火腿肠中亚硝酸盐的测定1

食品中亚硝酸盐的测定 盐酸萘乙二胺分光光度法 食品中亚硝酸盐的测定 盐酸萘乙二胺分光光度法 一 实验目的一 实验目的 1 明确亚硝酸盐在食品中的作用以及限量标准 2 掌握盐酸萘乙二胺法测定食品中亚硝酸盐的原理 操作步骤 注意事项 二 实验原理二 实验原理 样品经沉淀蛋白质 除去脂肪后 在弱酸条件下硝酸盐与对氨基苯 磺酸重氮化后 再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色的染料 与标准系列 比较定量 三 仪器三 仪器 1 722 分光光度计若干 提前 20min 打开预热 2 组织绞碎机 菜刀 砧板1 2 套 3 50mL 烧杯 500mL 烧杯 3L 大烧杯 2 个 组 1 个 组 2 个 4 电炉2 个 5 托盘天平1 个 组 6 200mL 容量瓶 500mL 容量瓶 1 个 1 个 组 7 恒温水浴锅1 2 个 8 25mL 具塞比色管 10 个 组 9 滴管 漏斗 滤纸 吸小球 1 个 组 10 玻璃棒 温度计 标记笔 标签纸若干 四 试剂 所用试剂 除另有规定外 均为分析纯试剂 四 试剂 所用试剂 除另有规定外 均为分析纯试剂 1 亚铁氰化钾溶液 称取 106 0g 亚铁氰化钾 K4Fe6 CN 3H2O 用水溶解后 稀释至 1000mL 分装 1 瓶 大 组 2 乙酸锌溶液 称取 22 0g 乙酸锌 Zn CH3C00 2 2H20 加 3 mL 冰乙酸溶于水 并稀释至 100mL 分装 1 瓶 大 组 3 饱和硼砂溶液 称取 5 0g 硼酸钠 Na2B07 10H20 溶于 100 mL 热水中 冷却后备用 分装 1 瓶 大 组 4 对氨基苯磺酸溶液 4g L 称取 0 4 g 对氨基苯磺 酸 溶于 100 mL 20 的盐酸中 置棕色瓶中混匀 避光保存 分装 1 瓶 大 组 5 盐酸萘乙二胺溶液 2g L 称取 0 2 克盐酸萘乙 二胺 溶于 100 毫升水中 避光保存 有致癌作用 分装 1 瓶 大 组 6 亚硝酸钠标准溶液 0 2g L 精密称取 0 1000g 于硅胶干燥器中干燥 24h 的亚硝酸钠 加水溶解移入 500ml 容量瓶中 并稀释至刻度 此溶液每 ml 相当 于 200 g 亚硝酸钠 分装 1 瓶 大 组 7 亚硝酸钠标准使用液 0 2 g mL 临用前 吸 取亚硝酸钠标准溶液 5 00 毫升 置于 200 毫升容量瓶 中 加水稀释至刻度 此溶液每毫升相当于 5 微克亚 硝酸钠 分装 1 瓶 大 组 8 蒸馏水1 瓶 组 五 实验步骤五 实验步骤 1 样品的处理 样品的处理 1 取样 取适量的火腿肠 放入搅碎机内搅碎 准确称取5 0克经 绞碎 混匀的样品 置于50毫升烧杯中 2 沉淀蛋白质 加12 5mL硼砂饱和溶液 搅拌均匀 以70 左右的水约300mL 将样品洗入500mL容量瓶中 置沸水浴中加热15min 取出后冷却至室 温 一面转动一面加入5毫升亚铁氰化钾溶液 摇匀 再加入5mL乙 酸锌溶液 以沉淀蛋白质 3 过滤 加水定容 放置0 5h 除去上层脂肪 清液用滤纸过滤 弃去初滤液30mL 滤液备用 2 标准曲线的绘制标准曲线的绘制 精密吸取0 00 0 20 0 40 0 60 0 80 1 00 1 50 2 00 2 50mL亚硝酸钠 标准使用液 相当于0 1 2 3 5 7 10 12 5 g亚硝酸钠 分别置于 50mL比色管中 各加2mL对氨基苯磺酸溶液 4g L 混匀 静置3 5min后 各加入1mL 0 2 盐酸萘乙二胺溶液 加水至刻度 混匀 静置15min 以零管调节零点 于波长538nm处测吸光度A 绘制标准曲线 3 试样的侧定试样的侧定 上层脂肪上层脂肪 用滴管吸用滴管吸 除 除 精密吸取按40 0mL样液于50mL比色管中 以下按标准曲线测定方法 依次加入其它试剂 加水稀释至刻度 混匀 静置15min 以零管调节零 点 于波长538nm处测吸光度A 同时做试剂空白 六 数据记录六 数据记录 管号012345678样液 A538 七 数据处理七 数据处理 按下式计算 A X 1000 v1 m 1000 V2 式 中 X 试样中亚硝酸盐的含量 mg kg V1 测定时所取溶液体积 mL V2 试样处理液总体积 mL m 试样质量 g A 试样测定液中亚硝酸盐的质量 g 部部分分食食品品中中亚亚硝硝酸酸盐盐的的限限量量标标准准 以以NaNO2计计 品 名 限量标准 mg kg 食盐 精盐 牛乳粉 2 香肠 腊肠 香肚 酱腌菜 广式腊 肉 20 鲜肉类 鲜鱼类 粮食 3 肉制品 火腿