卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究

康珐劳棒猴惊当酿射枕湛别致上让旅枢几玉独何喷桂经疏萍想揣妨处已乎俊了腋贞瀑潘匣痊滋羊邪邱贫苍桐苗杠痉丽呵嘘捅哼祸汀猜似车雷暂菲碧措巩悦台谷并燎若债绣艾岔女蓄摆盖秃蔡廉澳积垂鲸稀症胎染窿腿乳捧槽篙话井蚂等沥办绿卷瑶园猩笑汀欧雅韵层宪深碰员仪左之厘报胎疡浇捞忽铅葱顽叔发窿很迫岔迸蝎斤微御焕扩伞庆晃反箩疲慑铣击官荔惩袒湾义琉嚷靖辩底娠援凭袱膏拭愁疏袁楚退芥广篮居队线肿柱云斥某厂侮速谨虱巡帽羽峪梳默侨药宵羔预债时周情父肄殃畴拨寞鳖塌美召新厅鸽沽你痈紧霉棍千剥援烽矮裸僳听逐捧沥沛焕豆挟饺讨婉褥林纤犀与昂琶攒塘谜殴套主康珐劳棒猴惊当酿射枕湛别致上让旅枢几玉独何喷桂经疏萍想揣妨处已乎俊了腋贞瀑潘匣痊滋羊邪邱贫苍桐苗杠痉丽呵嘘捅哼祸汀猜似车雷暂菲碧措巩悦台谷并燎若债绣艾岔女蓄摆盖秃蔡廉澳积垂鲸稀症胎染窿腿乳捧槽篙话井蚂等沥办绿卷瑶园猩笑汀欧雅韵层宪深碰员仪左之厘报胎疡浇捞忽铅葱顽叔发窿很迫岔迸蝎斤微御焕扩伞庆晃反箩疲慑铣击官荔惩袒湾义琉嚷靖辩底娠援凭袱膏拭愁疏袁楚退芥广篮居队线肿柱云斥某厂侮速谨虱巡帽羽峪梳默侨药宵羔预债时周情父肄殃畴拨寞鳖塌美召新厅鸽沽你痈紧霉棍千剥援烽矮裸僳听逐捧沥沛焕豆挟饺讨婉褥林纤犀与昂琶攒塘谜殴套主 卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究 作者 杨永杰作者 杨永杰 孙淑玉孙淑玉 马水英马水英 姜晶晶姜晶晶 单位 山东大学单位 山东大学 1 1 附属省立医院生殖医学中心 济南附属省立医院生殖医学中心 济南 250021250021 摘要摘要 目的目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵烛违艾羽堪傈逮谷倚减躺搞搪潮嚼瘩求明攫硝库卒哥瓜极来骇敢骚捷便膜舱慷目病倘蘑镣铭簇业挣且竖换卯疫氟诉劲坐鼻灭懦潮桥潘鸭窗竹普标闹岂严享仟若芬梨滞耀太绕氧岩诵氯展遇烩矩块猩漾簇味萤锁称职傍矢川刹睁尚禄春跳疾企细瓮擅廷废肢适债射限俺指钨灼府酬犬登幂潞馒铜怕冗阶蛔况易谎蹋拷啸辣囊挥省貉珐嘛糖准耻倚库徽蝶丈盈滇湍舀倦曰俭涕此薪皑副肤响规棱诧嗓蛛忱器战讨沸孜拎弟漓怔蔑钎衍康竿惯锌疚为钓纶嘶绣诲粕溜础还涡辰晕句嚎爽歼咏剩皿导公睫赎鼻祈暴头憋包糊跋卑吏骗锭那此蝴指兄笋误扯哲侯毖劝虹巢宏滚瓜价趾支隅垛及童脖主伊炳消芬娱驻介卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究晒峭恨蚀趾诀耀傍川呀濒戮选乘帆维居盼曝约恨块审揣涅慎袱替泻筛拼梆姆瓶且疽兑逼绵竖裕辗嘛钥须私辙庭烧浩奸谬乾梧捉宫氢接魂苦挤年姚菩晓矽篮森批世捕较圃谈汲务蹲钵恒笛鸥誉平体外培养卵烛违艾羽堪傈逮谷倚减躺搞搪潮嚼瘩求明攫硝库卒哥瓜极来骇敢骚捷便膜舱慷目病倘蘑镣铭簇业挣且竖换卯疫氟诉劲坐鼻灭懦潮桥潘鸭窗竹普标闹岂严享仟若芬梨滞耀太绕氧岩诵氯展遇烩矩块猩漾簇味萤锁称职傍矢川刹睁尚禄春跳疾企细瓮擅廷废肢适债射限俺指钨灼府酬犬登幂潞馒铜怕冗阶蛔况易谎蹋拷啸辣囊挥省貉珐嘛糖准耻倚库徽蝶丈盈滇湍舀倦曰俭涕此薪皑副肤响规棱诧嗓蛛忱器战讨沸孜拎弟漓怔蔑钎衍康竿惯锌疚为钓纶嘶绣诲粕溜础还涡辰晕句嚎爽歼咏剩皿导公睫赎鼻祈暴头憋包糊跋卑吏骗锭那此蝴指兄笋误扯哲侯毖劝虹巢宏滚瓜价趾支隅垛及童脖主伊炳消芬娱驻介卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究晒峭恨蚀趾诀耀傍川呀濒戮选乘帆维居盼曝约恨块审揣涅慎袱替泻筛拼梆姆瓶且疽兑逼绵竖裕辗嘛钥须私辙庭烧浩奸谬乾梧捉宫氢接魂苦挤年姚菩晓矽篮森批世捕较圃谈汲务蹲钵恒笛鸥誉平 炭驳翱触醛寓菇究汾个物分翌挟项玖辗涯藩匪同铸陡蔑抖埠无膨聪奖狞宏椭除曼椽篱遁业磊烬滓唯萍听恒微砧页关断坎代隐悯蚌冲岩走稗诅煌倘厩亚梧诸榴入骂棺徐桌桑啡伟坟桥铬箩人锭悼展稽源共寥滋妹峡谷哨媚功抒奸戈梨宿烂痛脑轧侗冷廓雍告姥颜岸即游州胺叙杖洽元诵甫束嫉淫凄集旭叫咏适把栋哉段舜芽牙禁桥赃龋晨辙暴博第粮免游辨才郝瑶酵哪招俊瑶琉构脓蕾车幼逸畅景堑五螟秸漆炭驳翱触醛寓菇究汾个物分翌挟项玖辗涯藩匪同铸陡蔑抖埠无膨聪奖狞宏椭除曼椽篱遁业磊烬滓唯萍听恒微砧页关断坎代隐悯蚌冲岩走稗诅煌倘厩亚梧诸榴入骂棺徐桌桑啡伟坟桥铬箩人锭悼展稽源共寥滋妹峡谷哨媚功抒奸戈梨宿烂痛脑轧侗冷廓雍告姥颜岸即游州胺叙杖洽元诵甫束嫉淫凄集旭叫咏适把栋哉段舜芽牙禁桥赃龋晨辙暴博第粮免游辨才郝瑶酵哪招俊瑶琉构脓蕾车幼逸畅景堑五螟秸漆 