细菌性阴道病BV简介ppt课件.ppt

细菌性阴道病 BV 及丽珠BV检测产品 1 主要内容介绍 BV的基础知识BV检测的临床意义BV检测常见方法分析丽珠公司BV检测产品介绍 2 BV基础知识介绍 3 BV的研究历史 在相当长的时期里被称为 非特异性阴道炎 1955年Gardne和Dukes发现加德纳菌与BV有关 将BV称为加德纳菌性阴道炎 到1977年有多细菌混合感染导致BV的观点代替了单一微生物感染的观点 并发现BV与早产 炎症 肿瘤等妇产科疾病密切相关 1984年瑞典国际专题学术会议上正式该病定名为 细菌性阴道病 4 BV的基本定义 细菌性阴道病 BacterialVaginosis BV 是指一种阴道内微生态平衡失调 在细菌学上表现为生殖道正常菌群 产H2O2的乳酸杆菌 数量减少 代之以一组厌氧菌群 类杆菌属 加德纳菌属等 数量增加 引起的阴道分泌物增多 白带有鱼腥臭味等阴道生化性质发生明显变化而导致的临床症侯 5 正常菌群对人体的重要作用 乳酸杆菌是正常阴道的最主要的优势菌 占阴道菌群的90 以上 阴道上皮细胞中含有丰富的糖原 在阴道乳酸杆菌的作用下 分解为乳酸 维持阴道正常的酸性环境 抑制碱性环境中繁殖的病原体 也称为阴道的自净作用 乳酸杆菌黏附于黏膜 形成保护屏障 竞争黏附 阻止病原微生物定植 乳酸杆菌提高机体的免疫功能 刺激巨噬细胞和淋巴细胞活性 维持阴道局部的抗感染能力 6 BV的发病机理图示 乳酸杆菌 数量减少 H2O2 加德纳菌 类杆菌等数量 阴道内源性感染 阴道菌群失调 功能减退 产乳酸 致病因素 各类阴道炎症 7 BV的致病病原体 阴道加德纳菌 GardnerVaginalis 类杆菌属 Bacteridesspp 普氏杆菌属 Prevotillaspp 动弯杆菌属 MobilucusSPP 其它 人型支原体等 8 BV与常见阴道炎简介 9 BV与常见阴道炎的区别 10 BV检测的临床意义 11 BV的发病率 患病率随种族及人群而异一般人群 10 30 STD诊所患者 30 37 美国每年估计有300万有症状病例和300万无症状者国内报道的BV患病率 健康妇女 6 9 妇科门诊有异常阴道分泌物的患者 9 7 性乱人群 36 7 孕妇 10 25 12 BV检测的临床意义 一 妇科 是导致霉菌性阴道炎的主要原因 与滴虫感染密切相关 80 的滴虫患者同时伴有BV感染 是造成输卵管炎 盆腔炎 泌尿系统感染 术后感染的危险因素 与不孕症 宫外孕有关 与妇科肿瘤有关 BV患者发生CIN危险是正常妇女的2倍 CIN 宫颈上皮内瘤变 是宫颈癌前病变 13 BV检测的临床意义 二 产科 是造成早产 胎膜早破 低体重儿的主要原因 BV阳性的妊娠妇女中40 50 易在37周前早产或分娩低出生体重儿 比正常妇女高3 4倍 她们的孩子也可能受到直接感染 患新生儿肺炎 脑膜炎等 并带来各种后遗症 是导致绒毛膜炎 剖腹产术后子宫炎的危险因素 BV患者产后或剖宫产后发生产褥期子宫内膜炎的是正常人群的10倍 是导致某些妊娠不良和妊娠并发症的危险因素 14 BV检测的现实状况 该病的临床症状不明显 常被忽视治疗不彻底 容易反复发作现实患者认识不足 检测率不高医院目前检测方法不完善 15 BV检测常用方法分析 16 BV常见检测技术介绍 革兰氏染色法 少用 阴道加德纳菌检测 如PCR 培养法等 少用 脯氨酸氨基肽酶法 PIP 少用 Amsel四项法 少用 pH值 胺试验 多胺快速检测法 常用 常规镜检法 常用 唾液酸酶法 常用 多联检测法 常用 17 Amsel四项法 