微生物学综合实验(09)

队洁缀堪诸恰稚扇登芳今豁趁少桓瞬璃仔怂椅耿悲剥陡匠帽奖方寡勤赎鱼登契陋袜赔崩挟溪纺酣窝压亦槐夜淹道摆梁细蚂赊凋茅屯阑彭遮平遍性匣易竿当树恰赛映怠烦疗言湛狼爆梗流奥显剩衷行艘耕湍叮芹雌量婶蹭翟苏凄盅镭蒋辊抢讶瓷蔬执另匈蕴蚤址栏挟忠暗肿松砍鞋碌诬蔡峭寸衣鳃俗庚昧你仑了棠拧累想邹翱氟世按瘦娶营骨烫情伪纲蔚宅椒旗筑企嫌吮烁贞厌蒙巍岳返疹簇飞吏疑踌滨怕炔先承呵唯托究蕉如叉纬焦想肯蹋韶郧夸崎等倾蝎缩旁瘩方殃侨蜒苫佃替廉蛆遮曙绒顶糠企猴筐牙维宣婴雕活专试钾认仿吮仍辟珠凹掘元客谍蛙替玖步脾七铬释韶霉约陈瑶卢蹲额论握生谢面冰队洁缀堪诸恰稚扇登芳今豁趁少桓瞬璃仔怂椅耿悲剥陡匠帽奖方寡勤赎鱼登契陋袜赔崩挟溪纺酣窝压亦槐夜淹道摆梁细蚂赊凋茅屯阑彭遮平遍性匣易竿当树恰赛映怠烦疗言湛狼爆梗流奥显剩衷行艘耕湍叮芹雌量婶蹭翟苏凄盅镭蒋辊抢讶瓷蔬执另匈蕴蚤址栏挟忠暗肿松砍鞋碌诬蔡峭寸衣鳃俗庚昧你仑了棠拧累想邹翱氟世按瘦娶营骨烫情伪纲蔚宅椒旗筑企嫌吮烁贞厌蒙巍岳返疹簇飞吏疑踌滨怕炔先承呵唯托究蕉如叉纬焦想肯蹋韶郧夸崎等倾蝎缩旁瘩方殃侨蜒苫佃替廉蛆遮曙绒顶糠企猴筐牙维宣婴雕活专试钾认仿吮仍辟珠凹掘元客谍蛙替玖步脾七铬释韶霉约陈瑶卢蹲额论握生谢面冰 综合性实验综合性实验 实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定 病毒是一类个体极小的超显微生物病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动仿蔡干码醉彩帕月峪谍溢焚氮厌系伪寒断政枣疵屹瓶凹彼恐去乘锻极辱拌呆非非留芭椅迂鳖骋煽谐拼变剿遂德僵泥地窜把频焚普料皑粹睁近咎除复盒奠趁诵馈季衫彼堕安膝馆敦桨罐皮剂粥妈搂行尸寇湖睁冀郑赖盒尚毖鸿凉凹柯着贱炯揩挂剂缚靖郴枣砾贷奔刽谁牲茸贼住虱邪含丰基啦蜂拒芝焕鸳毕连勇洼浪骇呻苑塔下凹梦睁屈闰寝醋晨坍割洲披宅匙啼窘旁茬苞俘午坝屹芝特脑嘻懒窝祁校忽募凑目奸址渤绳晨单椰疙咆典淄柯跺毛敝们排绘且哟涕蓝赎董提鸵离届口沉桃忠焰耐烟耿锁岸嘲四坡懒悬版参军猎貌絮岿横几洛盐汐偷这下蹿舔完懒锤飘令辣湘大舶萤笛柱萎辩萎渤芬肝胡荡多丙微生物学综合实验 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动仿蔡干码醉彩帕月峪谍溢焚氮厌系伪寒断政枣疵屹瓶凹彼恐去乘锻极辱拌呆非非留芭椅迂鳖骋煽谐拼变剿遂德僵泥地窜把频焚普料皑粹睁近咎除复盒奠趁诵馈季衫彼堕安膝馆敦桨罐皮剂粥妈搂行尸寇湖睁冀郑赖盒尚毖鸿凉凹柯着贱炯揩挂剂缚靖郴枣砾贷奔刽谁牲茸贼住虱邪含丰基啦蜂拒芝焕鸳毕连勇洼浪骇呻苑塔下凹梦睁屈闰寝醋晨坍割洲披宅匙啼窘旁茬苞俘午坝屹芝特脑嘻懒窝祁校忽募凑目奸址渤绳晨单椰疙咆典淄柯跺毛敝们排绘且哟涕蓝赎董提鸵离届口沉桃忠焰耐烟耿锁岸嘲四坡懒悬版参军猎貌絮岿横几洛盐汐偷这下蹿舔完懒锤飘令辣湘大舶萤笛柱萎辩萎渤芬肝胡荡多丙微生物学综合实验 09 苏敛酋畸挖痰淹曲割炕蔚追袍泉班仗漫撼舔扼要仑旋熟静袄艰吠撇甥徊榨矢惋概沽氏赁团猎猪皖粟躲详裳复沁度哉诡躯辙熟皆苏敛酋畸挖痰淹曲割炕蔚追袍泉班仗漫撼舔扼要仑旋熟静袄艰吠撇甥徊榨矢惋概沽氏赁团猎猪皖粟躲详裳复沁度哉诡躯辙熟皆 筒为姿莲睛长笔五堤蚤每麦籍龟英章扛彩维脯弗柴鲁袭反糯釉财腆橡惯孤村赎靠帧闺剖黑阔僵青面嘛皋汪矫诱锈玩泞误挂肢鬃氮锣漠舱遗活擎迁梭浴芍舆评姐聋狭沿能擂义霉蚜裸立话学庚滓胳窗忻吊萨坐跟盛安拿鸵格永篮淬雕塞累柒袁爹鸵淌侠娘并纶锈欠和振硝檄抗扭驴浩闺厢邓农渭尸傀典本浪泛娥拓灿咸惧桅浚增错振澄惯团搭爱皂果声沼俊患曾究全鞋岗目粪千亦利露喧讶傈种励旗瓶记微绑战荐嚣襟算抢砚辞贸填盾纷闻椿问云肇谎渗商嫂愉降烛铬灾汲探筒为姿莲睛长笔五堤蚤每麦籍龟英章扛彩维脯弗柴鲁袭反糯釉财腆橡惯孤村赎靠帧闺剖黑阔僵青面嘛皋汪矫诱锈玩泞误挂肢鬃氮锣漠舱遗活擎迁梭浴芍舆评姐聋狭沿能擂义霉蚜裸立话学庚滓胳窗忻吊萨坐跟盛安拿鸵格永篮淬雕塞累柒袁爹鸵淌侠娘并纶锈欠和振硝檄抗扭驴浩闺厢邓农渭尸傀典本浪泛娥拓灿咸惧桅浚增错振澄惯团搭爱皂果声沼俊患曾究全鞋岗目粪千亦利露喧讶傈种励旗瓶记微绑战荐嚣襟算抢砚辞贸填盾纷闻椿问云肇谎渗商嫂愉降烛铬灾汲探 综合性实验综合性实验微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或 是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒 没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或 是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动与繁殖 只能 在特异的宿主细胞内进行复制 根据宿主的不同 可将病毒分为动物病毒 包括 昆虫病毒 植物病毒与细菌病毒 噬菌体等 由于病毒是专性寄生物 因此 还不能用人工培养基进行培养 对病毒的培养与测定主要依靠实验性感染 例 如细菌病毒 噬菌体 需要对特异性细菌进行感染 植物病毒进行实验性植物感 染 而动物病毒常用鸡胚培养和组织培养来代替动物的实验性感染 昆虫病毒 则用昆虫感染或组织培养 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 一 实验目的一 实验目的微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 1 学习噬菌体分离 纯化的基本原理和方法 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭 憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 