石斛不同种、不同药用部位中多糖含量测定

1 / 6石斛不同种、不同药用部位中多糖含量 测定作者：孙卓然，刘圆，李晓云，刘超【摘要】目的测定不同种石斛及金钗石斛、马鞭石斛、叠鞘石斛、鼓槌石斛的不同药用部位中多糖的含量。方法采用紫外-可见分光光度法。结果不同种石斛茎中多糖含量为：球花石斛 %，马鞭石斛 %，金钗石斛 %，报春石斛 %，肿节石斛 %，叠鞘石斛 %，鼓槌石斛 %，美花石斛 %，兜唇石斛 %；4 种石斛不同药用部位多糖的含量：金钗石斛根 %，茎 %，叶 %；马鞭石斛根%，茎 %，叶 %；叠鞘石斛根 %，茎 %，叶 %；鼓槌石斛根 %，茎 %，叶 %。结论该实验方法简便、快速、准确。各种石斛及其根茎叶中多糖含量均比较高，从资源的综合和可持续利用的角度考虑，建议可以全草入药；美花石斛、球花石斛、报春石斛、叠鞘石斛、鼓槌石斛、肿节石斛茎在进行药效研究的提前下，确认是否可以替代当前中国药典品种入药。 【关键词】 石斛 多糖 紫外-可见分光光度法Abstract：ObjectiveTo determine polysaccharide from several Herba Dendrobii and different medical parts of D. nobile Lindl, D. fimbriatum Hook, D. denneanum Kerr, and D. 2 / 6chrysotoxum method was content of polysaccharides in different Herba Dendrobii was as follows: D. thyrsiflorum. of %, Hook of %, D. nobile Lindl of % , D. crepidatum Lindl of %, D. pendulum Roxb of %, D. denneanum Kerr of %, D. chrysotoxum Lindl of %, Rolfe of %, Daphyllum (Roxb.)C. E. Fisch of %; the contents of polysaccharides from root, stem and leaf in D. nobile Lindl Lindl were % , % and %; In Hook were % , % , %; In D. denneanum Kerr were %, %, %; In D. chrysotoxum Lindl were %, %, %.ConclusionThis method is simple, sensitive and accurate. The content of polysaccharides is higher in leaves from different parts, and we should try to keep leaves when medicinal material is processed.Key words： Dendrobium; Polysaccharide; UV石斛属 Dendrobium 为兰科最大的属之一1, 全世界共有一千五百多种, 广泛分布于亚洲、欧洲及大洋洲等热带及亚热带地区。我国约有 76 种,主要分布于西南、华东及华南地区。石斛首先记载于神农本草经 ，并列为上品。 本草纲目言：“俗方最以补虚，主治伤中，除痹下气，补五脏虚劳羸瘦，强阴益精；厚肠胃，补内绝不足，逐皮肤邪热痒气，治男子腰脚软弱，健阳，补肾益力，壮3 / 6筋骨，暖水脏，轻身延年等”在我国传统医学中经历了2000 年以上的应用历史。 中国药典XX 年版收载金钗石斛 Dendrobium nobile Lindl、铁皮石斛 Dendrobium candidum Lindl、马鞭石斛 Dendrobium fimbriatum Hook。石斛具有滋阴清热、益胃生津和润肺止咳等功效, 常用于治疗热病伤津、口干烦渴、病后虚热等多种病症2 。现代药理研究证明石斛中多糖类成分是石斛具有免疫增强作用和抗肿瘤作用的活性成分 3，4 。石斛为我国常用贵重药材,野生资源匮乏，而种植石斛规模较小，不能满足临床和新药开发的需要；而且民间药用石斛品种较复杂且规格不统一，它们能否替代药典品种入药，是迫切需要解决的问题。因此，对 9 种石斛茎中多糖、4 种石斛的不同部位中多糖含量进行了测定， 以期能寻找到石斛新的药用资源和新的药用部位，为科学、合理和正确使用该类药材提供实验数据。 1 材料与仪器仪器 UV 一 752 分光光度计(上海第三分析仪器厂)；SHB-3 循环多用真空泵；hh-2 数显恒温水浴锅；hctp11b5托盘天平；正德牌远红外可控调温电炉；DHG-9240A 型电热恒温鼓风干燥箱。药材石斛药材收集于云南各地、四川夹江县歇马乡4 / 6及成都五块石药材市场，所有药材均经刘圆教授鉴定。见表 1。表 1 不同品种石斛采集地点及日期2 方法与结果多糖的提取与精制称取各石斛药材粉末 100 g，精密称定，分别至圆底烧瓶中，各加入石油醚,结果表明在 mg/ml 之间，葡萄糖浓度与吸光度值具有良好的线性关系。稳定性实验取葡萄糖标准液 ml，置 10 ml 容量瓶中，按标准曲线制备项下的方法，自“加入 5 %苯酚溶液 1 ml”起，依法每隔 h 测定吸光度值，连续 4 h，结果吸光度基本无变化，样品溶液的稳定性良好。精密度实验精密量取葡萄糖标准溶液 ml，置 10 ml容量瓶中，按标准曲线制备项下的方法，自“加入 5 %苯酚溶液 1 ml”起，依法重复测定吸光度，RSD 为 %。结果表明精密度良好。加样回收率实验分别取相应石斛粉末各 g，分别精密加人葡萄糖储备液适量，按样品制备和含量测定方法测定，平均回收率 ，RSD 为 ，符合测定要求。换算因子的实验称取 6O 干燥至恒重的相应石斛多糖各 10 mg，精密称定。分别配制成 mgml 溶液。各取 ml 按标准曲线的制备方法，测定吸收度，另取葡萄糖标准5 / 6液，同法操作，求出相应石斛中葡萄糖浓度，按下列公式计算换算因素 11 种石斛多糖换算因子。f=多糖重量(多糖液的葡萄糖浓度 多糖的稀释因素)不同种、不同药用部位多糖的含量测定精密称取 60恒重的上述石斛茎粉末各 g,精密称定，分别置圆底烧瓶中，加入石油醚 (6090) ml，脱脂 30 min，过滤，通风橱中挥去溶剂。滤渣以 80 乙醇 100 ml 回流提取 30 min，趁热过滤。滤渣用 80 热乙醇充分洗涤，再于通风橱中挥去溶剂。取残渣再用 100 ml 蒸馏水回流 2 h，提取3 次，趁热过滤，用热水洗涤药渣和烧瓶，合并滤液，冷却后在 500 ml 量瓶中蒸馏水定容。精取各石斛提取液 ml，按照标准曲线项下操作，测定吸收度，按下列公式计算样品中的多糖含量，重复 6 次，取平均值。结果见表 2，3。表 2 不同种石斛茎中多糖的含量表 3 4 种石斛不同部位的多糖含量 多糖含量()=CDfV/wC：样品溶液中葡萄糖浓度(g/ml)；D：样品溶液的稀释因素；f：换算因素；V：样品溶液体积(ml)；W：样品溶液的重量(g)3 讨论6 / 6在所测的样品中，球花石斛中多糖含量和药典中所收载石斛品种含量接近，美花石斛中多糖的含量高于金钗石斛和马鞭石斛，因此从免疫增强作用和抗肿瘤作用的有效成分石斛多糖的角度考虑，在进行药效研究的前提下，确认美花石斛、球花石斛、报春石斛、叠鞘石斛、鼓槌石斛、肿节石斛茎是否可以替代当前药典品种入药。石斛传统的入药部位是茎，但从本实验结果表明：根和叶的含量比较高，建议全草入药。由于药材采