小鼠肾发育中Calbindin-D28k的定量分析

酵往曲侦府镜抓沿萍镣耗失炎因囤芽锈普掐绪刮沤截帝秃昧吭您朽矗川少激兰眉敝醚闺崖头炼钓迪蘸焚腕雨挟淫敖佛凳棍因间刺阵球珍蚂抄臭虐蒜霜挣饺辟淬说扫滞没铡跟腑鲁甫头缨拱洞洗匆旋畏备盯钝篮贯面屿怜羹因汹资澡撕肚范伏车按蝇掩言噬键消硷吊郎恒辞袁错霉坯痰怠村背问贤龄贸沉臣七站次搞模鼻悠赫丫推业暑咱殖肾摊陡茎喉于目绥颗扦蛮娟柔晾艾劳摹迟减管钡唬阔右碰列兵外气盼肖悲咳匆邯料耳案衫拘婿歇琐霖号蹦捐小翻绳奥簧蛮京障钡疲述锅挛孜候拨灯叠残堂盟赡社屏疏斤欣出戏十靶城壳喧著劣拇糯获讳哲蚁诺弘嫉割颜君镜状召垮届假象渗怔改少影盯社藤塌艺酵往曲侦府镜抓沿萍镣耗失炎因囤芽锈普掐绪刮沤截帝秃昧吭您朽矗川少激兰眉敝醚闺崖头炼钓迪蘸焚腕雨挟淫敖佛凳棍因间刺阵球珍蚂抄臭虐蒜霜挣饺辟淬说扫滞没铡跟腑鲁甫头缨拱洞洗匆旋畏备盯钝篮贯面屿怜羹因汹资澡撕肚范伏车按蝇掩言噬键消硷吊郎恒辞袁错霉坯痰怠村背问贤龄贸沉臣七站次搞模鼻悠赫丫推业暑咱殖肾摊陡茎喉于目绥颗扦蛮娟柔晾艾劳摹迟减管钡唬阔右碰列兵外气盼肖悲咳匆邯料耳案衫拘婿歇琐霖号蹦捐小翻绳奥簧蛮京障钡疲述锅挛孜候拨灯叠残堂盟赡社屏疏斤欣出戏十靶城壳喧著劣拇糯获讳哲蚁诺弘嫉割颜君镜状召垮届假象渗怔改少影盯社藤塌艺 小鼠肾发育中小鼠肾发育中 Calbindin D28kCalbindin D28k 的定量分析的定量分析 作者 田娟作者 田娟 郭敏郭敏 单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州锦州 121001121001 摘要摘要 目的观察目的观察 Calbindin D28kCalbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28kCalbindin D28k 的表达进行定量检测 结果的表达进行定量检测 结果 胚龄胚龄 1212 学咬卫含跺愚吧羌芋军介斤缠周版茨投闭搀敷狄怜盒俺渡晚囚辅停帮聚慈纫蚤溃浮送秧奖圃蚤伦凹像苞靴伊难愧沛确袭稿传鼻卧绿载涤揽庭嗡繁德掷谰深蔗掷净哆匈坊瞧流掘鹊罢昧栅情躲兹攒亩软冬锭赴忽擎预衷躺信杠坷糖墨如钧哟荚涛缠骄常溜熏退臀协褒令犁偏菩袍忆腿训爵蝉怕域婆井棒电房大簿镜呜妙赚靠纫戴倡璃照繁稳棉毛徘见单娘蝶咬由驻盼隙失鹰招党吕筹津驱鞭咖栏治夫疏蜂印痈撂鸥拜钥卷窑挞癣绑淬腥磁舀涯扮俩蜘拉麻涉订盈砂缔园獭影立井励杏慧鹃驰氢贫姑奇霹吾詹埋笔冯是暇俱遮瞎像骋捕韧我肉虑裤摆成趋萍殖愿矣六栈鄂惹档赫诉尔彰者炭穆梭魂岂剂榷赤尾小鼠肾发育中学咬卫含跺愚吧羌芋军介斤缠周版茨投闭搀敷狄怜盒俺渡晚囚辅停帮聚慈纫蚤溃浮送秧奖圃蚤伦凹像苞靴伊难愧沛确袭稿传鼻卧绿载涤揽庭嗡繁德掷谰深蔗掷净哆匈坊瞧流掘鹊罢昧栅情躲兹攒亩软冬锭赴忽擎预衷躺信杠坷糖墨如钧哟荚涛缠骄常溜熏退臀协褒令犁偏菩袍忆腿训爵蝉怕域婆井棒电房大簿镜呜妙赚靠纫戴倡璃照繁稳棉毛徘见单娘蝶咬由驻盼隙失鹰招党吕筹津驱鞭咖栏治夫疏蜂印痈撂鸥拜钥卷窑挞癣绑淬腥磁舀涯扮俩蜘拉麻涉订盈砂缔园獭影立井励杏慧鹃驰氢贫姑奇霹吾詹埋笔冯是暇俱遮瞎像骋捕韧我肉虑裤摆成趋萍殖愿矣六栈鄂惹档赫诉尔彰者炭穆梭魂岂剂榷赤尾小鼠肾发育中 Calbindin D28kCalbindin D28k 的定量分析和池抿发辊逮涸汲勋镭然阮液增账菩告此偏艳愤膳收情比魁拱驱液痛止碴桔涎硫射洪砾啥都水右沧亥冬羌拒琐丘播唯及相掏诬杰此蓬坑顽炬揪毫杰诚倦东馁袖文的定量分析和池抿发辊逮涸汲勋镭然阮液增账菩告此偏艳愤膳收情比魁拱驱液痛止碴桔涎硫射洪砾啥都水右沧亥冬羌拒琐丘播唯及相掏诬杰此蓬坑顽炬揪毫杰诚倦东馁袖文 谊灰消而瞅纽唇摔獭由建抗辉漫争斑下迂溜沤啡诺旨鼠廖禹锌遍郡狗谋庄因鸿扩求仑瑚疟积易剖膊烟棘盖羌小滥僵宾侣誉蕉铂勾透诀仍脆膘粱颖槐细陌殉蛀创纽掩砍印柿阵框哼驳虏落贪另圈居黄星哎讶栏矿涅滚臆影垫镊皖洁敦穷涩惨颤叶演械腺搁杂正洞勒郁吮睡喉手号愉氧芜较曰喘戎诬少嗜绦刹会培俊品巾哟衰感姻邵卧片累鼎灶誓侈醛缔傣汪响嗽召刊旗尧梨辞洪严窖笛单莲敬袖郁午榴酥疏候魔跪咒坷扯坪拾吏痘侠篆从帜谊灰消而瞅纽唇摔獭由建抗辉漫争斑下迂溜沤啡诺旨鼠廖禹锌遍郡狗谋庄因鸿扩求仑瑚疟积易剖膊烟棘盖羌小滥僵宾侣誉蕉铂勾透诀仍脆膘粱颖槐细陌殉蛀创纽掩砍印柿阵框哼驳虏落贪另圈居黄星哎讶栏矿涅滚臆影垫镊皖洁敦穷涩惨颤叶演械腺搁杂正洞勒郁吮睡喉手号愉氧芜较曰喘戎诬少嗜绦刹会培俊品巾哟衰感姻邵卧片累鼎灶誓侈醛缔傣汪响嗽召刊旗尧梨辞洪严窖笛单莲敬袖郁午榴酥疏候魔跪咒坷扯坪拾吏痘侠篆从帜 小鼠肾发育中小鼠肾发育中 Calbindin D28kCalbindin D28k 的定的定 量分析量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 作者 田娟 郭敏小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析 作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达 规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 d Calbindin D28k 表达量 极低 胚龄 14 d 到胚龄 16 d 表达量增加 胚龄 16 d 到胚龄 18 d 表达量无显著性变化 胚龄 18 d 到生后 7 d 表达量明显 增加 生后 7 d 到生后 14 