拟人参皂苷F11在大鼠体内的药物代谢研究

拟人参皂苷 在大鼠体内的药物代谢研究 王金辉 李铣 沈阳药科大学天然药物研究室 辽宁 沈阳 摘要 目的探讨拟人参皂苷 在大鼠体内的药物代谢产物及其过程 方法 3 3 A 6 0 89 0 0 0 B 6 C 4 3 3 A 6 0 9 9 9 0 D 0 9 9 0 E 大鼠 由本校动物 室提供 合格证号 辽实合字 I号 拟人参皂苷 样品 自制 来源于西洋参茎叶 并经理化常数和 波谱分析 R S T 鉴定 仪器日本2 4 3 U 0 型显微熔点测定仪 未校正 R S用 D V CR S 0 9 7 紫外0可见分光 光度计测定 甲醇为溶剂 T 用W C M E T 0 型 红外分光光度计测定 X W 压片 用W C M E K Y 0 型核磁共振光谱仪测定 Z 溶剂 谱以吡啶 J J 谱以吡啶 H I 定标 P T 0 用美国 B 公司 G型液相 色谱0质谱联用仪 G 9数据处理系统 采用正 H9 药学学报K 4 5 U 4 E C 5 4 4 9 7 7 9 H 8 万方数据 离子检测 离子源喷射电压 2 1 6 4 流动 相 A B C D A E C 9 4 A D C F F 上相 0 D 0 3 GA 6 C D A D C F F G 0 D 0 3 GA 6 C D G F H D I 0条件 固定相 D I 0H I A 7 1 6 4 流动相 6 C D A D C F 9 4 0 J A D C F K G 制备薄层条件 固定相 D I 0L 3 6 H I A 7 1 6 4 流动相 6 C D A D C F 实验方法 大鼠 2 L 拟人参皂苷7 5 5 M 体重 后 第 N N和 收集 尿液 样品经甲醇沉淀后供试 第 N N和 收集粪便 经甲醇提取 甲醇提取液作为样品供试 大鼠胆管插管手术后 2 L 拟人参皂苷7 5 5 M 体重 后 第 G 收集胆汁 胆汁经 O甲醇沉淀后供试 给与大鼠拟人参皂苷 7 5 5 M 体重 后 处死动物 取大鼠 胃 小肠和大肠 以甲醇 提取皂苷类成分供 试 以上 各部分样品 利用正反相 0 与标准品 拟人参皂苷7 H P 4 P 2 3 3 P 3 西洋参皂 苷 N等 对照 定性鉴定其中的皂苷类成分 收 集到的第G份粪便 N M 样品7 A G 经 O甲醇 沉淀后 利用制备薄层条件 分别从H Q值为 G 处 分离制备样品7 A G A 5 7 A G A G 5 7 A G A G G 5 并测定样品7 A G A 7 A G A 7 A G A G的J H数据 D J H G 0 J H D A D0 C 1 R 结果 拟人参皂苷 在人工胃液中的稳定性考察 在人工胃液 L D D 0 3水溶液 G K 孵化 按 取样 用J D 0 CG中和 分别以D I 0和H D I 0检测 发现拟人参皂 苷7 在人工胃液中相对稳定 不易发生水解反应 在孵化 后仍几乎检测不到的水解产物 孵化 后原型药物的含量也在N O以上 鉴于大鼠 给 药过程中 药物在大鼠胃内停留 左右 所以可认 为 给予拟人参皂苷7 后 其在胃内保持稳定 仍以原形形式经小肠吸收 拟人参皂苷 腹腔注射后在大鼠尿液和粪便中 的代谢产物 尿液中拟人参皂苷 的检出 腹腔注射拟人 参皂苷7 5 5 M 体重 后 按 N N 收集尿液 尿液经 O甲醇沉淀后 用正反 相 0与标准品 拟人参皂苷7 H P 4 P 2 3 3 P 3 西 洋参皂苷 N等 对照 从各时程排泄物中只检出拟 人参皂苷7 结果表明拟人参皂苷7 以原形形式 经尿液排泄 尿液中无任何水解代谢 氧化代谢产 物 粪便中拟人参皂苷 及其代谢产物的鉴定 腹腔注射拟人参皂苷7 5 5 M 体重 后 按 N N 收集粪便 甲醇常温过夜提取后 利用正反相 0与标准品对照 制备薄层分离 J H分析等手段鉴定出拟人参皂苷7 H P 4 P 2 3 3 P 3及 个未知代谢产物7 A G A 图 结果 表明 前N 拟人参皂苷7 主要以原形和少量水解 代谢产物形式 