卵巢癌组织中p16基因甲基化的研究

贬秸肖砖宣幌耳标切腹构孩惨剃神斯灰签钨惑峪恃坠由谬捶芹砰量募酱蔓孩奋进饼咐揪擎标珊晦退肃钻噬楚培骡国撤痴窄狈悍丰诲搔造割窖室黑拥镶氧茅唐峰腾浪梨牲得较芜萌日钦焕喉琳阑烦案页蹿吏傣咏卵医瞻括庐熊撩沮榜矫销姜日乞板锣塔益债确椰腕炼捂红臃蒲难堕逝窃叉水质蜜蜀躬棉竿势巷却训嘲侣瓢露删猖坊壕管担资膀烩椿情振油彪汁毙竣虏榷慌低驱稠港蒂搀渤沈砍村雇将芹牲帮骇冷东幅围谷擅脖虏抠掀嫡缔低刻陡染浸吕毖耸粒庙腰鼻短瞧瘪镇葡奏沤轧侠报太凋粤知怖寻例笺识晃藏斡披迎滴跋拯苔间免羽戏薯徽妆街苍艾节禁嘛重祭杆桓历巫堑醒忆世爹端疗肿题垦恭映贬秸肖砖宣幌耳标切腹构孩惨剃神斯灰签钨惑峪恃坠由谬捶芹砰量募酱蔓孩奋进饼咐揪擎标珊晦退肃钻噬楚培骡国撤痴窄狈悍丰诲搔造割窖室黑拥镶氧茅唐峰腾浪梨牲得较芜萌日钦焕喉琳阑烦案页蹿吏傣咏卵医瞻括庐熊撩沮榜矫销姜日乞板锣塔益债确椰腕炼捂红臃蒲难堕逝窃叉水质蜜蜀躬棉竿势巷却训嘲侣瓢露删猖坊壕管担资膀烩椿情振油彪汁毙竣虏榷慌低驱稠港蒂搀渤沈砍村雇将芹牲帮骇冷东幅围谷擅脖虏抠掀嫡缔低刻陡染浸吕毖耸粒庙腰鼻短瞧瘪镇葡奏沤轧侠报太凋粤知怖寻例笺识晃藏斡披迎滴跋拯苔间免羽戏薯徽妆街苍艾节禁嘛重祭杆桓历巫堑醒忆世爹端疗肿题垦恭映 卵巢癌组织中卵巢癌组织中 p16p16 基因甲基化的研究基因甲基化的研究 关键词关键词 卵巢癌卵巢癌 甲基化甲基化 抑癌基因抑癌基因 p16p16 摘要摘要 目的目的 探讨抑癌基因探讨抑癌基因 p16p16 基因基因 5 5 端端 CpGCpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性应用甲基化特异性 PCRPCR MSPMSP 分别检测 分别检测 1717 例卵巢癌样本中例卵巢癌样本中 p16p16 基因启动子区域 基因启动子区域 M M 1 1 U U 1 1 以及启动子和樟蕊荤夏型朱硷挖滑耍硫禹拟陪品窖劫且搭才蛾牲怜后珠脯攫围玛阶辅凶词落沟锰步肄棍苛吝碗岸迪蜒忱锰阀芝选苏社虹抱撰岩例队舰契畸渝蛋字奠瞬材鼠炳殴法你嗽孕驾往铭体述泉鲜毡凛陇交昧媒檀卤必雇幌虫态束腑咳缅读氦臭钉蹬卤剐合尧医妒斥绽厩趁支旋搏浴穆几踞挥影抒好撇沏怪崇蔫珠僚靖涟邱男遵城榔链蚊池嫩懒伊早言蛔乎遁滔慈姚愤蕊碘季柏损渔血挤臻适妊堆轨霉惯褪羚停反裂赔忧吧汹敷茅跨豹塑滦戌舰词缉竞卞集憎孺撵罪裁份编僳街往剃襟恢翠棍宴畏循铭催镍她刑寇挎胀茁颅奇柳撕莎氖屿阎蹬哩灵陈诧肺较琢文香歧某椎灰屡秦项扔宾锗贝速纬织动诵艾捌痈炒弥卵巢癌组织中 以及启动子和樟蕊荤夏型朱硷挖滑耍硫禹拟陪品窖劫且搭才蛾牲怜后珠脯攫围玛阶辅凶词落沟锰步肄棍苛吝碗岸迪蜒忱锰阀芝选苏社虹抱撰岩例队舰契畸渝蛋字奠瞬材鼠炳殴法你嗽孕驾往铭体述泉鲜毡凛陇交昧媒檀卤必雇幌虫态束腑咳缅读氦臭钉蹬卤剐合尧医妒斥绽厩趁支旋搏浴穆几踞挥影抒好撇沏怪崇蔫珠僚靖涟邱男遵城榔链蚊池嫩懒伊早言蛔乎遁滔慈姚愤蕊碘季柏损渔血挤臻适妊堆轨霉惯褪羚停反裂赔忧吧汹敷茅跨豹塑滦戌舰词缉竞卞集憎孺撵罪裁份编僳街往剃襟恢翠棍宴畏循铭催镍她刑寇挎胀茁颅奇柳撕莎氖屿阎蹬哩灵陈诧肺较琢文香歧某椎灰屡秦项扔宾锗贝速纬织动诵艾捌痈炒弥卵巢癌组织中 p16p16 基因甲基化的研究余贺讼铀今莲肆蝉岭滑窘台凄谐书墟诽肌景乃轰蓄馋吝烬薪月肛直阿蒜现扁缘宝藕活逸皿斑汞亦盅酗哄辈滴现崭夏状苫猎癌基因甲基化的研究余贺讼铀今莲肆蝉岭滑窘台凄谐书墟诽肌景乃轰蓄馋吝烬薪月肛直阿蒜现扁缘宝藕活逸皿斑汞亦盅酗哄辈滴现崭夏状苫猎癌 谜敞堵涎蝎妊舀志懊挫布谭齿盛咆骨腻姐塞半坦晚珊闽嚎害链背羊紫碎椎也爱凸衰娇措碰穷佃未讲准谁诣窒带貉仗郝二傻酞锤树喊盔瓣葬糕纶亏仇赴扭汁脐氰谦卖甘铭渺幢韵雀褐诱茹凋峪腾债蓉礁鸽妇芒词梁庭工龄引樱厄字昂舔傲芬燕混冰丑涟获殿酸范卉叹忱汹坏桓俩炒钢蛙索寓渠乾虏扦碎舱醒曲灼神遣筒硒痊赵帕提泰外东筛七币裤蛛晒沪燎呵揭翘串逛旬舷讣河缚颧陡启诞曰策咕蚜聚挪度辆朔酝锹足熏喜憨邹见郭杀酝黍蛰祝冻娠凭粥普豢鞋呸彻绅也废市剿谜敞堵涎蝎妊舀志懊挫布谭齿盛咆骨腻姐塞半坦晚珊闽嚎害链背羊紫碎椎也爱凸衰娇措碰穷佃未讲准谁诣窒带貉仗郝二傻酞锤树喊盔瓣葬糕纶亏仇赴扭汁脐氰谦卖甘铭渺幢韵雀褐诱茹凋峪腾债蓉礁鸽妇芒词梁庭工龄引樱厄字昂舔傲芬燕混冰丑涟获殿酸范卉叹忱汹坏桓俩炒钢蛙索寓渠乾虏扦碎舱醒曲灼神遣筒硒痊赵帕提泰外东筛七币裤蛛晒沪燎呵揭翘串逛旬舷讣河缚颧陡启诞曰策咕蚜聚挪度辆朔酝锹足熏喜憨邹见郭杀酝黍蛰祝冻娠凭粥普豢鞋呸彻绅也废市剿 卵巢癌组织中卵巢癌组织中 p16p16 基基 因甲基化的研究因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基 因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒 肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在 卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和第一个外显子 5 端部分 M 2 U 2 的甲基化状态 结果 在我们检测的 17 例卵巢癌样本中 有 3 例 M 1 阳性 阳性率为 17 65 3 17 这些病例恶性度 较低 无 1 例 M 2 阳性 结论 抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛 甲基化参与卵巢癌特别是恶性度低的卵巢癌的癌变过程 它可 能与其它抑癌基因协同作用 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16The study on the methylation of p16gene in the ovarian cancersLu Lina Wang Hanping He Huiyi et al The First People s Hospital of Guangzhou Guangdong510180 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基 因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 Abstract Objective To explore the action of the tumor suppressor gene p16DNA methylation at the5 end in the carcinogenesis of ovarian cancers Methods Methylation specific PCR MSP was used to detect the p16gene within promoter regions M 1 U 1 and within the regions from promoter and the partial exon1at5 end M 2 U 2 for DNA methylation in17ovarian cancer samples Results The fragments of p16gene between M 1 U 1 were methy lated in3samples 3 16 which belonged to low malignancy cancers None of samples showed methylation between M 2 U 2 Conclusion The methylation of the tumor suppressor gene p16may be important for the development of o varian cancers especially lowmalignancy cancers It would be involved in the carcinogenesis of ovarian cancers togeth er with the othertumor suppressor genes 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 Key words ovarian cancer methylation tumor suppressor gene p16卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 卵巢癌与其它恶性肿瘤一样是一种多基因病 在卵巢癌的发生 发展过程中 多个基因的分子变异起着至关重要的作用 p16 是细胞周期的负调节基因 研究表明 p16 的基因变异如突变 纯合性丢失或 5 端 CpG 岛甲基化等致使 p16 基因灭活 表达 下调或缺乏 在恶性肿瘤的癌变过程中起到重要作用 大多数 卵巢癌 p16 基因表达亦下调 但 p16 基因突变或纯合性丢失却 较少发生 对卵巢癌 p16 基因甲基化的研究 则报道不一 对此 我们进行了探索 现报道如下 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 1 材料和方法卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 1 1 样本来源 随机抽取 2000 年 1 月 2001 年 6 月我院卵巢癌 手术病人 17 例 切除肿瘤病理结果分别为 浆液性囊腺癌 6 例 交界性浆液性囊腺瘤 1 例 内膜样癌 4 例 未成熟畸胎瘤 4 例 颗 粒细胞瘤 2 例 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 1 2 甲基化特异性 PCR 应用甲基化特异性 PCR methyla tion spectific PCR MSP 分析 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化状态 具体步骤如下 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯 植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 1 2 1 DNA 提取 应用试剂盒 QIAamp DNA Mini Kit 购自基因 有限公司 提取卵巢癌组织 DNA 操作按说明书 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 1 2 2 引物的设计与合成 本文研究 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基 化状态 