尿干化学分析.ppt

尿十项干化学检测参数临床应用执信医疗学术应用首席专家李怀龙 简述尿液检验基础知识 参数名称 检测原理与临床应用 1 简述尿液检验基础知识 2 尿液生成 尿是在肾脏内形成的 当体内血液经肾小球毛细血管时 其中的细胞 大分子蛋白质和脂类等胶体被截留 其余成分则经半透膜滤过 经过肾小球囊 此称为原尿 原尿通过肾小管时 绝大部分水分 电解质和葡萄糖等物质又重新被吸收回血 同时 肾小管也分泌一些物质加入尿中 最后生成终尿 经由输尿管 膀胱和尿道排出体外 3 尿的主要成分 尿液含水分约96 98 固体物3 4 正常人每天由尿中排出总固体物约60g 其中无机盐约25g 有机物约35g 无机盐中约一半是钠和氯离子 有机物中主要是尿素 每天可排出约30g 其次是少量糖类 蛋白质 包括酶 蛋白质性激素和抗体 以及种类繁多的代谢物 4 尿的透明度 正常新鲜尿通常是透明的 但久置后会因盐类析出或生长细菌而显浑浊 尿中含有大量的细胞 管型或乳糜 亦可出现浑浊 新鲜的碱性尿也因有非晶型磷酸盐析出而呈现浑浊 5 尿的颜色 正常尿为淡黄色 色泽的深浅常随饮水量 运动 出汗等不同情况而变化 乳白色 见于乳糜尿但亦见于含大量脓细胞 非晶形磷酸盐或非晶形尿酸盐的尿 深黄色 振摇后有不易消失的泡沫 多见于胆红素尿 红色而又浑浊 常见于血尿 酱油色 多见于血红蛋白尿 6 尿的酸碱性 正常尿多呈弱酸性 PH在6 0左右 但PH在4 6 8 6亦属正常 饮食对尿的酸碱度有一定的影响 如多食蛋白质 可使尿酸度增加 多食蔬菜 水果以及饭后不久排出尿可呈碱性 留置过久又未加防腐剂的尿 因细菌繁殖 分解尿素产生氨 因而呈碱性 服用酸性或碱性药物 亦可影响尿的酸碱度 7 尿量与比重 正常成人每昼夜尿量在1000 1500毫升之间 尿比重 是指在4 条件下尿液与同体积纯水的重量之比 取决于尿中溶解物质的浓度 与固体总量成正比 常用来衡量肾脏浓缩稀释功能 饮水量 运动 出汗和气候等对尿量有相当大的影响 尿量的多寡直接影响尿的比重 正常参考值 1 003 1 030 晨尿常1 020左右 健康人24小时尿比重在1 015 1 025之间 比重高低与进水量有关 进水多则尿比重低 健康人禁水一夜后第一次晨尿比重应大于或等于1 020 少尿时尿比重低于1 014说明肾浓缩功能丧失可能是肾功能衰竭 8 尿标本的采集与保存 嘱患者留取清晨第一或第二次清洁中段尿 一般定性试验可采集清晨尿 清晨尿较浓缩 细胞和管型等病理物的检验出现机会较多 但对其它代谢物的检查 以采取饭后3小时左右的尿液较好 如作定量检查 则应收集24小时 或12小时 均需加防腐剂 尿 标本采集后均应立即送检 标本如不能及时检验 应将样品放2 8度冰箱保存 但时间不能超过2小时 9 参数名称 检测原理与临床应用 10 参数名称 白细胞LEU酮体KET红细胞ERY亚硝酸盐NIT比重SG尿胆原UBG酸碱度pH胆红素BIL蛋白PRO尿糖GLU 11 12 对白蛋白敏感 既要发展现代技术 也要继承经典方法中华检验医学杂志 2005 丛玉隆秦小玲中华检验分会提出的标准化建议指出 