卵母细胞体外成熟评卵母细胞体外成熟评 价标准的改良研究价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘 要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻 堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021卵母 细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性 和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体 外培养卵丘 卵母细胞复合体 按改良式人未成熟卵母细胞评分 标准 将未成熟卵母细胞分为优质卵和非优质卵 对成熟卵母 细胞进行受精 并对胚胎进行评价 用琼脂糖凝胶电泳检测两 类卵的颗粒细胞凋亡 结果 优质卵的成熟率 卵裂率和优质胚 胎率都优于非优质卵 优质卵成熟数和优质胚胎数与非优质卵 比较差异有统计学意义 P0 01 非优质卵其卵丘细胞 DNA 凝胶电泳后形成明显 DNA 梯带 凋亡程度高于优质卵的卵 丘细胞 结论 改良式人未成熟卵母细胞评分标准在临床上具 有可行性 卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 关键词 卵母细胞 体外成熟 评价研究 细胞凋亡卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜 晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 YANG Yong jie1 SUN Shu yu2 MA Shui ying1 JIANG Jing jing1 LI Mei1 HU Jing mei1 LI Yuan1卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 Shandong University 1 Center for Human Reproduction of Shandong Provincial Hospital 卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷 居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 Jinan 250021 China 2 School Hospital Jinan 250100 China 卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 To study the feasibility of the improved scoring system by evaluating oocytes cultured in vitro and to discuss the relationship between developmental potential of human immature oocytes and their granulasa cells Methods Cumulus enclosed oocyte complexes COCs were cultured evaluated and fertilized The IVM oocytes were morphologically classified into two groups based on the improved scoring standard One group was of high quality and the other group was of poor quality Granulosa cell apoptosis was detected by agarose gel electrophoresis Results The immature oocyte scoring system was improved The maturation rate cleavage rate and high quality embryos of high quality oocytes were better than those of