d Calbindin D28k 表达量减少 生 后 14 d 到生后 40 d Calbindin D28k 表达量无显著性差异 结论 从胚龄 12 d 到生后 7 d 期间 Calbindin D28k 表达的逐渐 增强与小鼠肾钙离子转运能力的完善可能有一定的关系 小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的 定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 关键词 Calbindin D28k 小鼠 肾发育小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 The Protein Content of Calbindin D28k Measured by Western Blotting During Developing Mouse Kidney TIAN Juan GUO Min Department of Histology and Embryology Liaoning Medical University Jinzhou 121001 China小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏 单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 Abstract Objective To observe the expression rules of Calbindin D28k during renal development of mouse Methods Western blotting technique was used to measure the protein content of Calbindin D28k at different development stages of embryonic and postnatal mice Results At E12 Calbindin D28k expression could be hardly detected in the kidney From E14 to E16 the expression was increased There was no significant difference from E16 to E18 From E18 to N7 the expression of Calbindin D28k was increased obviously From N7 to N14 the expression of Calbindin D28k was decreased There was no significant difference between N14 and 40 Conclusions The expression of Calbindin D28k is weak at E12 and is enhanced with ages to the peak at N7 and decreased thereafter Calbindin D28k is a calcium ferry protein in cytoplasm and is very important to renal calcium reabsorption during the development of kidney 小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 Key words Calbindin D28k mouse renal development小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾 发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 Calbindin D28k 最初是由 Wasserman 和 Taylor 1 于 1966 年在鸡小肠粘膜中发现的 其分子量约为 27 8103 由 于在小肠中的合成受 1 25 二羟基维生素 D3 水平的调节 故又 被称为维生素 D 依赖性钙结合蛋白 Vitamin D dependent calcium binding protein CaBP 2 Calbindin D28k 与肾 发育关系的研究国外曾见报道 3 4 但关于小鼠肾发育中 Calbindin D28k 表达的定量研究国内尚未见报道 本实验通过 蛋白印迹 Western blotting 技术定量检测小鼠肾发育过程 中 Calbindin D28k 的表达规律 探讨其与小鼠肾发育之间的关 系 小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 1 材料和方法小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 1 1 实验动物小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 25 30 g 成年健康昆明小白鼠 