第六章--芳香酸及其酯类药物的分析课件.ppt

第六章芳酸及其酯类药物的分析 基本要求 一 掌握本类药物的鉴别反应 掌握本类药物特殊杂质检查方法 掌握本类药物含量测定方法 二 了解本类药物的结构特征和理化性质 了解本类药物体内分析方法 结构分析 包括 芳酸 芳酸酯 芳酸盐 共同点 苯环 羧基 不同点 不同的取代基 如酚羟基 芳伯氨基等 性质 一 物理性质 1 固体具有一定的熔点 2 溶解性游离芳酸类药物几乎不溶于水 易溶于有机溶剂 芳酸碱金属盐及其它盐易溶于水 难溶于有机溶剂 二 化学性质 1 芳酸具游离羧基 呈酸性 其pKa在3 6之间 属中等强度的酸或弱酸 X NO2 OH等吸电子取代基存在使酸性增强 CH3 NH2等斥电子取代基存在使酸性减弱 邻位取代 间位 对位取代 尤其是邻位取代了酚羟基 由于形成分子内氢健 酸性大为增强 2 芳酸碱金属盐易溶于水 水解 溶液呈碱性 但碱性太弱 所以其含量测定方法为双相滴定法或非水碱量法 3 芳酸酯可水解 利用其水解得到酸和醇的性质可进行鉴别 利用芳酸酯水解定量消耗氢氧化钠的性质 芳酸酯类药物可用水解后剩余滴定法测定含量 芳酸酯类药物还应检查因水解而引入的特殊杂质 4 UV 5 IR 6 取代芳酸类药物可利用其取代基的性质进行鉴别和含量测定 如具有酚羟基的药物可用FeCl3反应鉴别 具芳伯氨基的药物可用重氮化 偶合反应鉴别 亚硝酸钠滴定法测定含量 7 色谱法 制剂分析 常见的芳酸及其酯类药物 水杨酸类 贝诺酯 1 酸性SA PKa2 95 ASA PKa3 49 双水杨酯均有酸性 2 溶解性 均为固体 有一定溶点 除钠盐溶于水 其余不溶 3 UV和IR光谱特性 分子结构中具有苯环 有UV和IR特征吸收 4 芳伯氨基和酚羟基特性 5 水解特性 ASA 双水杨酯及其制剂应检查水杨酸 对氨基水杨酸钠和贝诺酯检查间氨基酚和对氨基酚 主要理化性质 苯甲酸类 氨甲苯酸 羟苯乙酯 丙磺舒 pKa3 4 布美他尼 主要理化性质 1 溶解性 均为固体 有一定溶点 除钠盐溶于水 其余不溶 2 UV和IR光谱特性 分子结构中具有苯环 有UV和IR特征吸收 3 具有酚羟基特性 4 分解反应特性 苯甲酸钠分解为苯甲酸 丙磺舒分解为SO25 酸性 苯甲酸 丙磺舒和甲芬那酸有游离的羧基 可用NaOH直接滴定测定其含量 其他芳酸类药物 氯贝丁酯 酚磺乙胺 1 溶解性 水中不溶 有机溶剂溶解 氯贝丁酯为液体 布洛芬为固体 有一定熔点 2 UV和IR特征吸收光谱 基于分子结构中具有苯环和特征基团 鉴别试验 一 FeCl3反应 具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物 直接 水杨酸 对氨基水杨酸钠 双水杨酯 水杨酸二乙胺 酚磺乙胺 对乙酰氨基酚 水杨酸ChP 2005 鉴别 1 取本品的水溶液 加三氯化铁试液1滴 即显紫堇色 间接 阿司匹林 贝诺酯 阿司匹林ChP 2005 鉴别 1 取本品约0 1g 加水10ml 煮沸 放冷 加三氯化铁试液1滴 即显紫堇色 水杨酸类药物与三氯化铁试液反应结果药物试验方法结果水杨酸本品水溶液 与三氯化铁试液反应紫堇色水杨酸二乙胺本品水溶液 与三氯化铁试液反应紫堇色阿司匹林加热水解后 与三氯化铁试液反应紫堇色对氨基水杨酸钠加稀盐酸呈酸性后 与三氯化铁试液反应紫红色贝诺酯加氢氧化钠试液煮沸水解后 与三氯化铁试液反应紫堇色双水杨酯本品稀溶液 与三氯化铁试液反应紫色 二 重氮化 偶合反应 芳香第一胺类鉴别反应具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物 直接 对氨基水杨酸钠 盐酸普鲁卡因 苯佐卡因 盐酸普鲁卡因胺间接 对乙酰氨基酚 扑热息痛 醋氨苯砜 贝诺酯 三 水解反应 OH 1 分解产物的反应 苯甲酸盐 四 特殊反应 2 与汞离子及茚三酮反应 3 氧化反应含硫的药物 4 异羟肟酸铁反应 六 IR 五 UV 特殊杂质检查 一 阿司匹林中特殊杂质的检查 一 合成工艺 特殊杂质检查 二 检查 1 溶液澄清度 特殊杂质检查 2 水杨酸的检查 1 杂质来源原料残存 生产过程中乙酰化不完全 水解产生 贮存过程中水解产生 2 