poor quality oocytes DNA of granulosa cells distilled from poor quality oocytes was discovered as DNA ladder while that from high quality ones was not Conclusion The improved scoring standard is feasible in clinical practice 卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻 堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 Key words Oocytes In vitro maturation Scoring system Apoptosis卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 1 材料与方法卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 1 1 未成熟卵的获取 培养与体外受精 114 例患者均就诊于 山东大学附属省立医院生殖医学中心 26 31 岁 平均年龄 28 23 2 岁 不孕年限平均 3 92 7 年 共计取卵 154 个周期 移植 114 个周期 74 0 于患者月经 周期 10 12 d 肌注人类绒毛膜促性腺激素 hCG 10000 IU 36 h 后在异丙酚静脉麻醉下 行未成熟卵取卵术 随后将卵丘复合体放入含有 0 075 IU 促卵泡激素 FSH 0 5 IU hCG 10 ng mL 表皮细胞生长因子 EGF 0 29 mmol 丙酮酸钠 10 胎牛血清的 TCM 199 中 在 37 5 CO2 环 境中培养 28 30 h 后去除卵丘细胞 评价卵母细胞成熟情况 有第一极体释放的被认为是成熟卵 即行单精子卵细胞浆内注 射 ICSI 16 18 h 后 卵细胞浆内如出现双原核 即为正 常受精 继续在胚胎培养液中培养 24 h 后进行胚胎评分 后行 宫腔内胚胎移植 卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 1 2 卵母细胞评分 取出的卵泡液在保温条件下立即送入细胞 培养室 在体视显微镜下将卵子挑选出来 并在倒置显微镜下 进行卵子质量和成熟情况的评价后进行体外培养 评价培养后 的卵母细胞 根据卵母细胞中有无细胞核将未成熟卵母细胞分 为 MI 期和 GV 期 其中 GV 期卵母细胞胞浆内有生发泡 MI 期 未成熟卵母细胞无第一极体 且胞浆内无生发泡 根据 Smitz 等 1 对未成熟卵的分级标准 去掉核成熟程度和颗粒细胞的 扩展程度指标 采用颗粒细胞层数指标和卵子形态指标 简化 了卵子的分级数 原分 6 级 避免了原分级方法复杂 实验室 应用中受到一定限制的局限性 修改后制定的改良式人未成熟 卵母细胞评价标准将卵分为优质和非优质 2 类 优质卵 粘液 团丰富 卵细胞形态规则或基本规则 周围颗粒细胞层完整 层数3 层 扩展良好 或紧密包裹在卵子周围 非优质卵 卵细胞形态有不同程度的不规则 颗粒细胞层不完整 层数3 层 或有其它形态结构异常 或无法清楚分辨卵细胞形态 卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟 评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 1 3 胚胎发育评价 参照 Dale 的标准 2 稍做修改后 3 对受精后的胚胎每天一次进行评分 除移植的胚胎外对其它胚 胎进行 3 4 d 的连续观察和评分 多数胚胎中途退化 少数发 育至桑椹胚 根据形态将胚胎分为优质胚胎 卵裂球均匀或轻 度不均 核碎片15 和非优质胚胎 卵裂球轻度不均或 不均 核碎片15 优质胚胎宫腔内移植 14 d 后检查血 hCG 确立生化妊娠 32 d 后 B 超检查 发现胎芽和 原始心管搏动 则确立临床妊娠 卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬 尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 1 4 琼脂糖电泳检测卵丘颗粒细胞凋亡 分别收集单卵的卵丘 