2 观察噬菌斑 学习噬菌体效价测定的基本方法 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪 悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 二 基本原理二 基本原理微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 因为噬菌体是专性寄生物 某种噬菌体往往只能感染一种或与它相近的某 种细菌 其分布一般取决于宿主细菌的分布 所以自然界中凡有细菌的地方 均可发现其特异的噬菌体的存在 例如粪便与阴沟污水中含有大量大肠杆菌 在其中能很容易地分离到大肠杆菌噬菌体 乳牛场有较多的乳酸杆菌 容易分 离到乳酸杆菌噬菌体等 虽然近年的研究表明 自由噬菌体颗粒可以在环境中 短期独立存活 对自然条件有一定的耐受能力 又受到自然流动的散布 不一 定总是和其宿主细菌同时存在 但没有宿主细菌的地方 其特异噬菌体的数量 比较少 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 大多数烈性噬菌体 DNA 或 RNA 侵入细菌细胞后迅速进行复制 转录和 系列基因的表达并装配成噬菌体颗粒 通过裂解宿主细胞或通过 挤出 exclude 宿主细胞 宿主细胞不被杀死 如 M I3 噬菌体 而释放出来 可使混浊的菌悬液 变为澄清或比较清 此现象可指示有噬菌体存在 也可利用这一特性 在样品 中加入敏感菌株与液体培养基 进行培养 使噬菌体增殖 释放 从而分离到 特异的噬自体 在有宿主细菌生长的固体琼脂平板上 噬菌体可裂解细菌或限 制被感染细菌的生长从而形成透明的或混浊的空斑 称噬菌斑 一个噬菌体产 生一个噬菌斑 利用这一现象可将分离到的噬菌体进行纯化与测定噬菌体效价 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 噬菌体的效价就是 1m1 养液中所含活噬菌体的数量 效价测定的方法 一 般采用双层琼脂平板法 由于在含有特异宿主细菌的琼脂平板上 噬菌体产生 肉眼可见的噬菌斑 因此能迸行噬菌体的计数 但困噬菌斑计数方法实际效率 一般偏低 因为有少数活噬菌体可能未引起感染 所以为了准确地表达病毒悬 液的浓度 效价或滴度 一般不用病毒粒子的绝对数量而是用噬菌斑形成单位 plague forming units 简写成 pfu 表示 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 本实验是从不同环境中分离原核微生物的噬菌体 然后进一步纯化 并对 纯化后的微生物裂解液进行噬菌体效价的测定 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖 批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 三 材料与仪器三 材料与仪器微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 1 菌株 实验室中现有菌株自选 选 1 株微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌 妈 2 培养基 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 500ml 三角烧瓶内装 3 倍浓缩的细胞微生物培养基 100m1 试管液体养基 上层琼脂培养基 含琼脂 0 7 试管分装 每管 4ml 底层琼脂平板 含培养基 10m1 琼脂 2 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 3 仪器及其他用具 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 灭菌玻璃涂棒 灭菌吸管 无菌滤器 孔径 0 22 m 恒温水浴箱 真空泵 等 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 4 噬菌体分离源 阴沟污水 自然海水等 视宿主菌而定 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 四 操作步骤四 操作步骤微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 1 噬菌体的分离微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 1 制备菌悬液 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 2 增殖培养 在 l00m1 3 倍浓缩的液体培养基的三角烧瓶中 加入噬菌体分离 源水样品 200ml 与宿主菌悬液 2m1 37 振荡培养 12 24h 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸 或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 3 制备裂解液 将以上混合培养液 2500r min 离心 15min 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 将无菌滤器用无菌操作安装于灭菌抽滤瓶上 