检查方法对照法反应原理三氯化铁反应限量原料 0 1 阿司匹林片 0 3 阿司匹林肠溶片 1 5 阿司匹林栓 1 0 HPLC法 其他杂质 乙酰水杨酸酐 ASAN 乙酰水杨酰水杨酸 ASSA 水杨酰水杨酸 SSA 二 对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查 1 杂质来源原料残存 脱羧产生 2 检查方法ChP 2005 含量测定法 双相滴定法 利用对氨基水杨酸钠不溶于乙醚 间氨基酚溶于乙醚的性质 使二者分离后 在乙醚中加水适量 用盐酸滴定 控制盐酸滴定液体积以控制间氨基酚限量 USP 24 离子对HPLC法 内标法 三 双水杨酯中有关物质的检查BP 1998 TLC水杨酸 杂质对照品法有关物质 高低浓度对比法 1 杂质对照品法 方法 供试品 供试品溶液 杂质对照品 对照品溶液 判断 供试品中所含杂质斑点大小及颜色不得超过相应的杂质对照斑点 优点 同一物质 同一Rf值比较 准确度高 直观性强 缺点 需要杂质对照品 2 高低浓度对比法 方法 判断 供试品溶液所显杂质斑点不得深于对照溶液的主斑点 或荧光强度 控制杂质斑点个数 控制杂质种类 缺点 不同物质 不同Rf值比较 准确度差 直观性差 优点 以供试品的稀溶液作为对照液 不需要杂质对照品 简单 价廉 还可配成几种限量的对照溶液 四 羟苯乙酯中有关物质的检查BP 1998 反相TLC高低浓度对比法 五 酚磺乙胺中氢醌的检查ChP 2000 HPLC法 六 氯贝丁酯中对氯酚及挥发性杂质的检查GC 含量测定 一 中和法 1 直接滴定法pKa3 6 阿司匹林ChP 2005 取本品约0 4g 精密称定 加中性乙醇 对酚酞指示液显中性 20ml 溶解后 加酚酞指示液3滴 用氢氧化钠滴定液 0 1mo1 L 滴定 每lml的氢氧化钠滴定液 0 1mo1 L 相当于18 02mg的C9H8O4 1 测定方法及计算Ka 3 27 10 4反应摩尔比为1 1 2 讨论 中性乙醇溶解阿司匹林且防止酯键水解 中性 是对中和法所用的指示剂而言 优点 简便 快速缺点 酯键水解干扰 不断搅拌 快速滴定 酸性杂质干扰 如水杨酸 适用范围 不能用于含水杨酸过高或制剂分析 只能用于合格原料药的含量测定 2 水解后剩余滴定法酯的一般含量测定方法 阿司匹林 USP 24 方法 取本品约1 5g 精密称定 加入氢氧化钠滴定液 0 5mo1 L 50 0m1 混合 缓缓煮沸10min 放冷 加酚酞指示液 用硫酸滴定液 0 25mo1 L 滴定剩余的氢氧化钠 并将滴定结果用空白试验校正 每1ml的氢氧化钠滴定液 0 5mol l 相当于45 04mg的C9H8O4 2NaOH 过量 H2SO4 Na2SO4 2H2O 剩余滴定 水解 反应摩尔比为1 1优点 消除了酯键水解的干扰缺点 酸性杂质干扰 羟苯乙酯含量测定亦可用此法 3 两步滴定法阿司匹林片 阿司匹林肠溶片氯贝丁酯 如阿司匹林片的测定 取本品10片 精密称定 研细 精密称取适量 约相当于阿司匹林0 3g 置锥形瓶中 加中性乙醇 对酚酞指示液显中性 溶解后 振摇使阿司匹林溶解 加酚酞指示液3滴 滴加氢氧化钠滴定液 0 1mol L 至溶液显粉红色 再精密加氢氧化钠滴定液 0 1mol L 40m1 置水浴上加热15分钟并时时振摇 迅速放冷至室温 用硫酸滴定液 0 05mol L 滴定 并将滴定的结果用空白试验校正 每lml的氢氧化钠滴定液 0 1mo1 L 相当于18 02mg的C9H8O4 第一步中和 第二步水解后剩余滴定 水解 2NaOH 过量 H2SO4 Na2SO4 2H2O反应摩尔比为2 1本法消除了酸性杂质的干扰 降低了酯键水解的干扰 剩余滴定 氯贝丁酯 消除供试品中共存的酸性杂质 片剂含量测定结果的计算 剩余滴定法 含量计算 ASA的标示量百分含量 V0 V C实际 18 02 10 3 0 05Ws W 标示量 100 讨论 1 加中性乙醇 助溶 防止水解 2 空白实验 因为碱液受热时易吸收二氧化碳 形成碳酸钠 碳酸钠对酚酞不显红色 3 双相滴定法 芳酸碱金属盐 如苯甲酸钠ChP 2005 溶剂 水 乙醚 取本品1 5g 精密称定 置分液漏斗中 加水25m1 乙醚50ml及甲基指示液2滴 