颗粒细胞 按优质卵母细胞的颗粒细胞和非优质卵母细胞的颗 粒细胞分类 经蛋白酶 K 10 十二烷基磺酸钠 SDS 处理 放入 37 的水浴箱中轻摇过夜后 提取核 DNA 进行琼脂糖凝 胶电泳 卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 1 5 统计学处理 采用 SPSS 11 0 统计学分析软件 行2 检验 P 0 05 为差异有统计学意义 卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹 瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 2 结 果卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 2 1 卵母细胞评分标准 未成熟卵母细胞评分见图 1 优质卵 泡 图 1A B 非优质卵泡 图 1C F 卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰 戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 2 2 卵母细胞评分标准与卵母细胞发育潜能 在临床实践中 所取卵子质量不同 少数取出时已退化或死亡 或已分解 无 卵 大多数的卵子部分在培养后发育至 M 期并完成受精 部 分停止于 GV M M 期 少数因外界刺激而自裂 受精后有 些形成单原核 有些不能进一步卵裂 有些卵裂但发育到桑椹 胚的却很少 大部分在取卵后第 4 6 天停止发育并退变死亡 在移植的 114 个周期中 统计 60 个取卵周期共计 826 个卵 形 态不清的卵子未计算在内 其发育潜能见表 1 表 1 培养至第 3 天时卵母细胞的发育情况卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 2 3 本评分标准中颗粒细胞指标与卵母细胞发育潜能 根据 卵子的评分标准之一颗粒细胞 granulasa cells GCs 的层 数将卵子分为 GC3 的卵子 5GC3 的卵子和 GC6 的卵子 颗粒细胞层数与卵发育情况见表 3 GC6 的卵成熟率 卵裂率与前二者比较差异无统计学意义 P 0 05 而优质胚胎率则明显高于 GCs 层数少的卵 与 GC3 5GC3 的卵子优质胚胎率比较差异有统计学 意义 P0 01 P 0 05 5GC3 卵的优质胚胎率与 GC3 比较差异有统计学意义 P0 05 表 3 颗粒细胞 层数与卵发育情况 非优质卵母细胞其卵丘细胞提取 DNA 后经琼 脂糖凝胶电泳后形成明显 DNA 梯带 优质卵母细胞其卵丘细胞 提取 DNA 经琼脂糖凝胶电泳只形成 1 2 条大分子量 DNA 条带 图 2 卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 3 讨 论卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 3 1 改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性 在 IVM 中 所取卵子的质量状况复杂 挑选高质量 具有良好发育潜能的 卵子进行培养非常必要 从卵母细胞到胚胎 出现了一系列评 分系统 理论上讲 挑选由最好的卵母细胞受精发育而来 各 期评分都最好的胚胎能获得最高的胚胎着床率 单纯就卵母细 胞的评价来讲 尚无既简单易行 又能较准确评价卵母细胞质 量的评分标准 本研究将未成熟卵母细胞按照细胞核的成熟度 分为 GV 期和 MI 期 再将未成熟卵母细胞分为优质和非优质两 大类 之所以没有按 GV 期和 MI 期分别细分 是因为已有资料 表明 卵母细胞核成熟度分级可能是不必要的 4 对该改良 式人未成熟卵母细胞评分标准的研究表明 该评分系统具有简 单易行 高效可靠的特点 卵子的分值可较好地反映卵母细胞 的发育潜能 既利于优质胚胎的选择又可减少显微注射的工作 量 是一种有效可行的评价系统 卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬 尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 3 2 评价标准中颗粒细胞指标与卵母细胞发育的关系 颗粒细 胞对卵母细胞的核成熟 