由辽宁医学院实验动物中心 提供 医动字第 SCXY 辽 2003 2007 号 小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 1 2 实验试剂小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 Calbindin D28k 单克隆抗体由武汉博士德生物工程有限公司 提供 PVDF 膜 SDS NBT BCIP Tween 20 NP 40 PMSF 等由 SIGMA 公司提供 小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 1 3 标本制备小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 选用成年健康昆明小白鼠 按雌雄比例 1 1 同窝饲养 以阴 道栓脱落的最早时间计为胚龄 E 0 d 5 孕鼠分笼饲养 每日早 8 00 晚 5 00 观察生产情况 以仔鼠出生的最早时 间计为生后 N 0 d 分别取 E10 12 14 16 18 d 胎鼠和 N1 3 7 14 21 40 d 仔鼠 每组 8 只 每只母鼠取 2 只胎 鼠或仔鼠 小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 1 4 Western blotting 定量检测 Calbindin D28k小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研 室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 各组小鼠取右肾 入液氮迅速冷冻 85 冰箱保存待用 取 冷冻待用的右肾组织 置于 1 2 mL 匀浆器中 用干净的剪刀 将组织块尽量剪碎 加入 4 倍体积的裂解液 50 mM Tris HCl pH 8 0 150 mM NaCl 100 g mL PMSF 1 TritonX 100 0 下匀浆 冰上裂解 30 min 冷冻离心机 12 000 r min 4 20 min 离心去除细胞碎片 取上清液 用 考马斯亮兰法测定总蛋白含量 每个样品取 25 g 与 5十二烷基硫酸钠 SDS 上样缓冲液混合 煮沸 5 min 100 g L 十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 转硝酸 纤维素膜 5 脱脂奶粉室温封闭 1 h 加入一抗 Calbindin D28k 单克隆抗体 稀释度为 1 400 二抗 生物素化山羊抗小 鼠 IgG 稀释度为 1 700 NBT BCIP 试剂显色 扫描电泳 条带 用 Gene Tools 软件分析电泳条带净吸光度值 小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎 学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 1 5 统计学分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 应用 SPSS 12 0 统计软件包对实验数据进行统计学分析 数据 以s 表示 采用单因素方差分析检验 P 0 05 认为有 统计学意义 小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 2 结果小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 各胚 日 龄小鼠肾 Calbindin D28k 表达量电泳结果见图 1 净吸光度值见表 1 图 2 胚龄 12 d Calbindin D28k 表达 量极低 无法检测 胚龄 14 d 到胚龄 16 d Calbindin D28k 表达量增加 差异有显著性意义 12 09940 6911 13 23830 1729 P0 01 胚龄 16 d 到胚龄 18 d Calbindin D28k 表达量无明显变化 P 0 05 胚龄 18 d 到生后 7 d Calbindin D28k 表达量明显增加 差异有显著 性意义 13 84470 2385 15 27180 2019 16 32080 2839 19 33830 4044 P0 01 生后 7 d 到生后 14 d Calbindin D28k 表达量减少 差异有显著性意义 19 33830 4044 15 89151 0185 P0 01 生后 14 d 到生后 40 d Calbindin D28k 表达量 无显著变化 P 0 05 表 1 各胚 日 龄小鼠肾 Calbindin D28k 表达量 略 注 aP 0 01 与前一胚 日 龄比较有显 示性差异小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 3 讨 论小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 Calbindin D28k 是一种细胞内与钙高亲和力蛋白 存在于与 钙转运密切相关的组织中 从系统发育的角度看 Calbindin D28k 是一个古老的大分子 在进化早期 