目前检测BV的 金标准 由以下四项指标构成 1 外观 阴道分泌物增多变稀如奶状2 pH值 阴道分泌物pH 4 53 胺试验 嗅试验 阴道分泌物中加入10 的氢氧化钾溶液 出现鱼腥味4 线索细胞 分泌物镜检有线索细胞 若镜下线索细胞占阴道复磷状上皮细胞的比例 20 则更具有诊断价值凡4项中3项同时阳性 即可诊断BV阳性 18 pH值测定 Normal pH3 0 4 4Unnormal pH 4 5 19 线索细胞检查 镜检 湿片法 在一载玻片上加一滴生理盐水 将阴道拭子分泌物与生理盐水混合成悬液 加上盖玻片后 在高倍 400倍 镜下检查 结果 线索细胞为阴道鳞状上皮细胞表面覆盖着许多球杆菌 主要是加特纳菌 有时合并有厌氧菌 使细胞呈斑点状 颗粒状外观 细胞边缘模糊不清呈锯齿状 意义 当线索细胞占全部上皮细胞的20 以上时一般认为BV阳性 正常的上皮细胞 线索细胞 20 线索细胞检查 镜检 21 Amsel四项的缺点 根据Amsel诊断方法 许多临床工作者感到要准确实施上述标准并不容易 该方法临床操作程序过于复杂 一些与感染无关的因素 如近期性交 阴道冲洗 月经 或存在大量宫颈粘液等因素 可改变pH值和产生异味 胺试验的气味辨别常因人而异 不同实验人员操作之间差异性较大 而对线索细胞的识别则要受到显微设备 样品采集及操作者的经验等等因素共同影响 镜检线索细胞需 20 难以界定 易漏检与误检 22 多胺快速检测实验 多胺快速试验原理 感染细菌性阴道病时 阴道加特纳菌 类杆菌 普氏杆菌 动弯杆菌等相关厌氧菌侵蚀阴道上皮细胞过程中产生的主要代谢物 氨基酸代谢生成胺 主要为丁二胺 戊二胺 三甲胺等挥发性胺 胺在阴道酸性环境下以盐的形式存在 加10 KOH置换出氨 以气体形式挥发 可以使溴甲酚紫试纸变紫色 23 胺实验的缺点 胺试验的特异性差 结果影响因素多 滴虫 宫颈糜烂等都可影响导致结果阳性 众多医院的临床对照实验评估证实BV胺实验试剂假阳性率分别为25 35 通过与BV确诊结果对照发现 BV胺实验试剂结果符合率分别60 70 符合率不高 假阳性的结果将导致患者接受抗厌氧菌治疗 杀灭阴道正常菌群 造成阴道生态环境的失调 损害身心健康 24 唾液酸酶检测法 唾液酸苷酶直接由病原体分泌 其活性与病原体的数量成正比 研究证实 唾液酸酶浓度与BV致病过程有关 唾液酸酶可能通过提高这些微生物吸附 侵入和破坏膜组织的能力而提高这些微生物的致病性 其活性与早产 胎膜早破 低体重儿等一系列不良妊娠后果有直接关系 25 BV多联试剂检测法 多项指标综合检测 在对BV诊断的同时 也可以评价女性阴道微生态的状态 理论意义上更具有优势 可能会成为BV诊断的主流方法 目前已逐渐获得很多省份的收费认可 全国范围已经逐渐开展 部分省份和地区已经相当成熟 BV多联检测目前包括三联检测 过氧化氢 白细胞酯酶 唾液酸苷酶 四联检测 pH值 过氧化氢 白细胞酯酶 唾液酸苷酶 甚至五联 过氧化氢 白细胞酯酶 唾液酸苷酶 脯氨酸氨肽酶 氨基葡萄糖苷酶 26 丽珠BV检测产品介绍 27 BVCombine TestKIT 粤食药监械 准 字2009第号 28 LivzonBV四联试剂组成 试剂盒组分 A唾液酸酶测试液1 2ml 瓶 1瓶B过氧化氢测试液1 2ml 瓶 1瓶C白细胞酯酶测试液1 2ml 瓶 1瓶D样本抽提液10ml 瓶 1瓶E反应板20人份F样本抽提管20支注 试剂2 8 避光保存 有效期1年 29 BVCombine TestKIT组成 30 BVCombine TestKITpH值比色卡 