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文档简介
补充染色体外的DNA 质粒2 细胞器基因组 1 质粒DNA结构与功能 质粒 plasmid 是某些细菌和真核生物细胞中存在于染色体以外的DNA分子 1kb 200kb不等 大多数细菌的质粒是双链 共价闭合环状DNA分子 以超螺旋形式存在 细菌中普遍存在 宿主范围较窄 独立于染色体之外进行复制和遗传 有多种机制维持其稳定的copy及精确分配给子代 复制转录或多或少依赖宿主编码的酶与蛋白质 含有编码对细菌宿主有利酶的基因 抗生素抗性 限制修饰 降解复杂化合物等 质粒的分类 根据复制机理 严紧控制型 严格受到宿主细胞的控制 只含2 3个松弛控制型 生长繁殖不受宿主细胞的限制 几十到几百个 质粒的复制子决定其copy 复制子 一个遗传单位 包括复制起点和相关调控元件 质粒复制子 质粒DNA中能自主复制并维持正常copy数的一段最小的核酸序列单位 基因工程最常用 pMB1 colE1 质粒的不相容性 利用同一复制系统的两个质粒在复制和随后向子细胞分配过程中彼此竞争 因而不能和平共处携带相同复制子属于同一不相容组 不共存在同一细菌中 2 细胞器基因组 线粒体基因组 闭环双链超螺旋 动物的较小 植物的较大 叶绿体基因组 闭环双链超螺旋 100 200kb 基因无明显成簇现象 rRNA基因多copy 与E coli有同源序列 基因有内含子 PCR引物GC含量 应该保持合理的GC含量 含有50 的G C的20个碱基的寡核苷酸链的Tm值大概在56 62 范围内 这为有效退火提供足够热度 一对引物GC含量和Tm值应该协调 对于低
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