免疫学检查

免疫学检查(Immunologic test)陕西中医学院诊断学教研室,一、检查内容,1. 评估机体的免疫功能状态2. 检测与自身免疫病相关的抗体或致敏T 细胞3. 检测与过敏性疾病相关的变应原或IgE抗体4. 检测某些致病微生物的抗原或抗体5. 检测某些肿瘤抗原、激素含量,二、常用的免疫检查方法,1. 沉淀试验2. 凝集试验3. 补体结合试验4. 中和试验5. 荧光免疫技术6. 酶免疫技术7. 放射免疫技术8.发光免疫技术9. 时间分辨荧光免疫技术10. 流式细胞仪分析技术11. 分子生物学分析技术,三、机体免疫功能检查,(一)非特异性免疫功能测定1. 血清蛋白区带电泳- + 白蛋白 1、2球蛋白 1、2球蛋白 -球蛋白 血清蛋白区带电泳示意图谱,2. 外周血中性粒细胞计数，趋化、吞噬、杀菌功能测定 趋化功能降低：易反复感染、齿龈炎、中耳炎、 Chediak-Higashi综合征、迟钝性白细胞综合征、有肌蛋白功能不全、高于IgE综合征等。 吞噬功能降低：中性粒功能异常综合征、补体所致调理缺陷症、膜糖蛋白缺陷症、慢性肉芽肿、肌动蛋白功能不全等。 杀菌功能降低：慢性肉芽肿、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、慢性粒白血病、糖尿病等,三、机体免疫功能检查,3. 血清总补体、C3、C4、B因子、溶菌酶测定补体降低：自身免疫病，易反复感染等补体增高：风湿热急性期、结节性多动脉炎、皮肌炎、心梗、Reiter综合征等B因子降低：表示补体旁路途径激活溶菌酶：见于白血病、肾脏疾病；见于肿瘤患者,三、机体免疫功能检查,2. B淋巴细胞功能检查血清IgG含量测定特异性抗体产生能力的体内试验白喉类毒素、破伤风类毒素、肺炎球菌多糖抗原、流感嗜血杆菌多糖抗原接种后57天能检测到IgM型抗体，再次免疫后1周产生IgG型抗体。特异性抗体产生能力的体外试验洗涤+ +低倍镜下计数酶点数(抗体生成细胞数),Ag吸附醋纤膜,外周血单个核细胞,5%CO2376h,生物素 温育抗 体 洗涤,酶复合物底物,三、机体免疫功能检查,3. 淋巴结或组织活检浅皮质区B细胞的居住地深皮质区T细胞的居住地髓 质浆细胞(受抗原刺激)/髓索及髓窦(静止淋巴结)直肠粘膜固有层有丰富的浆细胞和IgA抗体分泌细胞常见与体液免疫功能缺陷的疾病1. 性联无丙种球蛋白血症2. 普通变异型免疫缺陷病3. 高IgM综合征4. 选择性IgA缺陷病5. IgG亚类缺陷症,三、机体免疫功能检查,(三)细胞免疫功能检查1. T细胞数量检查CD3+ 成熟T细胞(69.44.86%)CD4+ 辅助T细胞、诱导T细胞、杀伤T细胞、单核吞噬细胞(41.175.28%)CD8+ 抑制T细胞、毒性T细胞、反抑制T细胞 (24.58 4.02%)2. T细胞功能检查T细胞转化试验(60%80%)抑制性T细胞功能检测(40% 10%)T细胞介导细胞毒试验,三、机体免疫功能检查,3.mIL-2R细胞检测mIL-2R阳性细胞是T细胞活化的标志(正常人的PBMC静息状态为2%6%，PHA诱导培养后为22%39%) 静息时过度表达提示有免疫病理损害 诱导后表达率降低提示患者细胞免疫功能不全4.婴幼儿侧位胸片若不见胸腺阴影，提示有T细胞缺陷5.淋巴结活检若皮质区和副皮质区界线不清，生发中心消失，提示有T细胞缺陷6.成人PPD 5u ,4872h后红肿、硬结或直径28%，CD4+/CD8+3.0，IgG、IgM、IgA2. 血清sIL-2R，SACE3. Kveim抗原试验(90%阳性)支气管哮喘1. 过敏原皮肤试验呈阳性(bronchial asthma)2. 放射性过敏原吸附试验(RAST)或ELISA呈阳性3. 嗜碱粒细胞脱颗粒试验(HBDT)(70%阳性)4. 血浆组胺(正常: 1.82.7mol/L) 尿组胺(正常：15%；(idiopathic pulmonary2. 血清r-球蛋白，IgA、IgM、 IgG、fibrosis, IPE) RF(+)、ANA(+)外源性变应性肺泡炎1. 