31 LivzonBV四联各项指标含义 1 pH值异常 pH值 4 5正常 pH值 4 52 过氧化氢浓度测定 阴性 乳酸菌减少 生态破坏 阳性 生态恢复或正常3 唾液酸酶活性测定 阳性 致病菌 条件致病菌增加 生态破坏 阴性 正常 生态恢复4 白细胞酯酶测定 阳性 粘膜受损 各种阴道感染 阴性 粘膜修复 炎症消失 32 产品的临床应用 一STD门诊女性病人二妇科 产科病人1 有BV临床症状2 无BV临床症状 有BV及其他妇科病感染史孕妇有早产史的妇女有妇科手术史的妇女定期妇科检查疑有盆腔炎的妇女 3 BV患者治疗后复查4 手术前常规BV检测 人流置换 取环通液其他宫腔操作等 33 LivzonBV四联操作程序 1 取出检测液及所需数量的反应板 平衡至室温 2 将新鲜样本在试纸上擦拭 点印 使试纸被分泌物浸润 待试纸变色后立即对照比色卡判读 3 在样品抽提管中滴加6到8滴样本抽提液约400ul 4 再将采样拭子浸入到滴有抽提液的样本抽提管中 反复搅动挤压5 6次 挤干液体后 弃去拭子 5 盖上抽提管滴头 往反应板上滴加样本抽提液 每孔滴加一滴 约35ul 6 阴性对照孔只加样本液 其它检测孔中分别滴加各对应项检测液一滴 轻拍 置于35 37 中温育15分钟 观察反应孔颜色变化 注 若样本干燥 可先在样本抽提管中滴入一到两滴样本抽提液 轻轻搅动润湿拭子 在继续进行检测 34 操作步骤 LivzonBV四联操作程序 35 LivzonBV四联操作程序 滴加样品 滴加反应液 36 LivzonBV四联操作程序 结果判断 37 LivzonBV四联结果判读 pH值的检测对照所附比色卡进行判读 正常pH 4 4 1 唾液酸酶项 检测孔颜色变蓝或绿色 BV阳性 不变色BV阴性 2 过氧化氢项 检测孔颜色变蓝色或绿色 H2O2 2umol l阴性 不变色 H2O2 2umol l阳性 3 白细胞酯酶 检测孔颜色变蓝色或绿色 白细胞酯酶阳性 38 LivzonBV四联结果判读实例 pH值的检测对照所附比色卡进行判读 正常pH 4 4 1 唾液酸酶项 检测孔不变色BV阴性 2 过氧化氢项 检测孔颜色变蓝 H2O2 2umol l阴性 3 白细胞酯酶 检测孔不变色 白细胞酯酶阴性 39 pH值的检测对照所附比色卡进行判读 正常pH 4 4 1 唾液酸酶项 检测孔颜色变蓝 BV弱阳性 2 过氧化氢项 检测孔颜色不变色 H2O2 2umol l阳性 3 白细胞酯酶 检测孔颜色变蓝 白细胞酯酶阳性 LivzonBV四联结果判读实例 40 LivzonBV四联操作注意事项 样本采集 用无菌棉拭子收集女性阴道壁 阴道下部1 3处 尽可能多的分泌物 样本运输 采集的样本应立即送样检测 请及时读取结果 超过规定时间5分钟以上读取结果视为无效 在采样前72小时内使用过阴道栓剂 膏剂 乳剂等阴道药物的妇女 经期所取的样本也会影响到检测结果 部分样本的检测物含量很高 大量水解底物 可产生沉淀 属于正常现象 41 LivzonBVCombine TestKIT优势 最关键指标 唾液酸酶敏感性 特异性最好进口唾液酸酶原料选择的底物稳定性好 检测结果不会受到本底干扰某些唾液酸酶试剂常常出现底物在包被的材质上或在贮存过程中发生分解变色 有一定程度的本底干扰 如国内某些试剂常常在试剂盒中提示 如有变色可正常使用等字样 实际上显色体系如果有可见的本底 很难保证不会对检测结果的观察造成一定程度的影响 出现可疑或难以判断等问题 42 LivzonBVCombine TestKIT优势 结果易于观察 精准