 2 0 0 5 3 9 1 2 1 2 1 5 刘广文 等 中国兽药杂志 Ab s t r a c t A c o mp o u n d t r a d i t i o n a l C h i n e s e h e r b me d i c i n e o i n t me n t i S d i s t i l l a t e d f r o m t h e mi x t u r e o f h o n e y s u c k l e d a n d e l i o n f o r s y t h i a C h i n e s e v i o l e t a n d s a l v i a mi h i o r r h i z a b y t h e c r a f t o f a q u a d i s t i l l a t i o n W i t h d e t e c t i n g t h e p e r c u t a n e o u s q u a n t i t y o f t h e c h l o r o g e n i c a c i d b y u l t r a v i o l e t s p e c t r o p h o t o me t r y t h e e f f e c t s o f d i me t h y l s u l f o x i d e a n d a z o n e o n p e n e t r a t i o n e n h a n c e me n t o f t h e t r a d i t i o n a l C h i n e s e h e r b me d i c i n e p e r c u t a n e o u s o i n t me n t w e r e i n v e s t i g a t e d T h e r e s u l t s s h o we d t h a t t h e e f f e c t o f a z o n e w a s b e t t e r t h a n t h a t o f d i me t h y l s u l f o x i d e P e r c u t a n e o u s e f f e c t o f t r a d i t i o n al C h i n e s e h e r b me d i c i n e o i n t me n t wi t h 5 a z o n e wa s t h e b e s t Ke y wo r d s a z o n e d i me t h y l s u l f o x i d e t r a d i t i o n a l C h i n e s e h e r b me d i c i n e p e r c u t a n e o u s e n h a mc e r 中国兽药典 二O O五年版定稿会在京举行 2 0 0 5年 1 1 月 2 8 3 0日 中国兽药典 二O O五年版定稿会在北京香山饭店举行 会议开幕式由中国兽医药品监察所副所长谷继承同志主持 农业部兽医局副局长李金祥 中国兽医 药品监察所所长 中国兽药典委员会执委会副主任委员王泰健 国家标准委员会原主任 中国兽药典委员 会执行委员会副主任委员李忠海 第三届中国兽药典委员会副主任委员 全国畜牧兽医总站站长于康震 中国兽药典委员会副主任委员陈杖榴 中国兽医药品监察所副所长高光 农业部兽医局药政处处长徐士 新 农业部市场与经济信息司质量标准处副处长董洪岩等领导同志出席了会议 王泰健所长在开幕式上代表兽药典执委会做了 二O O五年版 编制起草工作报告 就2 0 0 5年版 中国兽药典 编制的指导思想 收载原则 标准制修订原则 编制过程和主要技术特点等向大 会作了详细说明 并提出下一届兽药典委员会在编制新版兽药典时应重点考虑和解决的五个问题 李金祥副局长在开幕