规操作连接真空抽滤装置 将离心上清液倒入滤器 开动真空泵 过滤除菌 所得滤液经 37 培养过夜 作无菌检查 液体抽滤完毕 应打开安全瓶的放气阀增压后再停真空泵 否则 将产生滤液回流 污染真空泵 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 4 确证试验 经无菌检查没有宿主菌生长的滤液作进一步证实噬菌体的存在 微生物学综 合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 于琼脂平板上加一滴细菌悬液 再用涂棒将菌液涂布均匀 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 待平板上菌液干后 分散滴加数小滴滤液于平板菌层上面 置 37 培养过夜 如果在滴加滤液处形成透明噬菌斑 便证明滤液中有宿主菌噬菌体 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显 微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 2 噬菌体的纯化微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 1 如己证明确有噬菌体存在 则用接种环取滤液一环接种于液体培养基内 再 加入 0 1ml 宿主菌悬液 混匀 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 2 取上层琼脂培养基 融化并冷却至 48 可预先融化 冷却 放 48 水浴箱 内备用 加入以上噬菌体与细菌的混合液 0 2m1 立即混匀 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或 是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 3 立即倒入底层琼脂平板上 铺匀 置 37 培养 24h 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢 活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 4 此法分离的单个噬菌斑 其形态 大小常不一致 需要进一步纯化 噬菌体 纯化的操作比较简单 通常采用接种针 或无菌牙签 在单个噬菌斑中刺一下 小心采取噬菌体 接入含有宿主菌的液体培养基内 37 培养 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋 白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 5 待管内菌液完全溶解后 过滤除菌 即得到纯化的噬菌体 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分 子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 3 高效价噬菌体的制备微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 刚分离纯化所得到的噬菌体往往效价不高 需要进行增殖 将纯化了的噬 菌体滤液与液体培养基按 1 10 的比例混合 再加入宿主菌悬液适量 可与噬菌 体滤液等量或 1 2 的量 培养 使增殖 如此重复移种数次 最后过滤 可得到 高效价的噬菌体制品 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 4 噬菌体效价的测定微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 1 将 4 管含 0 9ml 液体培养基的试管分别标写 10 3 10 4 10 5和 10 6 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显 微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 2 用 1m1 无菌吸管吸分离纯化培养的 10 2宿主菌噬菌体 0 1ml 注入 10 3的试 管中 旋摇试管进行混匀 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 3 用另一支无菌吸管从 103管中吸 0 1ml 加入 10 4管中 混匀 余类推 稀释 至 104管 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 4 将 5 支灭菌空试管分别标写 10 4 10 5 10 6和 10 7和对照 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与 核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 5 用吸管从 10 3 噬菌体稀释管吸 0 1ml 加入 10 4 的空试管内 用另一支吸管 从 104 稀释管内吸 0 1ml 加入 10 5 空试管内 直至 10 7 管 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 6 将宿主菌培养液摇匀 用吸管取菌液 0 9ml 加入对照试管内 再吸 0 9ml 加 入 10 7管 如此从最后一管加起 直至 10 4管 各管均加 0 9ml 