凝血功能检测的影响因素

凝血功能检查的影响因素,黄少卿,IX,XI,X,II,Fibrinogen,Fibrin,XII,纤维蛋白原：1,Fibrin,（十五的） 月亮,凝血酶原,鳄鱼（21）：我也学天狗吃月亮！,婴儿（12）筷子（11）酒吧（98）,凝血检查结果的影响因素,采血样本处理,溶解处理,状态机械维护保养,样本,试剂,分析仪,病人,患者的准备,一、病人状态(患者的准备）,1、最好是晨起空腹抽血检查；2、采血前应避免剧烈运动，如有运动，须适当的休息后再采血；3、住院患者床旁采血时，应避免输侧抽血或留置针抽血，以免血液被稀释或药物的混入；,一、病人状态(患者的准备）,4、进行抗凝治疗、使用抗凝药物或其它影响检测药物的患者，应在血液药物浓度降低或过了药物半衰期后采血；5、需要监测凝血功能的患者应尽量在相同的条件下进行采血，比如选择上午空腹，就应该坚持上午空腹采血。6、饮食、吸烟、喝酒等影响。,二、药物的影响,1、口服华法林监测：目前监测华法林最常用的指标：国际标准化比值（INR），INR和出血危险性密切相关，当INR4时出血危险性增加，5时危险性急剧增加，50%,活动度降至2030%，INR维持在2.04.0.,二、药物的影响,2、肝素治疗：APTT监测：小剂量（5000-10000u/24h）可不监测。应用中剂量以上必须监测。APTT较正常对照延长1.5-2.5倍为宜。,二、药物的影响,3、抗生素治疗：大剂量的抗生素使用可以造成PT、APTT的延长；有报道称：青霉素含量达到2 万u /ml 血液时，可使PT、APTT 延长1 倍以上，INR值也延长1 倍以上；4、溶栓治疗中，建议Fib在1.21.5gL，TT在正常对照的l.52.5倍;,二、药物的影响,5、输注脂肪乳类的药品会对检测造成干扰，由于CS2000i中凝血四项的检测方法是透射光法，在标本本底异常混浊的清况下，对检测结果的影响是很大的，当然，这方面我们可以通过高速离心处理得以解决。6、阿斯匹林、潘生丁和抵克利得等药物能抑制血小板聚集；口服避孕药可增强凝血因子的活性等等。,三、凝血检查标本采集要求,标本采集：静脉血1.8ml，注入含有0.2ml枸椽酸钠溶液的（1：9）抗凝真空管中，并轻轻颠倒5至10次使之充分混匀与抗凝；采血人员应做到一针见血，防止组织损伤，外源性凝血因子混入；压脉带捆扎时间最好在1min内，不超过2min；需要重复使用止血带时，应改用对侧上臂；,三、凝血检查标本采集要求,血管内血液总量是2.0ml0.2ml,否则会影响检验结果；当血液与抗凝剂的比例从9：1上升到7：1时，APTT会显著延长。,四、抗凝管的使用,正确109mmol/L枸椽酸钠，抗凝剂与血液比例是1：9抗凝；错误充盈不足，血液/抗凝剂比例下降，导致结果假性延长充盈过度，血液/抗凝剂比例升高，引起结果错误或标本凝固,四、抗凝管的使用,推荐的采血顺序 凝血样本应该放在第二或第三管 血培养管 普通血清玻璃管 凝血样本枸橼酸钠抗凝管 凝胶血清分离管/普通血清塑料管 肝素管 EDTA血常规管 葡萄糖管,四、抗凝管的使用, 抗凝剂浓度调整当压积大于55%或小于25%的血液标本,需要调整抗凝剂比例.,计算公式：抗凝剂量（ml)=0.00185X血液毫升数X(100-压积),五、标本放置温度与时间的影响,1、血凝标本采集后应该在1个小时内将送达实验室，及早分离血浆，及早检测；由于凝血因子、极不稳定，随着时间的延长，保存环境温度的升高，凝血活性逐渐消失，使得PT、APTT延长，因此最好在2小时内完成检测。2、如果不能在项目的稳定时间内完成检测，应分离血浆，加盖冷藏保存于2-8 暂时保存，或-20 条件下保存两周， -70 标本可保存6个月。,五、标本放置温度与时间的影响,五、标本放置温度与时间的影响,1、血凝标本采集后应该在1个小时内将送达实验室，及早分离血浆，及早检测；由于凝血因子、极不稳定，随着时间的延长，保存环境温度的升高，凝血活性逐渐消失，使得PT、APTT延长，因此最好在2小时内完成检测。,丛玉隆等.血浆凝血因子测定的影响因素探讨.中华医学检验杂志.1995年3月第18卷第2期,五、标本放置温度与时间的影响,六、标本溶血、脂血及黄疸,1、轻度溶血、脂血、黄疸标本可以上机检测，对检测结果影响不大；2、重度脂血的处理：13000转/分钟高速离心15分钟；吸取中间层血浆进行测定；3、重度溶血，重抽血复查；如果是自身疾病造成的血管内溶血，手工复查PT、APTT结果，报告单上注明标本溶血，并与临床医生沟通。