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文档简介

讲解:陈宇,宫颈癌的筛查,讲解大纲,一、人体免疫系统二、细胞与HPV三、三阶梯筛查,一、人体的免疫系统,特异性免疫,感应阶段 抗原进入机体后,除少数可以直接作用于淋巴细胞外,大多数抗原都要经过吞噬细胞的摄取和处理,经过处理的抗原,可将其内部隐蔽的抗原决定簇暴露出来。然后,吞噬细胞将抗原呈递给T细胞,再由T细胞呈递给B细胞;有的抗原可以直接刺激B细胞。这种抗原呈递,多数是通过细胞表面的直接相互接触来完成的。反应阶段 B细胞接受抗原刺激后,开始进行一系列的增殖分化,形成效应B细胞。在这个过程中,有一小部分B细胞成为记忆细胞,该细胞可以在体内抗原消失数月乃至数十年以后,仍保持对抗原的记忆。当同一种抗原再次进入机体时,记忆细胞就会迅速增殖、分化,形成大量的效应B细胞,继而产生更强的特异性免疫反应,及时将抗原清除。效应阶段 在这一阶段,抗原成为被作用的对象,效应B细胞产生的抗体可以与相应的抗原特异性结合,发挥免疫效应。例如,抗体与入侵的病菌结合,可以抑制病菌的繁殖或是对宿主细胞的黏附,从而防止感染和疾病的发生;抗体与病毒结合后,可以使病毒失去侵染和破坏宿主细胞的能力。在多数情况下,抗原抗体结合后会发生进一步的变化,如形成沉淀或细胞集团,进而被吞噬细胞吞噬消化,等等。,我们要知道的,1.疫苗:接种疫苗注入的是抗原,为了使其产 生抗体。分为主动免疫和被动免疫, 主动:注射抗原(只有抗原性,没 有致病性)被动:注射抗体,例如 狂犬疫苗(速度快,快速清除体内 抗原)。接种疫苗注入的是抗原, 为了使其产生抗体2.免疫战役之后存在抗体及记忆细胞。,二、细胞与HPV,转录 PCR扩增技术 DNA (双螺旋) 翻译 合成蛋白质,转录和翻译过程,转录 翻译(合成蛋白质),HPV的结构,HPV(human papillomavirus, HPV),人乳头状瘤病毒,是乳头瘤病毒科的成员。成熟的病毒颗粒直径55nm,无包膜。72个壳粒组成20面体立体对称的蛋白质衣壳。衣壳蛋白至少包括2种蛋白质,主要衣壳蛋白L1和次要衣壳蛋白L2。,HPV的基因组及致癌性,高危型HPV病毒E6基因产物与p53结合并加速p53的降解,从而使p53的正常功能(使细胞静息于G1期、促进凋亡、DNA修复)消失。而低危型HPV的E6蛋白不能与p53结合,也不能影响p53的稳定性。高危型HPV病毒的E7基因产物可以与pRB结合,从而打断pRB与E2F-1的结合,使E2F-1游离出来。E2F-1是细胞周期进入S期必需的转录因子。低危型HPV的E7基因产物与pRB的亲和力低。,病毒的复制,我们要知道的,1.PCR扩增技术原理2.HPV的致癌性3.病毒如何复制,三、宫颈癌的三阶梯筛查,1.TCT和HPV检查2.阴道镜检查3.病理活检,宫颈癌三阶梯筛查,所谓三阶梯式诊断方法即液基薄层细胞学(TCT) +HPV、阴道镜检查和镜下定位活组织病理诊断。首先是液基波层细胞学检查,发现异常后根据情况实行阴道镜检查,最后是镜下定位活组织病理诊断,这就是筛查宫颈病变的程序,1.TCT和HPV检查,(1)巴氏涂片法:美国国家癌症研究所在贝塞斯达召开会议,会议议定了宫颈和细胞病理学诊断报告方法,其中包括涂片满意度的标准和诊断名称的定义。诊断标准分为5级:巴氏级:正常。巴氏级:炎症。巴氏级:可疑癌。巴氏级:高度可疑癌。巴氏级:癌。巴氏涂片法的优点在于便宜,便于普查,但缺点是用这种方法制备的标本,细胞堆积在一起,不利于显微镜下的观察,对临床结论容易存在误差。故由于误差率较大,对病情把握的不准确性,已经不适用于现代患者的检测要求。这种检测方法在近年来得到了一定的改善,用同样的采集标本的步骤和方法进行制片,然后送至检测中心,用计算机进行自动扫描,识别储存,分析比对,找出可疑细胞。这就是电脑辅助宫颈细胞学检测系统(简称CCT),检测准确率得到加强,被大多数城市所认可普及。(2)薄层液基细胞学检测技术(Thin-Cytologic TestTCT),1991年液基薄层细胞制片检查系统处理技术诞生,美国是最先使用于妇科细胞学检查的国家,在中国,从2001年才开始从事液基细胞学筛查宫颈癌的项目研究,在这之后,液基细胞学检查的研究得到飞速的发展,液基细胞学制片的技术更是得到了深层次的挖掘,使其更具有明确性的检测定位。在最开始的细胞学制片检测时,由于制片技术不够,涂片质量差等技术问题,致使假阴性率特别高、细胞丢失率高,故使宫颈癌的阳性检出率高达95%以上,很大程度的降低了检测的准确性,而TCT技术的出现,为脱落细胞学诊断作出了巨大贡献。