尿液干化学 简称尿10项检查 中红细胞 白细胞结果不能作为疾病诊断的依据 只能作为 镜检 筛选标准 尿十项干化学检测原理及影响因素 尿液PH检测的临床意义 参考值范围 4 6 8 6测试原理 PH试纸含有指示剂甲基红和臭麝香草酚 两种酸碱指示剂适量配合可反映尿PH4 5 9 0的变异范围 强酸性尿 代谢性酸中毒 痛风 肾结石 糖尿病 IV型肾小管酸中毒 白血病等 碱性尿 原发性醛固酮增多症 泌尿系变形杆菌感染时等 13 尿液PH检测的临床意义 观察尿酸碱度的变化 可指导临床用药 预防肾结石形成和复发及减轻泌尿系微生物感染 酸性尿易形成尿酸和胱氨酸结石 解决办法 给药使尿液PH值保持碱性或至少在PH6 5以上 就不会形成酸性结石 碱性尿易形成碱性结石 解决办法 给药使尿液PH值保持酸性 就不会形成碱性结石 注意事项 标本放置时间过长容易被菌污染而使PH偏高 试剂带浸尿时间过长PH偏低 试条浸尿样过量也会影响结果检测 14 尿比重 SG 测定的临床意义 正常参考值范围 成人 1 015 1 025晨尿大于1 020 新生儿 1 002 1 004 测试原理 试纸测试区域含有一种离子交换剂和指示剂 在尿液阳离子存在时 能释放出H 质子 指示剂溴麝香草酚蓝产生从蓝色经蓝绿到黄色的变化 增高 表示尿液浓缩 见于急性肾炎 蛋白尿 糖尿病 高热 大量出汗 脱水 出血热少尿期等 15 尿比重 SG 测定的临床意义 减低 表示肾脏浓缩机能减退 见于尿崩症 慢性肾炎 精神性多饮多尿症 原发性醛固酮增多症 出血热多尿期及恢复期 尿比重比较固定 一般固定在1 010左右 呈等张性 表示肾实质有严重损害 用尿比重与尿量的动态变化来监测肾结石病人的尿物理变化 可用于指导病人饮食习惯 预防病人结石的再次形成 比重可作为鉴别糖尿病与尿崩症的参考 前者尿量多 比重高 后者尿量多 比重低 注意事项 高尿钙 酮酸中毒和尿蛋白在100 500mg dl之间 使比重偏高 PH偏碱时 结果偏低 16 尿蛋白 PRO 测定的临床意义 参考值范围 阴性测试原理 试纸测试区含有缓冲液和指示剂四溴溴酚磺酞 当PH恒定 有蛋白质存在时 指示剂黄 浅绿 再到绿色 生理性或无症状蛋白尿 指泌尿系统并无器质性病变 而是由体内诸多因素所致尿蛋白含量增多 可分功能性和体位性 直立性 蛋白尿 1 功能性 由诸多因素使肾血管痉挛或充血 导致肾小球毛细血管壁的通透性增加 如运动 发热 低温刺激等 一旦诱发因素消失尿蛋白也迅速消失 一般蛋白不超过 2 体位性 其机理可能是与直立时前突的脊柱压迫肾静脉或直立时由于肾向下移 肾静脉被扭曲 而使肾脏处于暂时淤血状态 与淋巴血流受阻有关 蛋白可达 17 尿蛋白 PRO 测定的临床意义 病理性蛋白尿 是指泌尿系统因器质性病变 尿内持续出现蛋白而言 通常可归纳为以下5种 肾小球性 是由于肾小球滤过膜受损而使通透性增加 滤出较多的血浆蛋白 超过了肾小管重吸收能力而以白蛋白为主的尿蛋白 肾小管性 是由于炎症或中毒引起近曲小管对低分子量蛋白质的重吸收障碍而致的以低分子量蛋白质为主的蛋白尿 主要以 