用盐酸滴定液 0 5mo1 L 滴定 随滴随振摇 至水层显橙红色 分取水层 置具塞锥形瓶中 乙醚层用水5ml洗涤 洗液并入锥形瓶中 加乙醚20m1 继续用盐酸滴定液0 5mo1 L 滴定 随滴定随振摇 至水层显持续的橙红色 每1ml的盐酸滴定液 0 5mol L 相当于72 06mg的C7H5NaO2 乙醚的作用是 萃取反应生成的苯甲酸 使水相中的中和反应进行到底滴定中要强力振摇 随着滴定不断进行 苯甲酸不断被萃取入有机溶剂层 使滴定反应完全 终点清晰 优点 消除了反应产物的干扰 5 非水碱量法芳酸碱金属盐冰醋酸作溶剂高氯酸的冰醋酸溶液作滴定剂结晶紫作指示剂指示终点或电位法指示终点 6 缩合后酸碱滴定法氨甲苯酸加入甲醛使与氨甲苯酸作用 生成Schiff碱后 用碱液滴定 氨甲苯酸取本品约0 3g 精密称定 加水30ml 加热使溶解 放冷 加甲醛与甲酚红指示液 用氢氧化钠滴定液 0 1mo1 L 滴定至溶液显淡紫色 并将滴定结果用空白试液校正 每lml的氢氧化钠滴定液 0 1mo1 L 相当于15 12mg的C8H9NO2 二 亚硝酸钠滴定法具芳伯氨基或潜在芳伯氨基 芳酰氨基水解或硝基还原 的药物 三 紫外分光光度法1 直接紫外分光光度法酚磺乙胺注射液ChP 2005 精密量取本品适量 约相当于酚磺乙胺0 25g 置200ml量瓶中 用乙醇稀释至刻度 摇匀 精密量取2m1 置100ml量瓶中 用乙醇稀释至刻度 摇匀 在1cm吸收池中 以溶剂为空白 于305nm的波长处测定吸收度 按C10H17NO5S的吸收系数 为159计算含量 注射液含量测定结果的计算 紫外分光光度法吸收系数法 2 过滤后的紫外分光光度法丙磺舒片 取本品10片 精密称定 研细 精密称取适量 约相当于丙磺舒60mg 置200m1量瓶中 加乙醇150ml与盐酸溶液 9 100 4m1 置70 水浴上加热30min 放冷 用乙醇稀释至刻度 摇匀 滤过 弃去初滤液 精密量取续滤液5ml 置100ml量瓶中 加盐酸溶液 9 100 2m1 用乙醇稀释至刻度 摇匀 于1cm吸收池中 以溶剂为空白 在249nm的波长处测定吸收度 按C13H19NO4S的吸收系数 为338计算 紫外分光光度法吸收系数法 3 柱分配色谱 紫外分光光度法USP 24 阿司匹林胶囊可同时定量测定阿司匹林和水杨酸 1 水杨酸的限量测定固定相 FeCl3SA保留 冰醋酸洗脱 306nm测水杨酸的量 2 含量测定固定相 NaHCO3AAS SA保留冰醋酸洗脱 280nm测总量 4 离子交换后紫外分光光度法氯贝丁酯强碱性阴离子交换树脂吸附酸性杂质后 对照法定量测定氯贝丁酯含量 原料药对照法 四 HPLC1 阿司匹林栓剂ChP 2000 离子抑制色谱法内标法定量 2 对氨基水杨酸钠USP 24 离子对反相HPLC内标法定量 3 丙磺舒USP 24 离子抑制色谱法外标法定量 4 酚磺乙胺ChP 2000 正相HPLC内标法定量 练习题1 两步滴定法测定阿司匹林片是因为 A 片剂中有其他酸性物质B 片剂中有其他碱性物质C 需用碱定量水解D 阿司匹林具有酸碱两性E 使滴定终点明显 2 某药与碳酸钠共热 酸化后有白色沉淀产生 加乙醇和硫酸 共热 有香气产生 此药可能是 A 对氨基水杨酸B 对氨基苯甲酸C 苯甲酸钠D 乙酰水杨酸E 普鲁卡因 3 苯甲酸钠的含量测定 中国药典 2005年版 采用双相滴定法 其所用的溶剂体系为A 水 乙醇B 水 冰醋酸C 水 氯仿D 水 乙醚E 水 丙酮 4 在本类药物的酸碱滴定中 要求采用中性乙醇做溶剂 所谓 中性 是指 B A PH 7B 对所用指示剂显中性C 除去酸性杂质的乙醇D 对甲基橙显中性E 相对被测物而言 5 121 125 含量测定方法 中国药典1995年版 为A 直接中和滴定法B 两步滴定法C 两者均可D 两者均不可121 阿司匹林片122 阿司匹林原料药123 对氨基水杨酸钠124 阿司匹林栓剂125 阿司匹林肠溶剂 B A D D B 6 126 130 A 两步酸碱滴定法B 直接酸碱滴定法C 两者皆是D 两者皆不是126 苯甲酸钠的测定127 氯贝丁酯的测定128 盐酸的测定129 酸碱滴定法130 阿司匹林片的测定 D A B