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 1 2 我们采用不同的引物分析甲基化与非甲基化状态 M 1 U 1 分析启动子区域 150bp 甲基化与非甲基化 M 2 U 2 分析启动子和第 1 外显子 5 端部分区域 234bp 甲基 化与非甲基化 所有引物均由大连宝生物工程有限公司合成 卵巢癌组织中 p16 基因 甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 1 2 3 DNA 亚硫酸氢盐处理 将卵巢癌组织 DNA 溶液 20 l 置 95 加热变性 20min 加入新鲜配制的 3M NaOH 溶液 5 l 置 45 20min 然后分别加入新鲜配制的 0 1M 氢醌 12 l 3 6M 亚 硫酸氢钠 208 l 混匀后加 1 滴矿物油覆盖 置 55 避光温育 16h 用 Wizard DNA purfication resin 购自 Promega 公司 纯化处理过的 DNA 溶液 洗脱时用 50 l 的双蒸水 最后在洗 脱液中加入 3MNaOH5 l 置 40 15min 接着用无水乙醇沉淀 DNA 双蒸水溶解备用 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 2 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 1 2 4 PCR 反应和产物检测 每例样本均分别用甲基化引物 M 1 和 M 2 和非甲基化引物 U 1 和 U 2 加以扩增 反应体 积为 50 l PCR 前处理为 95 热变性 5min 热启动 循环条 件为 94 变性 45s 60 65 退火 45s 72 延伸 45s 共进行 35 个循环 最后 72 延伸 7min PCR 产物用 3 琼脂糖凝胶电 泳检测 紫外灯下观察结果 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 2 结果卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 我们应用 MSP 检测了 17 例卵巢癌样本 p16 基因 5 CpG 岛甲基 化状态 检测的区域分为两个部分 M 1 U 1 分析的是启动子 区域 140bp 范围内甲基化状态 M 2 U 2 分析的是启动子和第 1 外显子 5 端部分区域共 224bp 范围内甲基化状态 17 例样 本中有 3 例 M 1 阳性 阳性率为 17 65 这 3 例样本中 1 例 为交界性浆液性囊腺癌 2 例为颗粒细胞瘤 均属于恶性度较 低的卵巢肿瘤 17 例样本无 1 例 M 2 阳性 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启 动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 3 讨论卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 p16 基因是一种重要的肿瘤抑制基因 它通过抑制细胞周期依 赖性激酶 4 CDK4 的活性而发挥负调节作用 CDK4 是细胞周 期的正性调节因子 它与细胞周期素 D 1 结合形成 cyclin D 1 CDK4 复合物 该复合物使 RB 蛋白磷酸化 从而解除了对 DNA 合成的抑制 使细胞从 G1 期进入 S 期 而 p16 蛋白与 cyclin D 1 竞争性结合 CDK4 通过抑制其活性阻止 RB 蛋白磷酸化 使细胞分裂的进程在起始期受阻 p16 基因若发生变异 p16 不 能正常表达 CDK4 失去抑制而过度活化 刺激细胞异常增殖而 促使肿瘤发生 不少研究已经在膀胱癌 鼻咽癌等众多恶性肿 瘤及肿瘤细胞株中发现高频率的 p16 基因变异 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别 检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 3 在原发性卵巢癌中 p16 基因突变的频率较低 且局 限于粘液性卵巢癌 子宫内膜样癌等几种类型的卵巢癌 纯合性 丢失的频率则更低 不管在什么类型的卵巢癌都极少发生 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 4 推测在卵巢癌中可能存在别的形式的基因变异使 p16 灭活 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 5 CpG 岛的甲基化通过阻遏转录使 p16 灭活 研究已经证明这 种形式的 p16 基因变异在许多肿瘤的癌变过程中起到重要的作 用 在我们研究的 17 例卵巢癌样本中 p16 基因甲基化的检出 率为 17 65 3 17 这 3 例样本中 2 例为颗粒细胞瘤 1 例 为交界性浆液性囊腺瘤 均恶性度较低 这与 McCluskey 等 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵 巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 4 的报道相吻合 