血清特异性抗原沉淀抗体(90% (+)(extrinsis allergic alreolitis, EAA)2. BALF中淋巴细胞，肥大细胞, CD4+/CD8+,s IL-2R ,透明质酸酶 3. 血清sIL-2R、CRP、RF(+)、Ig,3.常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标,肺嗜酸粒细胞浸润症1. 外周血及痰中嗜酸粒细胞计数(pulmonary infiltration2. 血清及BALF中IgE，Igwith eosinophilia, PIE)3. 过敏原皮肤试验呈阳性慢性浅表性胃炎(chronic surface 血及胃液中胃壁细胞抗体(PCA)gastritis, CSG) (23.6%67.5%(+)慢性萎缩性胃炎内因子抗体(IFA)(53%(+)(chronic atrophic gastritis, CAG)溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)血清ANCA(+)(UC可达48%88%),克罗恩病(Crohn disease)Crohn病为7%25%),3.常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标,自身免疫性肝炎1. 血清ANA(74%(+)，SMA（86% 91% (autoimmune (+)），肝肾微粒体(LRM)-1抗体(+)，Ig hepatitis) 2. 抗细胞色素P450D6抗体(+)IgA肾病1. 血清IgA-FN聚合物，IgA，IgA(IgA nephropathy)型RF(30%以上(+) )，IgA-CIC (33%(+)2. 肾活检组织冰冻切片有IgA沉积3. 尿Tamm-Horsfall(TH)蛋白包裹红细胞60%新月体性肾小球肾炎1. 血清抗肾小球基底膜(GBM)抗体(+)，(crecentic glomeru-ANCA(+)，CIClonephritis)2. 肾活检显示新月体内有大量纤维蛋白沉积,3.常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标,膜性增生性肾小球肾炎1. 血清CIC，CH50, C3, C1q ，(membranopnoliferativeC4Glomerulonephritis, MPGN）2. 尿液免疫复合物(UIC)3. 肾活检显示肾小囊腔和肾小管基底膜有C3沉积肾小管间质性肾炎1. 血清抗肾小管基底膜(TBM)抗体(+)，(tubwlointerstitial抗TH抗体(+)，抗集合管抗体(+)nephritis, TIN) 2. 尿TH蛋白1. 血NK细胞活力,CD3+ 、CD4+ 、心肌炎(myocarditis) CD8+，C3 ，T细胞转化率2. 血清ANA(+)、抗心肌抗体(+)、RF(+)心肌病(myocardial diseases)血清抗ADP/ATP载体(ANT)抗体(+)急性炎性脱髓鞘性多发性神经病 (acute inflammatory demyelinatingCSF中抗病原体抗体(+)，糖脂抗体(+), 硫Polyneuropathy, AIDP or Guillain-脂抗体(+)，蛋白，细胞数正常。Barre syndrome, GBS),3.常见的器官特异性自身免疫病及异常免疫指标,重症肌无力血清抗AchR抗体(+)，抗横纹-银环蛇(myasthenia gravis, MG)毒、川楝毒、-蝮毒素抗体(+)，IL-2, C3全植物神经功能不全血清抗交感神经组织抗体(+)(pandysautonomia)毒性弥漫性甲状腺肿血清甲状腺球蛋白抗体(TGA)(30%(+) )(Graves disease)甲状腺微粒体抗体 (TMA)(1:80，d1:160，或1周后抗体有4倍增高，可诊断为伤寒感染。若O121:80，a/b/c1:80，或1周后抗体有4倍增高，可诊断甲/乙/丙型副伤寒感染。Vi抗原有阳性反应，提示病人为伤寒带菌者。若O12 对照血清查30%为阳性,3、HLAA、B、C、PK、PQ抗原分型,被检淋巴细胞 +