2010版溶液颜色检查法标准操作规程

溶液颜色检查法标准操作规程 1 目的 建立溶液颜色检查法标准操作规程 2 范围 溶液颜色检查法 3 责任 质检员实施本操作规程 检验室主任负责监督本规程正确执行 4 程序 溶液颜色检查法系控制药品有色杂质限量的方法 是对通常利用紫外检测 器进行有关物质高效液相色谱法测定的有效补充 有色杂质的来源一是由生产 工艺中引入 二是在贮存过程中由于药品不稳定降解产生 中国药典 2010 年版二部附录 IX A 溶液颜色检查法项下规定了三种检查方法 目视法 紫外 可见分光光度法和色差计法 并增加了品种中规定的 无色或几乎无色的定义 无色 系指供试品溶液的颜色相同于所用溶剂 几乎无色 系指供试品溶液 的颜色浅于用水稀释 1 倍的相应色调 1 号标准比色液 第一法 4 1 简述 本法为目测比色法 即将供试品溶液与各色调标准比色液进行比较 以判 定结果 4 2 仪器与用具 4 2 1 纳氏比色管 用具有 10ml 刻度标线的 25ml 纳氏比色管或专用管 要求玻璃质量较好 管壁薄厚 管径 色泽 刻度标线一致 4 2 1 白色背景要求不反光 一般用白纸或白布 4 3 试药与试液 4 3 1 重铬酸钾用基准试剂 硫酸铜及氯化钴均为分析纯试剂 4 3 2 比色用重铬酸钾溶液 精密称取在 120 干燥至恒重的基准重铬酸钾 0 400g 置 500ml 量瓶中 加适量水溶解并稀释至刻度 摇匀 即得 每 1ml 溶液中含 0 800mg 的 K2Cr2O7 4 3 3 比色用硫酸铜液 取硫酸铜约 32 5g 加适量的盐酸溶液 1 40 使溶解成 500ml 精密量取 10ml 置碘瓶中 加水 50ml 醋酸 4ml 与碘化钾 2g 用硫代硫酸钠滴定液 0 1mol L 滴定 至近终点时 加淀粉指示液 2ml 继续滴定至蓝色消失 每 1ml 的硫代硫酸钠滴定液 0 1mol L 相当于 24 97mg 的 CuSO4 5H2O 根据上述测定结果 在剩余的原溶液中加适量的盐酸溶液 1 40 使每 1ml 溶液中含 62 4mg 的 CuSO4 5H2O 即得 4 3 4 比色用氯化钴液 取氯化钴约 32 5g 加适量的盐酸溶液 1 40 使溶解成 500ml 精密量取 2ml 置锥形瓶中 加水 200ml 摇匀 加氨试液至 溶液由浅红色转变至绿色后 加醋酸 醋酸钠缓冲溶液 pH6 0 10ml 加热至 60 再加二甲酚橙指示液 5 滴 用乙二胺四醋酸二钠滴定液 0 05mol L 滴 定至溶液显黄色 每 1ml 的乙二胺四醋酸二钠滴定液 0 05mol L 相当于 11 90mgr 的 CoCl2 6H2O 根据上述测定结果 在剩余的原溶液中加适量的盐酸 溶液 1 40 使每 1ml 溶液中含 59 5mg 的 CoCl2 6H2O 即得 4 3 5 各种色调标准贮备液的制备 按表 1 量取比色用重铬酸钾 比色用 硫酸铜液和比色用氯化钴液与水 摇匀 即得 表 1 各种色调标准贮备液配制表 色 调 比色用氯化钴 液 ml 比色用重铬酸钾 液 ml 比色用硫酸铜液 ml 水 ml 黄绿色1 222 87 268 8 黄 色4 023 3072 7 橙黄色10 619 04 066 4 橙红色12 020 0068 0 棕红色22 512 520 045 0 4 3 5 各种色调色号标准比色液的制备 按表 2 量取各该色调标准贮备液 与水 摇匀 即得 表 2 标准比色液制备 色号123456789 贮备液 ml 0 51 01 52 02 53 04 56 07 5 加水量 ml 9 59 08 58 07 57 05 54 02 5 4 4 操作方法 除另有规定外 取各品种项下规定量的供试品 加水溶解 置于 25ml 的纳 氏比色管中 加水稀释至 10ml 另取规定色调和色号的标准比色液 10ml 置 另一 25ml 的纳氏比色管中 两管同置白色背景上 自上向下透视 或同置白色 背景前 平视观察 比较时可在自然光下进行 以漫射光为光源 供试品管呈 现的颜色与对照管比较 不得更深 4 5 注意事项 4 5 1 所用比色管应洁净 