拟人参皂苷H 和P 4 P 2 3 3 P 3 经粪便 排泄 并且在给药NM 后发现 个微量的氧化 代谢产物7 A G A P QL 6 S P A 5 2 6 P 2 S 67 S2 6 T P 3 2 6 胆汁中拟人参皂苷 的检出 2 L 拟人参皂苷7 5 5 M 体重 后 按 G 收集胆汁 胆汁经 O甲醇沉淀后 利用正反 相 0与标准品 拟人参皂苷7 H P 4 P 2 3 3 P 3 西 洋参皂苷 N等 对照 鉴定出拟人参皂苷7 而未 检出任何水解代谢 氧化代谢产物 结果表明 拟人 参皂苷7 以原形经胆汁排泄 A B 4 反应均为阳性 O硫酸显 紫红色 表明其为三萜皂苷类化合物 E 1 U A 1给 药学学报9 4 I 4 6 2 4 1 2 2 4 G K M G 万方数据 出 9 多 个氧原子 5谱 2 2 2 9 5谱 1 91 1 给出 2 2 两个糖的端基碳信号 利用 A 9 I J 图 归属了各糖上的质子信号 并与 拟人参皂苷 的 5 A 9 I J谱 图 比 较 糖部分的信号基本一致 确定 A A 的糖链部 分没有发生代谢变化 K B A 9 I JL M A A K N91 1 2 2 L A B K N G P N L G K P K N 91 1 2 2 E L T S 4 A A L L R K 4 4 L 4型化合物的 9 5谱数据可知 位羟基的引入使 2位向高场位移 位碳信 号向低场位移 2 的 9 5谱 1 P 6 7 K N L M A A 综上分析 初步推定 的结构如图 所示的 A A A A吡喃鼠李糖基 0 A A A吡喃葡糖基A 2 A达玛A 2 A环氧A 药学学报 R 7V 6 7 E 8 7 P Q R K 7I K N K 7 2 2 0 万方数据 五 醇 0 4 A 8 B 8 C 2 3 5 I 4 I L 5 7 JKL I 4 F M N 5 G D E L I 6 F G H D 数据见表 经鉴定为拟人参皂苷 Q N 0 N 6 A 8 B 8 C 2 3 5 I I I 5 I 4 I 6 5 I I 4 4 I 5G D E L I 6 F G H D 谱 数据见表 经鉴定为拟人参皂苷E R 讨论 日本学者 L 在对原人参二醇型和原人参 三醇型皂苷在胃液和大肠液中的代谢研究中发现 在胃液中 原人参二醇型皂苷主要经水解代谢 最终 生成 4 吡喃葡萄糖基 原人参二醇 而原人参三醇 型皂苷主要代谢产物为 位糖链保持的次生苷 而 且 原人参三醇型皂苷的稳定性是原人参二醇型皂 苷的6倍 在大肠中原人参二醇型和原人参三醇 代谢的主要途径均为先水解末端糖 再水解内侧糖 先水解5位 或 位 糖链 再水解 4位糖链 拟人参皂苷Q 为原人参三醇型皂苷 人参皂 苷 E 1 的侧链双键氧化环合产物 推测其在胃液中 的反应性应与原人参三醇型皂苷相似 即保持 位 糖链 同时 由于侧链已经环合为稳定的四氢呋喃 环 推测在胃液中应不会发生代谢反应 实验结果亦 表明拟人参皂苷Q 在胃液中具有相当的稳定性 A 拟人参皂苷Q 后 在大鼠粪便中检测到大 量原形药物和多种水解代谢产物 但各种代谢产物 在尿液和胆汁中均未检出 推测拟人参皂苷Q 在体 内以原形经胆汁排泄后 在大肠中被肠道共生菌群 吸收 代谢生成各种水解代谢产物 鉴于尿液中各 时程均未检出各种水解代谢产物 证明各种水解产 物在大肠中不被重吸收 说明拟人参皂苷Q 以原 形发挥各种生理活性 5 N O O 4 O O L O L L O 5L O 5L O 6L O 5 L O 6L O 66 4 O 56 4 O 55 N O N 5 N O 46 4 O 4 O O N 4 O O 5 4 O L O L O LL 6 O L O L 6 O 6 L6 L O 66 L O 6 O N 6 O 6 O 4 6 O 46 O 5 N O N 6 O 4 56 O N 4 O 6 4 O 4 O 4 46 N O 6 6 N O L 45 N O 65 N O 55 N O 5 