血型和交叉配血

血型和交叉配血,南华大学医学检验教研室谢海涛,一、ABO血型系统,二、ABO血型鉴定,三、Rh血型系统,四、交叉配血,报告内容,ABO血型和RH血型是红细胞的2大血型抗原抗体系统，在输血和血液遗传学研究有重大的意义。,一、ABO血型系统,1900年 美国免疫学家Karl landsteiner 发现RBC膜上A、B血型抗原，血清中有抗A、抗B抗体，将血型分为A、B、AB和O型。,（一） ABO血型系统抗原 1. ABO血型系统的组成和遗传 是存在于RBC膜上的一种糖蛋白，有多肽和糖链组成。A和B基因是显性基因，O基因是隐性基因，由A,B基因调控。 2. ABO血型系统抗原的分布 A、B、H抗原存在于RBC膜上，也分布于WBC,PLT及其他组织细胞上。,血型物质：组织细胞合成并分泌的水溶性A,B,H血型抗原多为半抗原，主要存在于体液和分泌物中，以唾液中最为丰富。 分为分泌型和非分泌型。 血型物质具有和相应的抗体反应的性质可以协助鉴定ABO血型和预测胎儿的血型。,（二） ABO血型系统抗体 分为天然抗体和免疫性抗体。 天然抗体主要为IGM型抗体。 免疫性抗体主要为IGG型抗体。,（三）ABO血型系统亚型 A抗原主要亚型：A1和A2，中国以A1亚型为主。B亚型较少见，抗原性较弱。,二、ABO血型鉴定,输血安全是临床输血的首要问题，正确的血型鉴定是保证输血安全的前提条件。 检测原理：血型抗原与相应的抗体在介质中形成RBC和相应血型抗体结合的免疫复合物，出现肉眼可见的凝集现象。,正向定型：用已知的特异性血清检查红细胞的未知血型抗原。 反向定型：用已知的标准红细胞检查标本中未知血型抗体。方法：盐水凝集法：检测IGM型抗体。2. 凝胶微柱法,方法学评价：1.盐水凝集法 分为玻片法和试管法。简单易行。2.凝胶微柱法 重复性好，特异性灵敏性高，全自动分析仪可以减少人为误差。缺点：成本高，需要特殊设备。,质量保证： 1.标准血清 ： 在有效期内使用，效价高，凝集力强，严防污染。常用的有： A 、人血清ABO血型抗体：特异性高，凝集效价：抗A不低于1128，抗B不低于164，亲和力在15秒出现凝集，3分钟明显凝集，稳定性高，灭活补体。 B、人ABO单克隆抗体：特异性，亲和力，凝集效价，稳定性高。,2. 被检红细胞： A 、标本新鲜，严防污染。 B 、特殊病人标本，加做对照及正反定型，以及用洗涤红细胞做血型鉴定。3. 实验器材 ： 清洁干糙，应正反定型，时间温度离心时间均应该严格控制。 观察结果仔细，注意出现弱凝集现象，必要时在显微镜下观察结果。4. 综合分析实验结果。核实无误时方可以发出检查结果。,临床意义： 1.输血 2. 器官移植 3. 新生儿溶血病 4. 其他,三、Rh血型系统,1940年，Karl Landsteiner and Alexander Wiener 发现了Rh血型系统，是最复杂的红细胞血型系统之一。具有遗传多态性，导致血清学表现复杂，表型频率极不平衡。有3种命名方式。,（一） Rh血型系统的命名1 . Fisher-Race 命名法（CDE命名法）A、遗传基因位于1号染色体短臂上的连锁基因，每条有三个基因位点，依次排为CDE。 B、各基因位点由一对等位基因组成。C CDE以复合体的形式遗传 D 可有8种基因组合和36种遗传型。,2. ISBT命名法。3. Rh血型系统表型及基因型。根据红细胞上有无D抗原为Rh阳性和 Rh阴性。,（二） Rh血型系统抗原及抗体 1. Rh血型系统抗原 仅次于ABO血型系统的A、B抗原。与人类密切的是D、E、C、c、e。 2. Rh血型系统抗体 天然抗体极少，由输血或妊娠刺激产生的IGG型免疫性抗体。以抗D最为常见。,（三）Rh血型鉴定 常用方法有酶介质法，低离子强度溶液试验，抗人球蛋白试验，凝集胺试验及人源盐水介质抗D试验。 检测原理 1.酶介质法 ：用木瓜酶或菠萝酶破坏红细胞表面的唾液酸，降低红细胞表面的负电荷，减少排斥力，促进Rh抗原与抗体的结合而产生红细胞凝集。,2.聚凝胺试验：聚凝胺是带高价阳离子的季胺盐，有利于红细胞凝集。由Rh抗体致敏的红细胞产生凝集是特异性的不可逆凝集，非抗体致敏的凝集为可逆性凝集。3. 抗球蛋白试验 （Coombs Test）：是检测红细胞上不完全抗体的经典方法。利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，通过连接致敏红细胞表面的特异性Rh抗体，出现特异性凝集。,4.人源盐水介质抗D试验：利用免疫球蛋白变性剂处理，使IGG变为IGM类抗体，能在盐水介质中发生凝集现象，用于快速鉴定。5.低离子强度溶液试验,方法学评价,质量保证 1.检测前：标本新鲜，严防污染，被检红细胞用生理盐水洗涤。 试剂器材要在有效期内的合格试剂，器材清洁干燥。,2.检测中：A 、严格遵守操作规程 。B 、严格控制抗原抗体比例、介质浓度、反应时间温度以及离心条件等关键因素。C、每次均需阴性阳性和试剂对照。D、观察结果不可用力震摇，结果可疑用显微镜观察确认。3. 检测后：复查实验全过程，填写报告并于4度保存标本一周以上。,临床意义1. Rh血型鉴定及交叉配血2.新生儿溶血病的诊断,四、交叉配血 交叉配血实验是在现象鉴定的基础上，进一步检测受血者和供血者血液中是否含有不相配合的成分。主侧：受血者血清与供血者红细胞；次侧：受血者红细胞与供血者血清。 检测原理 常用盐水配血试验。,方法学评价,质量保证1.检测前：A、建立标本签收制度。B、标本新鲜，无溶血，严防污染，有输血或妊娠史的应在48小时内留取。 C试剂器材要在有效期内的合格试剂。D、器材清洁干燥，严防溶血。,2.检测中：A、高度责任感。 B、器材标记清楚，吸管等均专用。 C、被检红细胞用生理盐水洗涤，浓度与标准血清的比例恰当。D、严格控制反应时间温度和离心条件。,E、配血试验阴性但有反复输血史和妊娠史的应用多种方法检测