干燥 洗涤时不能用硬物洗刷 应用铬酸洗液 浸泡 然后冲洗 避免表面粗糙 4 5 2 检查时光线应明亮 光强度应能保证使各相邻色号的标准液清晰分 辩 4 5 3 如果供试管的颜色与对照管的颜色非常相近或色调不尽一致 使目 视观察无法辨别二者的深浅时 应改用第三法 色差计法 测定 4 6 记录 应记录供试品溶液的制备方法 标准比色液的色调色号 比较结果 4 7 结果与判断 供试品溶液如显色 与规定的标准比色液比较 颜色相似或更浅 即判为 符合规定 如更深 则判为不符合规定 第二法 4 1 简述 本法为紫外 可见分光光度法 4 2 仪器 紫外 可见分光光度计 4 3 操作方法 4 3 1 除另有规定外 如供试品为原料药 称取各品种项下规定量供试品 加水溶解使成 10ml 或加水溶解使成规定量的体积 必要时滤过 取续滤液 照紫外 可见分光光度法于规定的波长处测定吸收度 4 3 2 如供试品为固体制剂 取该供试品研细 称取该药品项下规定量的 细粉 加水溶解使成规定量的体积 振摇或用其他规定的方法使溶解 滤过 取续滤液照紫外 可见分光光度法于规定波长处测定吸光度 4 3 3 如供试品为注射液或液体制剂 量取该供试品适量 加水或规定的 溶剂稀释成规定的浓度 供试品的浓度与规定浓度相同时 可直接测定 照紫 外 可见分光光度法 以水或规定的溶剂为空白 于规定波长处测定吸光度 4 4 注意事项 4 3 1 与 4 3 2 中的滤过是指在规定 滤过 而无进一步说明时 使液体 通过适当的滤纸或相应的装置过滤 直至滤液澄清 弃去初滤液 取续滤液测 定 4 5 记录 应记录仪器型号与测定波长 供试液的制备方法及吸光度读数 4 6 结果判定 按规定溶剂与浓度配制成的供试液进行测定 如吸收度小于或等于规定值 判为符合规定 大于规定值 则判为不符合规定 第三法 4 1 简述 本法是通过色差计直接测定药品溶液的透射三刺激值 对其颜色进行定量 表述和分析的方法 当供试品溶液的颜色处于合格边缘 目视法难以准确判断 时 以及供试品与标准比色液色调不一致时 更可显示本法的优越性 判断方 法是直接将标准比色液和供试品溶液的三刺激值 或色品坐标值 进行比较 或通过标准比色液和供试品溶液分别与水的色差值进行比较 4 2 仪器及其性能测试 4 2 1 色差计 测色色差计是由照明 探测及读数处理系统三大部分组成 照明系统多为白炽光源 也有用微型脉冲氙灯的 探测器多为硒 硅 光电池 硅光电二极管或光电管 并配以拟合人眼色觉特性的滤光器 读数系统为数显 示表 其输出结果除三刺激值外 还有根据 CIE 国际照明委员会 表色系统 自动计算而得的各种色度学参数 可根据需要进行选定 4 2 2 仪器的性能测试 根据中华人民共和国国家技术监督局颁布的测色色 差计检计规程 JJG594 89 的规定进行检定 仪器首先应符合照度条件 它决 定着仪器测色准确度的高低 为减少测色误差 仪器一般配备有专用工作白板 色板或其它其基准物质以校正仪器 检定项目除准确度外 还有重复性等 4 3 测定法操作法与结果判定 除另有规定外 用水对仪器进行校准 并把水作为第一份样品进行测定 仪器将给出水的颜色值 接着依次取按各品种项下规定的方法配制的供试品溶 液和标准比色液 分别进行测定 仪器不仅可测出两种溶液的颜色值 还给出 供试品溶液和标准比液分别对水的色差值 E 如供试品溶液与水的色差 值不超过标准比色液与水的色差值 则判定为符合规定 反之则判定为不符合 规定 4 4 注意事项 4 4 1 测定池应洁净透明 可用洗液浸泡清洗 4 4 2 水的三刺激值为 X 94 81 Y 100 00 Z 107 32 如测定后水的三刺 激值中任一值与标准值的偏差大于 1 5 则应重新校准仪器 4 4 3 供试品溶液配制后需立即测定 如溶液中含有气泡 可短时超声去 除后再行测定 4 4 4 本法只适用于测定澄清溶液的颜色 如供试品溶液浑浊 则影响颜 色测定的结果 4 4 5 如各品种项下规定的标准比色液有两种 或两种以上 但目视可判 断供试液的色调与其中一种相同或接近 则可直接与该色调标准比色液的色差 值 E 进行比较判断 如供试液的色调