肝纤维化的研究进展.ppt

肝纤维化的研究进展 温州医学院附属第一医院陈永平 Generalprinciples 肝纤维化HepaticFibrosis肝组织内细胞外基质 extracellularmatrix ECM 因合成增加 降解相对不足而在肝内异常沉积所导致肝脏结构和 或 功能发生异常改变的一种病理变化 以ECM在肝脏内沉积为特征是几乎所有原因所导致的慢性肝脏损伤的一种 创伤愈合 的慢性渐进的病理过程 急性肝损伤 炎症反应 有限的ECM沉积 肝实质细胞再生取代坏死或凋亡的细胞 慢性肝病 持续或反复的炎症坏死 ECM大量增生 降解活性相对或绝对不足 肝纤维化形成 肝小叶结构改建 假小叶和结节形成 肝硬化 肝纤维化是可逆的 谁将阻止或延缓肝纤维化的发生 谁就将治愈大多数慢性肝病 世界著名肝病权威HansPopper教授 肝星状细胞 HSC 的活化上皮 间充质细胞转化 epithelial mesenchymaltransition EMT 细胞外基质 ECM 的合成与降解失衡相关的细胞因子及信号传导通路 Cellularandmolecularmechanisms肝纤维化发生的基本机制 HSC的活化 HSC ScottL friedman HepaticStellateCells Protean Multifunctional andEnigmaticCellsoftheLiver PhysialRev88 125 172 2008 HSC活化 MFB ECM生成过量 型胶原沉积 形成纤维间隔 肝小叶结构破坏 型胶原酶大量合成释放 肝窦功能性基底膜的结构破坏 肝窦毛细血管化 肝纤维化 OlavAGressneretal Evolvingconceptsofliverfibrogensisprovidenewdiagnosticandtherapeuticoptions ComparativeHepatology2007 6 7 MFB是一种多起源的异质性细胞 呈梭形 特征介于成纤维细胞和平滑肌细胞之间表达平滑肌肌动蛋白 SMA 其胞质内有大量平行的肌丝而具有收缩和迁移的能力是组织纤维化过程中产生过量ECM的主要来源细胞 肌成纤维细胞 MFB 上皮 间充质细胞转化 epithelial mesenchymaltransition EMT 纤维增生ECM合成增加 净效应 动态过程纤维分解ECM的降解 ECM的变化 肝纤维化的发生 发展和转归 参与肝纤维化的关键细胞因子及其信号传导途径 候选基因 2003年Bataller等 肝纤维化动物模型促进肝纤维化者 瘦素及其受体 Smad3 TIMP 1 IGF 1 Fas 抑制作用者 纤溶酶原 端粒酶 IFN IL 10 诱导性NO合酶 作用不确定或未知者 TNF IL 6 IL 13 候选基因 人类肝纤维化 促肝纤维化形成的基因IL 10 IL 1 IL 1受体 TNF MnSOD 免疫应答相关因子 CTL 4 TADP2 CD14 脂多糖受体 酒精性肝病TGF 1 血管紧张素源 TNF 微粒体环氧化物水解酶 血色素沉着病基因 ApoE 丙型肝炎肝纤维化 型胶原 IGFBP 7 Lumican MMP 7 SPARC 胆道闭锁性 BA 肝病抑制肝纤维化形成的基因Cingulin和MMP 2 胆道闭锁性 BA 肝病 宿主遗传因素影响肝纤维化发生 单核苷酸基因多态性 SNP 对肝纤维化的影响 干扰素信号转导通路上的基因多态性影响干扰素应答效果Th1及Th2类细胞因子基因多态性影响机体对病毒清除的免疫反应Toll样受体 4 DDX5 TGF 1 TIMP 1 MMP等参与纤维化发生的重要因子 其基因多态性可能影响纤维化反应多个SNP标志物可建立纤维化危险积分 可用于慢性丙型肝炎患者肝硬化发生危险的预测 参与肝纤维化的信号转导通路 TGF Smad信号通路Rho ROCK信号通路PI 3K信号通路ERK MAPK信号通路 Ras ERK信号通路JAK sTAT信号通路Wnt信号通路NF B信号通路 TGF BMP信号传导通路与其它信号通路的Cross talkXingGuo Xiao FanWang Signalingcross talkbetweenTGF BMPandotherpathways CellResearch 2009 19 71 88 小结 肝纤维化的治疗 控制原发病因 治疗原发疾病阻断HSC活化抑制减少HSC增殖 分化促进HSC凋亡促进疤痕纤维的降解中医药治疗肝纤维化 针对病因治疗 阻断HSC活化 减轻炎症损伤 28 J Poniachiletal J Lzb Clin Med 1999 133 342 8 易善复 抑制肝星形细胞的增殖 29 Lieber C S etal Gastroenterology1994 106 152 9 酒精 正常饮食喂养7年的狒狒中酒精性肝损伤的发展过程 30 酒精 易善复 饮食喂养的狒狒中酒精性肝损伤的发展过程 Lieber C S etal Gastroenterology1994 106 152 9 我们曾经所做的工作 1 和加拿大美尼托巴大学的各位同仁应用大鼠HSC研究了Smad1基因的表达和调控情况 发现Smad1的表达和磷酸化是通过BMP受体调控的 并在HSC活化时增加 并且TGF 呈时间和剂量依赖性的显著的抑制了HSC中Smad1的表达 此外虽然TGF 1和BMP2都可以激活HSC 却对HSC的增殖影响的效应却不一样 HongShen YongpingChen YuewenGongetcal Transforminggrowthfactor 1downregulationofSmad1geneexpressioninrathepaticstellatecells AmJPhysiolGastrointestLiverPhysiol285 539 546 2003 我们曾经所做的工作 2 成功构建将TGF 1抗原表位基因与HBcAg编码基因融合 并经原核表达 制备成融合蛋白的重组疫苗 经动物实验证明可诱导肝纤维化大鼠产生抗TGF 1抗体 TGF 1mRNA表达水平明显下降 TIMP 2的表达显著下降 肝组织纤维化分级明显改善 陈永平 巩跃文等 转化生长因子 1与乙型肝炎病毒核心抗原融合基因的表达和鉴定 ChinJInfectDis October2005 Vol23 No5 卢明芹 陈永平等 转化生长因子 1疫苗对肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶 2及基质金属蛋白酶组织抑制因子 2表达的影响 ChinJHepatol September2006 Vol14 NO 9 我们正在做的工作 1 CD4 CD25 调节性T细胞在肝纤维化免疫发病机制中的作用的研究 2 BMP7在肝纤维化中的作用的研究 A B HSC与CD4 CD25 Treg共培养 a 96孔板直接接触性共培养A HSCB CD4 CD25 treg b Transwell培养小室非直接接触性共培养 生长在膜上的HSC c Transwell培养小室非直接接触性共培养 培养在膜下层的CD4 CD25 treg A B UNPUBLISEDDATE CCK 8法测定不同比例CD4 CD25 Treg与HSC混合之HSC生长增殖曲线 400bp 500bp BMP7417bp actin 452bp 500bp 400bp BMP7mRNA在大鼠肝纤维化模型中的动态变化 1 2 3 4 5 6 7 M 注 模型组各时间点与对照组比较 aP0 05图对照组与模型组各时间点BMP7mRNA水平变化 a b b b a a 肝纤维化是机体对慢性损伤的主动性修复反应 以肝脏ECM增生与沉积为特征 只有慢性