细菌的形态与染色.ppt

实验一细菌的形态与染色 一 录像 微生物学发展史二 实验室规则介绍 生物安全 三 细菌形态示教及示教操作四 学生操作 革兰染色法 Gramstain 五 作业 实验室规则介绍 生物安全 牢固树立 有菌观念 严格执行 无菌操作 严防 杂菌污染 实验室规则介绍 生物安全 一 安全使用水 电 煤二 保持实验室安静有序 爱护实验器材三 培养良好习惯 树立自我保护意识穿实验服不在实验室内吃东西不将任何实验材料 如细菌涂片 细菌培养物 携带出实验室 实验室规则介绍 生物安全 若有传染性材料污染桌面 地面 书 衣物或人体 应立即报告教师 并在教师指导下进行消毒处理实验用过的物品归还原处 带有传染性的吸管 玻片等 必须放在指定地点实验结束后 清洗消毒 0 1 新洁尔灭溶液中浸泡 双手后方可离开四 做好实验室清洁卫生工作 细菌形态示教及示教操作 细菌的形态结构细菌的大小及排列细菌的基本结构细菌的特殊结构荚膜 鞭毛 菌毛 芽孢3 细菌的染色检查法 细菌形态示教 荚膜 肺炎球菌荚膜 capsule 细菌形态示教 鞭毛 菌毛 菌毛pilus电镜下 变形杆菌周身鞭毛flagellum光学显微镜下 细菌形态示教 芽孢 破伤风杆菌芽孢endosporeofC tetani 光学显微镜下形态 电子显微镜下形态 G 菌G 菌等电点PI2 3PI4 5带负电荷多带负电荷少通透性低高肽聚糖多 脂质少肽聚糖少 脂质多酒精不易进入酒精易进入 Gramstain原理 Gramstain意义 1 鉴别细菌 分成G 菌和G 菌2 选择药物 G 菌和G 菌对抗菌药物敏感性不一样3 与致病性有关 G 菌产生外毒素G 菌产生内毒素 革兰染色法Gramstain 学生操作 两人一组材料 两人一组菌种 表皮葡萄球菌及大肠杆菌斜面各一支玻片每人1张革兰染色液一套接种环每人一支 革兰染色法Gramstain 基本过程 涂片干燥固定4 染色 接种棒冷却 事先加好NS量少 革兰染色法Gramstain 1 涂片制备 按下图分别加生理盐水各一滴 再按下图分别加菌研匀 菌1 菌1 菌2 菌2 革兰染色法Gramstain 制备一张好涂片的基本要素 1 玻片不含油脂 若有油脂可用卷筒纸蘸95 酒精擦干净 2 生理盐水应尽量少加 3 取菌不宜过多 2 干燥 自然干燥或烘干 标本面朝上 3 固定 热固定 火焰上来回通过3次固定 目的 1 使细胞质凝固 以固定细胞形态 并使之牢固附着在载玻片上 2 杀死细菌 操作更安全 涂片 结晶紫初染1min 碘液媒染1min 95 酒精脱色30s 复红复染30s 水洗 干 革兰染色全过程示意图 紫碘酒红 11半半 每次水洗 阳紫阴红 水洗 干 烘干 油镜检 水洗 干 水洗 干 水洗 干 实验报告 格式 一 目的二 材料与方法三 结果 需用彩笔画示意图 四 分析与讨论 作为平时成绩记入总成绩 革兰染色影响因素分析 脱色是关键菌液涂片不能太厚3 细菌生长周期的影响 细菌形态示教 革兰染色 Streptococcus链球菌 streptococcus链球菌 Staphylococcus葡萄球菌 E Coli大肠杆菌 细菌形态示教 美蓝染色 奈瑟染色 脑脊液标本涂片中的脑膜炎双球菌 1 分成10组 每组2 3人 每组成员参与讨论1次 以小组计成绩 占总成绩的10 2 评价指标包括以下5个方面 每个指标2分 A 主题明确 讲解思路清晰并能即兴回答提问B 口头表达能力强 语言生动流畅 能吸引学生的注意力C PPT制作精美 重点突出并与讲解内容协调D 资料准备翔实 数据可靠E 有良好的团队协作精神 讨论课基本要求 讨论课安排 消毒与灭菌 实验二 奈瑟菌 实验三 细菌感染的实验室诊断 实验四 微小杆菌等 实验七 梅毒螺旋体 实验八 钩端螺旋体 实验八 立克次体 实验八 支原体 实验八 衣原体 实验八 真菌 实验九 由专人负责安排讨论课 讨论课提纲 消毒与灭菌 1 何为消毒 灭菌 防腐 无菌 2 你认为在哪些情况下常会使用到消毒与灭菌技术 3 消毒与灭菌通常可使用哪些方法 4 湿热的灭菌效果为什么比干热要好 5 当对某一件器物既可用物理方法也可用化学方法进行消毒灭菌时 你认为应该优先选哪一种方法较好 为什么 6 你认为物理或化学方法可导致微生物或感染因子灭活或死亡的机理是什么 注 讲解时间必须控制在20min之内 留5min让其他