4、黄疸标本，轻度黄疸，直接上机测定，重度黄疸标本，手工作复查PT、APTT结果，报告单上注明标本重度黄疸，并与临床医生沟通。,七、标本凝集,1、明显凝集，显而易见，直接当不合格标本处理，并联系临床重抽血检查。2、肉眼不见的标本部分凝集：FIB，APTT同时降低，DD-升高，提示标本内可能有极小凝块存在，标本肉眼不见部分凝集造成的凝血常规检测结果的偏差可能不影响临床决策，在重抽复查困难且结果不超出临床决定水平的患者可不复查。,严格按照说明书要求做,试剂方面的因素对凝血检查的影响,有效期? 储存条件稳定性,水的质量溶解程序有效期?,溶解,处理,严格按照说明书要求做,试剂方面的因素对凝血检查的影响,有效期? 储存条件稳定性,水的质量溶解程序有效期?,溶解,处理,试剂方面的因素对凝血检查的影响, 水质 I 级水：用于检测试剂，要求干扰最小 II 级水：用于常规检测方法 III级水：用于冲洗玻璃器皿,NS: 没有特别要求.,活性炭或蒸馏或反渗透,Type I,Type II,Type III,10,1000,NS,NS,NS,5.08.0,10 (inline),1.0,0.1,0.05,0.1,1.0,0.22-m filter,NS,NS,NS,NS,最大微生物量 (CFU/mL),pH,最小电阻 (MW/cm),最大硅酸盐浓度 (mg/L),颗粒物质,有机污染物,NCCLS Document C3-A3. 1997, 水质NCCLS 指南推荐I级水用于凝血试验.试剂要求使用双蒸水.而我们使用的是灭菌注射用水，效果理想。使用商业化的水，无需检查电阻，微生物数量等.高pH会凝固试验时间延长.混浊的水表示有污染或存在钙离子.,试剂方面的因素对凝血检查的影响,试剂方面的因素对凝血检查的影响, 溶解程序 不正确的溶解比例或量污染常常是误差的来源 1) 移液管，加样枪头等 2) 被污染的水 水里含有防腐剂或微生物或抗生素等. 3) 使用不干净的容器或搅拌棒 4) 残留的清洁液 5）塑胶滑石粉的污染,试剂方面的因素对凝血检查的影响, 溶解后的储存注意试剂和质控的有效期，在效期内使用. 参考说明书 溶解后的稳定性和保存温度不用的时候闭盖2-8C保存。,严格按照说明书操作仪器.,分析仪器的影响因素,吸样和分配 混匀 温度光路,日常维护其他维护,机械方面,Maintenance,分析仪器的影响因素, 吸样和分配样本和试剂量不准确不精密 1) 针或管路有气泡 2) 针外壁脏 3) 堵针 4) 样本或试剂的注射器单元故障 5) 针的未知错误,重复性差 凝固时间延长 不凝固,分析仪器的影响因素, 仪器故障仪器故障或检测程序错误 1) 混匀功能减弱 2) 孵育时间激活时间不正确 3) 温度异常 4) 试剂飞溅污染 5) 电磁干扰,重复性差 结果不准确,分析仪器误差,找到问题修理故障，采用备用的仪器或方法确认检查测试程序 (test protocol)重新分析手工分析或其他方法 获得准确的结果每天执行维护保养，尤其是采用厂家推荐的清洁液洗针 每天执行质控,急诊颅脑损伤病人：APTT100s、PT50s、TT60s，而FIB、D二聚体正常，重抽血复查，所有结果均正常。 原因：血的 护士用EDTA管抽血，后发现抽错管把血倒入枸椽酸管送检； 钙离子是凝血的因子,凝血过程中的关键成分,而EDTA能将钙离子络合而完全抗拮,而枸椽酸钠只是部分结合钙离子,所以标本的三项凝血指标都延长,而FIB和DD正常。,案例分析1,一位接受心脏人工瓣膜置换术的患者，术后一直服用华法令，每天2.5mg,INR在2.0-2.5之间波动，一直很稳定。今天到医院检查INR为3.1，临床医生向检验科反应情况，认为PT-INR有问题，数据忽高忽低，让人不可信。 原因： 在询问了病人后，得知该患者前几天因受凉感冒发热，自行服用泰诺感冒片，后上当地医院挂了两天头孢菌素类抗生素，造成INR波动的原因终于找到了。 患者王某出现上述原因有两个：第一，服用了抑制血小板聚集的药物泰诺感冒片从而增强抗凝药的抗凝作用。第二，因为静脉点滴了广谱的头孢类抗生素，抑制了肠道中产生维生素K的细菌的繁殖，而肠道菌合成维生素K是人体维生素K的一个重要来源，从而使华法林的抗凝作用增强，最终导致检测结果INR增高。对此解释，医生和患者表示非常满意。为了进一步让临床信任我科的结果。,案例分析2,超过检测上限情况的总结： PT180s,APTT180s,TT240s,FIB180s、APTT180s,这种情况可能严重血栓进行大剂量抗凝治疗；一般在治疗过后凝血