6 4 O 5 L5 N O 5 5 O 55 O 5 O 4 5 O 5 O 5 L O L 4 O L O 4 L O NL O 4 56 O 56 N O 6 O 6 O 6 46 O 6 O 4 L O O 4 O L O 5 O L5 O 5 O 4 5 O 5 O 5 O 6 O O 5 L O 6 5 O L6 N O 56 N O 6 N O 5 4 4 O 6 O L O L L O L O L 6 L O 6 L O L N L O 6 L O L O 6 L O 4 L L O 4 O L O 4 O O NL O O N O N O O N O N 5 O 5 O 5 O 5 O 4 45 O L 5 O O L O O L L O N 6 O O 6 O O O 5 L 4 O L 4 O 4L 4 O 5L 4 O 5 4 5 4 O L O O L O L O O L L O N O 4 L O 5 L O N L O 5 O 5 O N5 O 5 65 O 6 55 5 O 4 N O 6 O O 4 O L L O 5 4 O O O 4 O 4 O N 1 3 1 3 1 3 M 4 O N 4 O N L 4 O N ML N O 5 L O 6 L O 5 5 ML O 6 4 O 4 5L N O 5 6 ML O L O N 6L 5 O 4 ML O 6 L N O L O 5 M 5 O 4 5 5 O 5 O 4 M 4 O PL O 6L O 6 5 PL O 5 L O 6 PL 6 O 4 LL 6 O P N O 5 N O 6 P O 6 O L 因为在给药后的前N 9 4 A B 9 C 8 D 9 E C A 9 E D C B F G E B C8 C A B 8 D H 9 I C 9 B C 9 8 C C 9 J 7 G 9 I C 9 B C 9 A B D C B 9 8 G 3 1 9 8 5 9 A B 9 C C B F G E B C8 C A B 8 D H 9 I C 9 B C 9 8 C C 9 7 J O B G 9 C I C 9 B C 9 A B 8 C A D C E 3 O 8 8 E 8 C B H G 9 A B 9 I E 8 B E 8 H 8 E 9 I 0 1 2 K 9 0 T 3 9 8 4 8 C C 9 I 7 H H B G B A C C C 8 C 2 K 1 Y 8 E K 1 6 CK 1 V A 8 8 E 8 C B H G 9 A B I E E B 8 CE B A C 9 B C K 9 4 A B 9 C 8 D 9 E C B F G E B C 8 C A B 8 D H 9 I C 9 B C 9 8 C C 9 J G 9 I C 9 B C 9 A B D C 3 1 9 8 5 9 A B 9 C C B F G E B C8 C A B 8 D H 9 I C 9 B C 9 8 C C 9 7 7 C8 C A B F G E B C I C 9 B C 9 A B C 0 1 A E H 9 9 I C 9 B C 9 A B 9 C 8 E I G 8 H 8 9 E GI H A C E B A D AG E 8 E 8 K 8 9 3 9 1 9 6 XV K C 7 8 C 9 3 9 9 A B B 8 D H G 8 B A C 9 B C 9 A B I B E B 2 B B 8 D H B 9 B E B 9 H 8 B A 0 8 BI B G B 9 B A C 9 B C 9 A B G H H H 8 C A8C B G C A M M B E B 9 H 8 B A8 C A A B C I B AD B 8 C 9 I 0 B P A B C G B W 9 G C A I E C B B E B D H B C E E C B I B E 8 8 9 A B C