疱疹病毒

第三十一章 疱疹病毒(Herpesvirus),疱疹病毒（Herpes viruses）,有包膜的双链DNA病毒在感染细胞核内形成包涵体可形成增殖感染和潜伏感染仅次于流感病毒的引起人类病毒性疾病的病原体Herpes来源于希腊词语“herpein”（意为爬行、蠕动）,疱疹病毒的结构,病毒的结构模式图,疱疹病毒的电镜照片,单纯疱疹病毒（herpes simple virus，HSV）,宿主范围较广，易感细胞和易感动物多，复制增殖迅速，CPE明显，引起溶细胞性感染（细胞肿胀变大、变圆、核内嗜酸性包涵体、最终细胞脱落死亡）编码70多种蛋白病毒包膜有11种糖蛋白（gBgM） （1）型特异性抗原（gG），其单抗用于区分HSV-1和HSV-2 （2）对细胞吸附/穿入（ gB、gC、gD、gE ） （3）控制病毒从细胞核膜出芽释放 （gH） （4）诱导细胞融合（gB、gC、gD、gH） （5）诱生中和抗体(gD 最强) （6）免疫逃避（gC，gE 和gI） （7）细胞毒作用（已知的HSV糖蛋白均可）,流行病学,人群感染率高，广泛存在潜伏感染病人和健康带毒者是传染源亲密接触与性接触为主要的传播途径HSV-1一般通过口腔、污染的手及飞沫感染HSV-2一般通过性接触传播,HSV-1与HSV-2所致疾病的比较,原发感染（primary infection）,1、HSV-1原发性感染多发生于6个月至2岁，通过口腔、呼吸道黏膜、眼结膜及皮肤的破损处侵入机体，大多数为隐性感染，部分为唇疱疹、疱疹性龈口炎、疱疹性咽炎、疱疹性角膜炎、皮肤疱疹性湿疹；2、HSV-2原发性感染发生于性交后，引起生殖器疱疹，为STD；,原发感染,唇疱疹,齿龈炎,脓性指头炎,生殖器疱疹,潜伏感染和复发（latency and reactivation）,HSV原发感染后产生免疫力，血清中和抗体清除外周组织细胞中增殖性感染的病毒，阻止病毒在体内扩散；部分病毒可沿神经髓鞘到达三叉神经节、颈上神经节（HSV-1）和骶神经节（HSV-2），血清中和抗体可持续多年，中和游离病毒，但不能清除潜伏于神经节中的病毒；以潜伏状态与机体处于相对平衡，不引起临床症状；各种非特异性刺激下，潜伏的病毒激活增殖；病毒沿神经纤维索下行至感觉神经末梢，至附近表皮细胞内继续增殖，引起复发性局部疱疹；特点是每次复发病变往往发生于同一部位，HSV-1最常见在唇鼻间皮肤与粘膜交界处出现成群的小疱疹，HSV-2主要引起生殖器疱疹复发；孕妇体内潜伏的HSV-1如被激活，病毒可经胎盘感染胎儿，诱发流产、早产、死胎和先天畸形；,HSV潜伏感染和复发的模式图,垂直传播 生殖器疱疹发作期的孕妇经产道将HSV-2传给新生 儿导致新生儿疱疹，病灶常位于暴露部位如头皮， 严重时累及重要脏器，引起肺炎、脑炎、肝炎等， 病死率高达50以上,免疫性,原发感染后2周左右血中可出现中和抗体，3-4周达高峰，可持续多年；细胞免疫起更重要作用；（1）NK细胞可特异性杀死HSV感染细胞（2）抗体介导的ADCC效应亦可将HSV感染细胞裂解（3）细胞毒性T细胞和各种淋巴分子（如干扰素等） 在抗HSV感染中也有重要意义,微生物学检查,病毒分离 采取病人水泡液、角膜刮取物、脑脊液、阴道分泌液等，接种易感细胞中培养710天，细胞肿胀，变圆，相互融合等病变，可作初步诊断抗原和DNA检测 （1）用IFA、ELISA等方法直接检测细胞内或分泌液 中抗原，快速诊断HSV感染； （2）核酸探针和PCR检测病毒DNA,防治原则,治疗 （1）国内用HSV gC、gD单克隆抗体制成滴眼液， 用于治疗疱疹性角膜炎，取得显著疗效； （2）无环鸟苷（阿昔洛韦ACV）是疱疹病毒选择性很 强的药物（治疗生殖器疱疹、疱疹性角膜炎、新生 儿疱疹和疱疹性脑炎）、碘苷仅用于局部治疗疱疹 性角膜炎，阿糖腺苷用于治疗疱疹性角膜炎、新生 儿疱疹和疱疹性脑炎； （3）干扰素用于治疗疱疹,水痘-带状疱疹病毒（varicella-zoster virus，VZV）,与HSV相比，VZV宿主范围窄，人是VZV的唯一自然宿主，一般实验动物及鸡胚均不易感， VZV只在人胚成纤维细胞中增殖并缓慢产生局灶性细胞病变，出现多核巨细胞和核内包涵体只有一个血清型，皮肤是病毒的主要靶细胞可由同一种病毒引起两种不同的病症儿童初次感染引起水痘潜伏体内的病毒受到某些刺激后复发引起带状疱疹，多见于成年人和老年人,VZV的基本性状,基本性状与HSV相似； 对一般实验动物不敏 感，在人胚成纤维细 胞中增殖，并缓慢产 生细胞病变，出现核内 包涵体和多核巨细胞；,水痘（varicella）,病毒,经呼吸道、结膜、皮肤等处侵入人体,先在局部淋巴结增殖,进入血液（一次病毒血症）到达网状内皮系统内大量增殖,10-14 d后的二次病毒血症,散布到全身皮肤上皮细胞，皮肤广泛发生斑丘疹、水疱疹和脓疱疹,带状疱疹（zoster）,儿童时期患过水痘愈合,病毒潜伏在脊髓后根神经节或颅神经的感觉神经节中,机体免疫力下降等条件刺激,病毒沿感觉神经轴索下行,该神经所支配的皮肤细胞内增殖,在皮肤上沿着感觉神经的通路发生串联的水疱疹，形似带状，好发于胸、腹、面部，常偏于躯体一侧,微生物检查及防治,水痘一带状疱疹的临床症状典型，一般不需作微生物学诊断VZV减毒活疫苗预防水痘感染和传播有良好效果治疗可用无环鸟苷、阿糖腺苷和高剂量干扰素,巨细胞病毒（cytomegalovirus，CMV）,感染的细胞肿大、核变大、形成巨细胞，核内具有致密的嗜酸性包涵体（呈“猫头鹰眼”状）；HCMV具有典型的疱疹病毒形态，其基因结构也与HSV相似；有高度的种属特异性，人巨细胞病毒（HCMV）只能感染人；病毒在体内可感染上皮细胞、白细胞、精子细胞等多种细胞，但在体外只能在人胚肺成纤维细胞上增殖，培养中增殖缓慢，复制周期长，细胞病变出现缓慢,CMV的包涵体,致病性,HCMV感染极为普遍，原发感染多发生于2岁前，通常呈隐性感染，少数感染者有临床症状；人感染后虽有抗体产生，但多数可长期带毒形成潜伏感染；潜伏部位常在唾液腺、乳腺、肾脏及白细胞内等，病毒激活后从唾液、乳汁、尿液、精液、宫颈和阴道分泌物中排出；传播途径有接触感染（包括性接触）、胃肠道、呼吸道、先天性感染、血源性感染等,所致疾病,先天性感染占极少数 通过胎盘侵袭胎儿，多数隐性感染，少数有临床症状，出生的患儿发生黄疸、肝脾肿大、血小板减少性紫癜、溶血性贫血、脉络膜视网膜炎、永久性智力低下、耳聋等，严重者造成胎儿畸形、死胎或流产。