2微球蛋白和溶菌酶为准 白蛋白正常或轻度增多 混合性 肾病同时累及肾小球和肾小管而产生的蛋白尿 白蛋白和 2微球蛋白同时增多 18 尿蛋白 PRO 测定的临床意义 4 溢出性 肾小球滤过及肾小管吸收功能均正常而益出到尿中 游离血红蛋白 肌红蛋白 或本周氏蛋白过多 5 组织性 肾小管代谢产生的和肾组织破坏分解的蛋白质 以及炎症或药物刺激泌尿系统分泌的蛋白 主要为糖蛋白 假阳性 输入聚乙烯吡咯烷酮 污染洗必太类消毒剂 注意事项 尿液过酸 过碱超过试条本身缓冲能力时 结果呈现假阳性 药物如尿液含有一定浓度的青霉素 先锋霉素 喹啉 氯喹等药物时 尿蛋白结果偏低甚至出现假阴性 19 尿糖 GLU 测定的临床意义 参考值范围 阴性测试原理 利用葡萄糖氧化酶 过氧化氢酶反应来检测葡萄糖 D 葡萄糖被氧化成 D 葡萄糖酸内酯 当过氧化物酶存在时 产生过氧化氢将指示剂氧化成绿色 生理性糖尿 为一过性糖尿 是暂时的 排除生理因素后恢复正常 可分为 饮食性 短时间内食用大量糖所致 但健康人很快恢复正常 应激性 一过性 原因是颅脑外伤 脑血管意外 情绪激动等情况下 机制 延脑血糖中枢受刺激 导致肾上腺素 胰高血糖素大量释放 因而可出现暂时性高血糖和尿糖 妊娠性 以妊娠中末期多见 由于肾小球滤过增加 肾小管的重吸收相对减少所致 20 尿糖 GLU 测定的临床意义 病理性糖尿 真性糖尿 胰岛素绝对或相对不足 血糖浓度超过肾糖阈值而从尿中排出所致 肾性糖尿 肾小管对葡萄糖的重吸收功能减退 肾糖阈降低而引起的糖尿 甲亢引起的糖尿 甲状腺素分泌过多 使消化道肠壁的血流加速和糖的吸收加快 因而 在饭后血糖升高 出现尿糖 肢端肥大症引起的糖尿 可因生长激素分泌旺盛而致血糖升高 出现尿糖 21 尿糖 GLU 测定的临床意义 病理性糖尿 5 嗜铬细胞瘤引起的糖尿 可因肾上腺素和去甲肾上腺素大量分泌 致使磷酸化酶活性增强 使肝糖原降解为葡萄糖引起血糖升高 出现尿糖 6 库兴氏综合症引起的糖尿 可因皮质醇分泌过多 使糖原异生旺盛 抑制己糖激酶和对胰岛素的作用 因而出现糖尿 7 肝功能障碍时 血糖升高也可见糖尿 注意事项 过氧化物 强氧化剂可致尿糖阳性 尿中含有一定量VC可致尿糖结果假阴性 22 尿酮体 KET 测定的临床意义 参考值范围 阴性测试原理 乙酰乙酸和丙酮在碱性介质中与硝普钠和甘氨酸反应产生一种紫色复合体 酮体概念 乙酰乙酸 丙酮和 羟丁酸统称酮体 酮体是脂肪分解代谢过程中的产物 脂肪酸经一系列 氧化产生乙酰辅酶A 在肝脏内乙酰辅酶A可缩合成乙酰乙酸 后者可被还原成 羟丁酸或脱羧后形成丙酮 糖尿病酮症酸中毒 由于体内糖的利用减少 脂肪分解代谢增多 已超过肝外组织的利用速度 血酮与尿酮都高 23 尿酮体 KET 测定的临床意义 非糖尿病性酮症 如感染性疾病 肺炎 伤寒 败血症 结核等发热期 严重呕吐 腹泻 长期饥饿 禁食 儿童周期性呕吐 蛋白质摄入多限制碳水化合物饮食减重者 全身麻醉后等 可发生酮症而致酮尿 注意事项 试条对酮体测定成分不同 结果存在一定差异 试条尿液被细菌污染 酮体消失 特别注意的是 糖尿病酮症酸中毒早期 