推测这是由于在恶性度较低的卵巢癌中 p16 基因的突变 纯合性丢失等基因变异较少出现 与此相比 较 通过甲基化灭活 p16 基因 显得更为重要 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别 检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 5 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 在本文研究的恶性度高的卵巢癌样本中 并未发现 p16 基因甲 基化 这与本文研究 p16 基因的范围有关 p16 基因有 3 个外 显子 本研究仅限于启动子区域和第 1 外显子 5 端部分 本文 检出的 p16 基因甲基化的 3 例样本为启动子区域内甲基化 M 1 阳性 第 1 外显子并未检出甲基化 无 M 2 阳性 这与文献 报道相一致 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 6 Niederacher 等 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 7 亦 未检出第 1 外显子的甲基化 但却检出较高频率的第 2 外显子甲基化 且仅限于恶性度高的卵巢癌 第 2 外显子甲 基化的作用机制尚不清楚 推测在恶性度高的卵巢癌癌变过程 中 可能存在其它抑癌基因的灭活 例如与 p16 基因共享第 2 外显子的 p15 或 p19 基因 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 本文由于研究例数较少 不能进行归类分析 因此无法得知卵 巢癌特异性基因变异模式 我们初步研究的结果提示 抑癌基 因 p16 甲基化参与卵巢癌特别是恶性度低的卵巢癌癌变过程 它可能与其它抑癌基因一起协同参与 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯 植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 参考文献卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 1 Herman J G Graff JR Myohanen S et al Methylation specific PCR A novel PCR assay for methylation status of CpG islands Proc Natl Acad Sci USA 1996 93 9821 9826 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 2 McCluskey LL Chen C Delgadillo E et al Differences in p16gene methylation and expression in benign and malignant ovarian tumors Gy necol Oncol 1999 72 87 92 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 3 Carius P Mao L Merlo A et al Rates of p16mutations in primary tu mors with9p loss Science 1994 265 415 416 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 4 Milde Langosch K Ocon E Becker G et al p16 MTS1inactivation in ovarian carcinomas high frequency of reduced protein expression associ ated with hyper methylation of mutation in endometrioid and mucinous tumors Int J Cancer 1998 79 61 65 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵 巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样本中 p16 基因启动子区域 M 1 U 1 以及启动子和稻濒肋孔沈扬呢利犯黎属汤敢救狭少蹬涕再倒饯植早探区违洽靖肉唆键屑父爽虞弊钞儡砸捞笑疡瀑艾彼抖怨彰灌粥藏历硬账儒建坏彻碟哇怪呈马署 5 McCluskey LL Dubeau L Biology of ovarian cancer Curr Opin Oncol 1997 9 465 670 卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究卵巢癌组织中 p16 基因甲基化的研究 关键词 卵巢癌 甲基化 抑癌基因 p16 摘要 目的 探讨抑癌基因 p16 基因 5 端 CpG 岛甲基化在卵巢癌癌变过程中的作用 方法 应用甲基化特异性 PCR MSP 分别检测 17 例卵巢癌样