孕妇原发感染造成胎儿感染的危险性要比复发感染高；围生期感染（经过产道和母乳感染，较常见） 产妇泌尿道和宫颈排出HCMV； 多数症状轻微或无临床症状，少数出现间质性肺 炎、肝脾轻度肿大等症状；输血感染 输血后单核细胞增多症、肝炎；,免疫缺陷宿主的感染 器官移植、白血病、AIDS、恶性肿瘤和长期使用免疫抑制剂等，激活了体内潜伏病毒，临床表现为严重间质性肺炎、肝炎、视网膜炎、食管炎、结肠炎、脑膜脑炎等，病死率相当高。细胞转化与致癌潜能 （1）经紫外线灭活的CMV可转化啮齿类动物胚胎成纤 维细胞 （2）某些肿瘤如宫颈癌、结肠癌等肿瘤组织中HCMV DNA检出率高，但无直接证据证实HCMV致癌,免疫性,特异性中和抗体可维持终生，但不起主要保护作用，细胞免疫对限制病毒的扩散以及在免疫抑制机体中防止HCMV的激活起主要作用，特异性CTL可以防御HCMV感染，可用于移植后HCMV感染治疗,微生物学检查,尿等标本离心沉淀，姬姆萨染色镜检，检查多核巨细胞及核内嗜酸性包涵体；分离培养可将标本接种于人胚肺成纤维细胞，培养2-4周，出现典型CPE；培养2-4 d后用IFA和ELISA检查抗原；ELISA检测IgM抗体适用于HCMV近期活动性感染，包括原发、复发或先天性感染（IgM抗体不能通过胎盘，新生儿血清中检出IgM抗体表示胎儿宫内感染）中病毒复制的标志；ELISA检测IgG抗体，用于流行病学调查；病毒抗原检测，IFA和ELISA检查抗原；病毒DNA检查，用DNA探针和PCR检测病毒DNA，可用于潜伏病毒的检测,治疗与预防,丙氧鸟苷（更昔洛韦，ganciclovir，GCV）有防止CMV扩散作用；耐丙氧鸟苷的CMV感染可选用磷甲酸钠，但效果比前者差；CMV病毒活疫苗致癌潜能的问题有待解决；,EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）,Epstein和Barr于1964年首次成功地从Burkitt非洲儿童淋巴瘤细胞中分离、鉴定，故名；形态结构与其它疱疹病毒相似；主要侵犯B细胞；在B细胞内引起两种形式的感染： 增殖性感染 非增殖性感染不同感染状态时表达的抗原不同；,不同感染状态下表达的抗原不同（5种抗原）（1）EBV核抗原（EBV nuclear antigen，EBNA）， 出现于EBV感染的B细胞的核内，作用表现为维 持病毒持续性潜伏感染，与细胞转化功能有关；（2）潜伏期膜蛋白（latent membrane protein， LMP），表达在EBV潜伏感染的B细胞膜上；（3）EBV早期抗原（early antigen，EA），是病毒 感染细胞进入溶解性周期复制的标志，为病毒增 殖性感染的非结构蛋白；,（4）EBV衣壳抗原（viral capsid antigen，VCA）， 病毒增殖性感染晚期出现的结构蛋白，即病毒 的衣壳；（5）EBV膜蛋白（membrane antigen，MA），病毒 增殖性感染晚期出现的结构蛋白，即病毒的包膜糖 蛋白 其中，（1）和（2）在病毒感染的潜伏期表达，又称潜伏期抗原；（3）、（4）和（5）在病毒增殖性感染时表达，又称增殖性感染的相关抗原,EBV的增殖性感染,病毒增殖，感染细胞溶解死亡增殖性感染相关抗原 EBV早期抗原（EA） 非结构蛋白，具DNA 多聚酶活性 EBV衣壳抗原（VCA） 与病毒DNA组成EBV 的核衣壳 EBV膜抗原（MA） 