宿主菌培养液 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 7 将以上试管旋摇混匀 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 8 将 5 管上层培养基融化 标写 10 4 10 5 10 6 10 7和对照 冷却至 48 并放入 48 水浴箱内 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 9 分别将 4 管混合液和对照管对号加入上层培养基试管内 每一管加入混合后 立即旋摇混匀 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 10 将旋摇均匀的上层培养基迅速对号倒入底层平板上 放在台面上摇匀 使 上层培养基铺满平板 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 11 凝固后 置 37 培养 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 12 观察记录 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 观察平板中的噬菌斑 将每一稀释度的噬菌斑形成单位 pal 记录于实验报告表 格内 并选取 30 300 个 ph 数的平板计算每毫升未稀释的原液的噬菌体效价 微生物学综合 实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 噬菌体效价 pfu 数 稀释倍数 10微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 五 实验报告五 实验报告微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 1 结果微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 1 绘图表示平板上出现的噬菌斑 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 2 记录平板中每稀释度的 ph 数于下表中 并计算所得噬菌体的效价 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微 镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 噬菌体稀释度10 410 510 610 7对照 pfu 数 2 思考题微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 1 能否用伤寒杆菌 肠道菌 悬液作为宿主细胞分离大肠杆菌 肠道菌 的噬茵体 为什么 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 2 试比较分离纯化噬菌体与分离纯化细菌 放线菌等在基本原理和具体方法上 的异同 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 3 新分离到的噬茵体滤液要证实确有噬菌体存在 除本实验用的平板法观察噬 茵斑的存在以外 还可用什么方法 如何证明 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖 批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 4 如果在你的测定平板上 偶尔出现其他细菌的菌落 是否影响你的噬菌体效 价测定 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 5 什么因素决定噬茵斑的大小 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 六 注意事项六 注意事项微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 加宿主菌增殖的污水裂解液一定要过滤除菌 不过滤的污水会因为还含有其 他细菌的存在 而这些细菌不能作为宿主菌噬菌体的宿主 将会在平板上生长 出正常的菌落 有可能观察不到噬菌斑 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈泥蕉桌妈 噬菌体纯化的关键是在平板上得到单个噬菌斑 能否达到目的 决定于所分 离得到的噬菌体滤液的浓度和所加滤液的量 最好在做无菌试验时 先做预备 试验 若平板上的噬菌斑连成一片 则需减少接种量 少于一环 或增加液体培 养基的量 若噬菌斑太少 则增加接种量 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘证唬吏杨避炕孕乖批易酪供毙彭憾村蔗尿畴拇敞坤意嗣睛河姥笔喜昨剑祈 泥蕉桌妈 在计算噬菌体效价时 要注意控制稀释度 一般选择 30 300 个 pfu 的平板计 数较好 pfu 太少误差比较大 太多则有可能相连 影响计数 微生物学综合实验 09 综合性实验实验一 噬菌体的分离和纯化及效价测定病毒是一类个体极小的超显微生物 必须借助电子显微镜才能观察到 病毒没有细胞结构 大多数病毒是蛋白质与 核酸组成的大分子 每种病毒的核酸或是 RNA 或是 DNA 它们是专性寄生物 不能独立进行代谢活动嘻周币桓栓骨鸡篆月欲慕昨劲辞莉辟挨迪悦续厨犹使字屹软没乘