但由于早期技术推广成本高,制片机以及细胞储存液非常昂贵,在国内,只有一些大型的医疗机构才会购买使用,在基层医院的推广则相对较难。后来在中国的技术演变中,发明了更加低成本的半自动离心机以及廉价的细胞储存液,致使该项技术被更广大的医疗机构所接受。而现在,细胞学检测技术以作为中国宫颈癌三阶梯式筛查的首选第一阶梯,是一项非常有价值的临床应用。,TCT检测单,TBS诊断:是一种描述性诊断,1988年由美国的50位病理学家在华盛顿马里兰州贝塞斯达城开会讨论宫颈/阴道细胞学诊断报告方式,并提出两个对癌前病变的术语,LSIL(低度鳞状上皮内病变)和HSIL(高度鳞状上皮内病变)。现在不少国家采用描述性诊断,把美国提出的描述性诊断简称TBS(The Bethesda system)。 TBS诊断内容包括4部分一、对涂片的满意程度分为满意,基本满意,不满意。二、良性细胞改变1、感染 滴虫感染,霉菌性感染,形态学似嗜血杆菌感染,形态学似放射菌感染,形态学似人乳头状瘤病毒感染,形态学似单纯疱疹病毒感染。2、反应性该变 炎症(包括典型修复细胞的出现)萎缩性改变及炎症,放疗后改变,放置宫内节育器的反应及其他。三、上皮细胞的异常改变1、鳞状上皮细胞没有明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)低度鳞状上皮内病变(LSIL)。(在TBS诊断中,该种诊断报告,实际上等同于病理活检报告中的CIN I )高度鳞状上皮内病变(HSIL)。(在TBS诊断中,该种诊断报告,实际上等同于病理活检报告中的CIN II、CIN III、原位癌、鳞癌 )。2、腺上皮细胞没有明确诊断意义的不典型腺体上皮细胞(AGCUS)宫颈腺癌;子宫内膜癌;子宫外的腺癌;来源不明的腺癌。四、雌激素水平的评估。雌激素水平与年龄相符,雌激素水平与年龄不符,雌激素水平难以估计。,HPV检查,一HPV抗原的检测 HPV感染人体表皮细胞后,在细胞内增殖合成衣壳蛋白而成为HPV抗原成分.免疫酶染色可检测感染组织细胞内的HPV抗原成分,以了解有无HPV感染。HPV抗原阳性对诊断HPV感染或尖锐湿疣具有重要意义。二HPV抗体的检测(6和16型难区分,主要是E6、E7抗体检测) 在HPV感染的早期,由于感染时间短,HPV还未诱导出抗HPV抗体的产生,故在血清中可能检测不到抗HPV抗体。随着HPV感染时间的延长,HPV诱导产生了抗HPV抗体,故可检测到血清中抗HPV抗体。这表明抗体的出现发生在尖锐湿疣病期的晚些时候,同时抗体阳性也反映曾感染过这种病毒。 三HPV-DNA检测 在获取病变部位的组织细胞或分泌物后,通过PCR技术,可以有效地将已感染的HPV病毒进行分型分析定性,目前该方法已经被大多数医疗机构所采用,更多数的用于皮肤科常见的性病尖锐湿疣的检测,被绝大多数的医师所采用。,HPV-DNA检测单,2.阴道镜检查,阴道镜检查是医生通过显微镜在患者的宫颈及阴道患处进行细微观察,可以观测其病灶部位的血管及病变细胞,可以判断其感染病变程度。可以在病变部位进行取标本制片,更加精确的进行病理分析,从而提高诊断的准确性,提高确诊率。目前阴道镜检测,医生所采用的显微镜大致可分为两种,电子显微镜和光学显微镜。,阴道镜检测在中国的临床,已被广大医师所认可,并且在妇科中,已经被评定为检测标准,目前临床医生已经认识到,通过肉眼取标本定位检测,已经无法满足现代精准医学的要求,并且准确率较低。而随着现代技术的发展,光学显微镜及电子显微镜检测技术应用于临床检查成为可能,并更有利于观测出癌变的过程和癌变的程度,阴道镜检查的地位已无法被替代。但阴道镜检查也存在着一定的局限性,在取活检的过程当中,由于患者会活动,以及用显微镜观测宫颈的巨大性,无法准确地第一时间找到病灶部位和错失病灶部位,故还是存在一定的问题。阴道镜检查主要为观测女性外阴,阴道,宫颈部位,通过显微镜放大10到40倍后进行观察,可以更加提前的检测出癌变部位,提高检测的准确性,如果通过阴道镜采用严格的三阶梯式诊断筛查,可以提高准确性的95%,让患者可以有充分的时间进行相应的治疗,因此,阴道镜检查已经成为了早期筛查,早期预防宫颈癌的最有效手段。,阴道镜检测单,3.病理活检,活体组织病理检查简称“活检”。采取活体组织进行形态学检查是作出疾病诊断的重要方法。在阴道镜指导下,选择可疑部位行多点活检,所取组织既要有上皮组织又要有简质组织。,活检报告单,宫颈癌筛查的时间性,宫颈癌筛查的起始时间一般是2530岁,经济比较不发达地区一般是3540岁,高危人群如家族有宫颈癌病史的高危人群应当适当提前筛查时间,一般65岁之

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