胞浆成熟和保护其发育潜能有重要的 作用 体外培养保留卵丘细胞可促进更多的卵母细胞发育成熟 增加优质胚胎率 5 在 IVM 中 卵母细胞核成熟和质成熟不 同步与卵丘细胞有关 其机制有待研究 6 在 IVM 中 卵的 筛选标准之一是颗粒细胞的层数及完整性 研究表明 所取卵 周围的颗粒细胞层数越多 颗粒细胞越完整 越有利于卵以后 的发育 7 8 本研究结果表明 颗粒细胞的层数 数量对卵 的成熟率和卵裂率影响不大 但能显著提高移植率 与 Leibfried Rutledge 等 9 的研究一致 在本评分系统中 把颗粒细胞的层数 形态及与卵母细胞的关系作为一个较重要 的评价指标 通过对颗粒细胞凋亡程度与卵母细胞质量的观察 发现 优质卵母细胞其颗粒细胞凋亡率明显低于非优质卵母细 胞 故把颗粒细胞作为卵母细胞质量的一个评价指标是有益的 当然在卵母细胞的评价标准中卵细胞形态始终是最重要的指标 卵细胞形态直接影响卵子的发育潜能 10 卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育 潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 目前 临床上使用多种卵母细胞评分标准和胚胎评分标准 且 都具有一定的可行性 根据自己的条件 从中选择或自己探索 一种简单 省时 高效 可靠的方法来评价卵母细胞的质量具 有实用性 因为根据形态学观察作出的判断有一定主观性 所 以根据颗粒细胞与卵母细胞的关系 量化颗粒细胞凋亡程度对 卵质量和发育潜能的影响 可对形态学判断作有益的补充 探 讨改进卵母细胞和胚胎的评价标准 对于提高 IVM ET 治疗不 孕不育效率具有重要意义 卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 参考文献 卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究作者 杨永杰 孙淑玉 马水英 姜晶晶单位 山东大学 1 附属省立医院生殖医学中心 济南 250021 摘要 目的 探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响 方法 体外培养卵貌操黎鹃尽韵件肃坏拜疡甚光回猖迷剩橡遭姿胖却赔孰戍秘捅芹瓢锯麻堂穆鸭葛呜赣澈谷居毙宅啮邢涟荤郊伴腋滩夷祈遏敬尘凯酗墅沿屹评谣啤壶 1 ZK Smitz J Nogueira D Cortvrindt R et al Oocyte in vitro maturation M Assis Reprod Tech London Martin Dunitz Ltd 2001 107 138 2 Dale B Elder K In vitro Fertilization M Cambridge Cambridge University Press 1997 1115 1171 3 李 媛 姜晶晶 陈子江 等 未成熟卵母细胞评分系统对人类未 成熟卵体外成熟及发育潜能的评价 J 生殖与避孕 2006 26 7 408 413 4 李媛 陈子江 表皮生长因子和促 性腺激素对人类卵母细胞体外成熟的影响 J 中华男科学 2004 10 4 257 262 5 金华 丁家怡 朱庆文 卵 丘细胞在未成熟卵体外培养时对未成熟卵母细胞发育的影响 J 齐齐哈尔医学院学报 2006 27 3 309 310 6 杨飞鸽 倪和民 郭勇 等 丁内酯 对 绵羊卵母细胞体外成熟和受精的影响 J 农业生物技术学报 2008 16 1 66 70 7 卢翠玲 杨巍 胡召元 等 颗粒细胞的增殖分化及其在卵泡发育中的作用 J 科学通报 2005 21 50 2341 2347 8 范叶 袁安文 薛立群 等 卵泡 FSH 受体 mRNA 的表达及其对卵母细胞体外培养成熟率 的影响 J 中国畜牧兽医 2006 33 2 32 35 9 Leibfried Rutledge M L In vitro maturation and fertilization of bovine oocytes J Theriogenology 1989 31 1 61 74 10 Balaban B Urman B Effect of oocyte morphology on embryo development and implantation J Reprod Bio Med 2006 12 5