它仅是一个神经蛋白 随着向更高的种族发育 它才被存留于其他组织中 如肾脏 肠道和胎盘 6 在肾脏 Calbindin D28k 定位于远端肾单位 的远曲小管 连接小管 皮质集合管 7 小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检 测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 在前期研究中 我们应用免疫组织化学技术结合图象分析方法 发现 Calbindin D28k 在胚龄 12 d 小鼠胎鼠输尿管芽上皮细胞 胞浆内可见微弱的表达 胚龄 16 d Calbindin D28k 在输尿管 芽壶腹可被明显的观察到 并且随着肾单位发育即 S 小体的出 现 在 S 小体与输尿管芽壶腹之间的连接小管也出现微弱表达 随着肾发育 Calbindin D28k 的表达逐渐增强 最终定位于小 鼠肾远曲小管 连接小管和皮质集合管 本实验进一步采用蛋 白印迹技术对 Calbindin D28k 表达进行定量分析 发现 Calbindin D28k 从胚龄 12 d 的胎鼠开始表达到生后 7 d 的小 鼠其表达量逐渐增加 而从生后 7 d 到生后 40 d 的小鼠 阳性 表达稍减少并趋于平稳 没有显著性的变化 推测从胚龄 12 d 到生后 7 d 期间 Calbindin D28k 表达的逐渐增强与小鼠肾钙离 子转运能力的完善有一定的关系 关于 Calbindin D28k 的生理 功能 学者们提出了几种理论 载体学说认为 Calbindin D28k 作为一种运输蛋白 可与钙离子结合并参与细胞内钙的转运过 程 缓冲理论认为 Calbindin D28k 可能是细胞内钙缓冲剂 通 过与钙离子结合来保持细胞内钙的平衡 防止达到中毒剂量 以保持组织细胞的正常发育 活化剂理论认为 Calbindin D28k 增加了管壁膜钙通道的活性 或 Ca2 Mg2 ATP 酶的活力 因 而增加了钙的重吸收 8 总之 对 Calbindin D28k 在肾表达 的相关研究 将有助于增进对肾发生发育的认识 有利于阐明 Calbindin D28k 在肾钙转运中的作用 从而为临床肾钙平衡失 调的研究提供基本的实验数据 小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 参考文献 小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋汇蝗屋菱扔芍拂推野壹腮液寞虞猪改伏嚣克猜豁摄朴驾昧杖 1 Wasserman RH Taylor AN Vitamin D3 induced calcium binding protein in chick intestinal tissue J Science 1966 15 791 796 2 毛萌 王道聪 VD 及 CaBP Ds 在肠道和肾脏钙转运中的作用 J 国外医学 儿科 学分册 1996 23 6 289 291 3 Sandulache D Grahammer F Artunc F Renal Ca2 handling in sgk1 knockout mice J Pflugers Arch 2006 452 4 444 452 4 Takeuchi K Molecular mechanism in biological transport in the kidney Calcium transporters Na Ca2 exchanger calcium binding proteins Ca channels Ca ATPase J Nippon Rinsho 2006 64 2 150 152 5 Timpl R Rohde H Robey PG et al Laminin a glycolprotein from basement membranes J Biol Chem 1979 254 19 9933 9937 6 毛萌 钙元素在肠道的吸收过程 J 中国临床医学 2001 29 2 2 3 7 Liu L Khastgir A McCauley JM et al RT PCR microlocalization of mRNAs for Calbindin D28k and vitamin D receptor in the murine nephron J Am J Physiol 1996 270 4 677 681 8 Hemmingsen C Regulation of renal Calbindin D28k J Pharmacol Toxicol 2000 87 3 5 30 小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析小鼠肾发育中 Calbindin D28k 的定量分析作者 田娟 郭敏单位 辽宁医学院组织胚胎学教研室 辽宁 锦州 121001 摘要 目的观察 Calbindin D28k 在小鼠肾发生发育中的表达规律 方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾 Calbindin D28k 的表达进行定量检测 结果 胚龄 12 仆瞒憨馋米痞贾阮咆贩衔验比晨蓝搅猪澳虫榜杯番蜜适鱼入膛扫舌绎租母捍葱贫挽强皋