酮体的主要成分是 羟丁酸 乙酰乙酸很少或缺乏 结果偏低或阴性 当症状缓解之后 乙酰乙酸含量反而比急性期初始含量高 因此必须注意病程发展 同时与临床医师联系共同分析实验结果 24 尿胆红素 BIL 尿胆原 UBG 的意义 参考值范围 BIL 阴性 UBG 弱阳性 BIL测试原理 BIL在试纸酸性环境中与一种稳定的2 6 2氯苯 重氯佛硼酸偶联 形成红 紫色叠氮染料 UBG测试原理 UBG在试纸酸性环境中与一种稳定的重氮盐反应形成红色的叠氮染料 肝前性黄疸 溶血性黄疸 如败血症 蚕豆病 疟疾 异型输血等使红细胞大量破坏 血红蛋白释出过多所致 表现UBG明显或显著增高 肝源性黄疸 肝细胞性黄疸 是指感染肝炎病毒 中毒及肝硬化等肝病时 BIL和UBG同时增高 25 尿胆红素 BIL 尿胆原 UBG 的意义 肝后黄疸 阻塞性黄疸 由于结石 肿瘤或先天性胆道闭锁等原因造成总胆管阻塞所致 BIL阳性 UBG阴性或正常 注意事项 标本新鲜并避免阳光直射造成胆红素氧化为胆绿素 尿胆原氧化成尿胆素 维生素C和亚硝酸盐可致胆红素假阴性 阻塞性黄疸尿胆原减少的病人 不能使用干化学方法进行测定 因为大多数试条都没有设置尿胆原阴性这一项 26 尿亚硝酸盐 NIT 测定的临床意义 参考值范围 阴性测试原理 测试区中的磺胺与亚硝酸盐在酸性介质中反应生成重氮化合物 再与3 羟 1 2 3 4 四氢 7 8 苯醌碱偶联成一种红色偶氮染料 尿路感染常见致病菌为 大肠埃希菌属 克雷伯菌 假单胞菌 变形杆菌 葡萄球菌 粪链球菌等 27 尿亚硝酸盐 NIT 测定的临床意义 亚硝酸盐阳性时必须同时具备以下三个条件 感染的细菌含有硝酸盐还原酶 所用食物中含有适量的硝酸盐 尿液在膀胱中停留间隔4小时以上 并除外药物干扰因素 药物影响 假阴性 利尿剂 使用抗生素 维生素C可使结果假阴性 使用硝基呋喃可降低亚硝酸盐反应的灵敏度使结果偏低或假阴 假阳性 非那吡啶或标本污染可引起假阳性 28 定量细菌培养尿液样本127例UF散点图结果分析1 散点图X轴在30度以下 75例样本中有71例 检测出杆菌的样本符合率为94 7 2 散点图X轴在30度以上 52例样本中有43例样本 检测出球菌的样本符合率为82 7 29 患者尿液标本经细菌培养分离的菌种在UF 1000i细菌通道检测绘制的散点图 粪肠杆菌 克氏柠檬酸杆菌 粪产碱菌 粪肠杆菌 产酸克雷伯氏菌 30 女性77岁 急性肾盂肾炎引起的败血症 尿液革兰氏染色为阴性杆菌 血 尿液培养 分离得到大肠杆菌 尿常规检验 UF散点显示杆菌图形 31 海淀医院门诊 32 协和医院门诊 33 男性82岁脑梗塞合并尿路感染 尿液革兰氏染色为革兰氏阳性球菌 细菌培养 分离为金黄色葡萄球菌 尿常规检验 UF散点显示球菌图形 34 中日医院 35 36 原理 中性粒细胞特异性酯酶 假阳性 高胆红素尿或某些药物如呋喃坦啶 假阴性 中性粒细胞较少 慢性炎症 间质性肾炎 过敏性或变态反应引起的泌尿系炎症 肾移植术后出现排斥反应时 中性粒细胞较多 患者输入先锋 庆大等抗生素后或尿液中蛋白 5g L 尿糖 20g