包膜糖蛋白，为EBV 的中和抗原,EBV非增殖性感染,包括： 潜伏感染 病毒基因组处于潜伏状态，病毒感染造 成B细胞的“转化”或“永生化”，可被激 活而转为增殖性感染； 恶性转化 转化的B细胞受到某些条件的促发，可 发生染色体易位并致癌变；潜伏感染相关抗原 EBV核抗原（EBNA） 潜伏感染和转化的B细胞核 内均可检出； 潜伏期膜蛋白（LMP） 潜伏感染B细胞的表面抗原；,致病性,EB病毒在人群中广泛感染；我国35岁儿童感染率达90%以上；主要通过唾液传播，也可经输血传染；EB病毒在口咽部上皮细胞内增殖，然后感染B淋巴细胞；感染B细胞进入血循环可造成全身性感染；病毒可长期潜伏,所致疾病,传染性单核细胞增多症；非洲儿童淋巴瘤（即Burkitt淋巴瘤）；其他淋巴增生性疾病（淋巴瘤、霍奇金病）；鼻咽癌,传染性单核细胞增多症（infectious mononucleosis）,一种急性良性淋巴组织增生性疾病，多见于青春期，初次感染EBV后发病；三个典型症状为发热、咽炎和颈淋巴结肿大；随病情发展可出现肝脾肿大、肝功能异常，外周血单核细胞增多，并出现异型淋巴细胞（幼稚型、泡沫型、不规则型，包括CD4+的Th和CD8+的CTL，可杀伤表面有EBV抗原表达的B细胞，限制EBV的扩散，促进疾病的恢复）,非洲儿童恶性淋巴瘤（即Burkitt淋巴瘤）,于中非、新几内亚和美洲温热带地区呈地方性流行；多见于512岁儿童；好发部位为颜面、腭部；所有BL病人血清均含EBV抗体， 其中80%以上滴度高于正常人；在肿瘤组织中发现EBV基因组,其他淋巴增生性疾病,器官或骨髓移植时使用了大量的免疫抑制剂，抑制了细胞免疫功能，EBV转化了的B细胞逃脱了免疫监视作用后，大量增殖；B细胞增生性疾病的发生，如淋巴瘤、霍奇金病（Hodgkins disease）；,鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma）,我国南方（广东、广西、湖南）及东南亚是鼻咽癌高发区；多发生于45岁左右中年和中老年人；EBV与鼻咽癌的关系： （1）在所有病例的癌组织中有EBV基因组存在 和表达； （2）病人血清中有高效价的针对EBV抗原（主 要VCA和EA）的lgG和 lgA 抗体，病情好 转后，这些抗体的滴度也随之下降；,微生物学检查,EBV分离培养困难，故很少采用；可用核酸杂交和PCR等方法检测细胞内EBV特异性DNA；血清学诊断 EBV特异性抗体的检测 检测病毒VCA-IgA或EA-IgA抗体，滴度1：10有诊断意义 异嗜性抗体凝集试验 用于传染性单核细胞增多症的辅助诊断，发病早期，患者血清中出现一种能凝集绵羊、牛红细胞的IgM抗体，该抗体在发病34周内达到高峰，在恢复期迅速下降至消失病毒抗原检测（潜伏抗原） IFA和ELISA检测细胞中的EBNA，鼻咽癌细胞、EBV相关的淋巴瘤细胞中可查到EBNA和LMP,防治原则,我国用基因工程方法构建的同时表达EBV gp320（MA）和HBsAg的疫苗，重点使用在鼻咽癌高发区,典型HHV结构，基因组160170KB，包膜较厚有两个血清型（A、B型）,人类疱疹病毒6型（HHV-6）,致病性,传染源是健康带毒者，传播途径是唾液飞沫传播、垂直传播。感染多见于6个月至2岁婴幼儿