L时 尿液标本放置时间过长 酯酶失活时 尿十项干化学白细胞检测原理及影响因素 尿液中白细胞的试纸条检测及其影响因素探讨 临床检验杂志1989 7丛玉隆等 37 38 39 40 41 女性41岁发热 尿急 背部下方疼痛 临床表现 病人出现血尿到我院就诊 检验 红细胞直方图呈均一性红细胞 白细胞计数增高 直方图提示为急性尿路感染 中性粒细胞占绝对优势 而尿十项干化学中性粒细胞酯酶却显示阴性 尿培养为大肠埃希菌阳性 临床诊断 膀胱炎 尿干化学检查酸碱度6 5比重1 022蛋白质 葡萄糖 隐血 酮体 白细胞 亚硝酸盐 42 43 44 急性泌尿系感染直方图 慢性泌尿系感染直方图 确定泌尿系感染类型 分类线 分类线 45 急性泌尿系感染白细胞直方图 46 协和医院门诊 47 协和医院门诊 48 原理 过氧化物酶样活性物质 假阳性 对热不稳定酶 肌红蛋白 心肌 骨骼肌损伤 菌尿 部分杆菌 球菌及真菌或某些氧化性污染物等 例 丛玉隆等对690例尿液进行分析 其中113例干化学潜血阳性 镜检阴性 进一步用金标法Hb单克隆抗体检测也为阴性 但将尿液加热煮沸后再进行干化学检查 结果阴性 说明假阳性是由于尿中存在的不耐热的过氧化物酶所致 假阴性 维生素C 头孢抗生素 蛋白浓度5g L以上 尿硝酸盐10mg dI以上都可使尿隐血敏感性减弱 甚至假阴性 尿十项干化学红细胞检测原理及影响因素 49 显微镜 RBC 0 2 高倍视野 红细胞单克隆抗体 阴性 干化学红细胞假阳性 50 病人用VC4g 抑制隐血化学反应 致使其造成假阴性 20 25 HP 干化学红细胞假阴性 51 红细胞假阴性 52 Dysmorphic 非均一性 Isomorphic 均一性红细胞直方图 确定血尿来源 70 红细胞平均体积 非均一性红细胞 均一性红细胞 Mixed 混合型红细胞 53 1 25例肾小球疾病患者中 22例经流式尿沉渣自动分析仪检测诊断为畸形红细胞尿 诊断符合率为88 另外3例轻度系膜增殖性肾炎患者有2例仪器报有病理管型 故流式尿沉渣自动分析仪总的诊断符合率为96 2 25例患者的同一标本经相差显微镜检测诊断为畸形性红细胞尿有19例 混合性3例 均一性3例 其中1例混合性血尿患者检出颗粒管型提示肾小球性血尿 故相差显微镜总的诊断符合率为80 流式尿沉渣自动分析仪检测肾小球性血尿的鉴别诊断意义 作者 张颖等解放军总医院肾科 肾病中心ChinJInternMed May1997 Vol36 No 5中华内科杂志 54 流式尿有形成分分析仪UF 1000i联合相差显微镜在血尿来源诊断中的应用评价作者 齐杰陈倩云韩江张婷菊程实董全马蕊刘贵建中国中西医结合肾病杂志2009年11月第10卷第11期方法 选取33例肾小球性血尿 23例非肾小球性血尿 结果 对于血尿来源的鉴别 UF 1000i检查的敏感度100 特异度82 6 相差显微镜检查的敏感度93 9 特异度91 3 结论 联合UF一1000i流式尿有形成分分析仪 尿干化学分析仪及相差显微镜是鉴别血尿来源的最好策略 55 70 红细胞平均体积64 5ch Isomorp