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1 专题高效升级卷十专题高效升级卷十 生物技术实践生物技术实践 1 2012 浙江嘉兴二模 观察下列实验操作的流程 回答相关问题 1 如果 A 是取自野生植株的植物组织 接种前需对其进行灭菌消毒 正确的方法是 A 高压蒸汽灭菌 70 酒精浸泡 5 次氯酸钠溶液浸泡 B 高压蒸汽灭菌 5 次氯酸钠溶液浸泡 70 酒精浸泡 C 5 次氯酸钠溶液浸泡 70 酒精浸泡 5 次氯酸钠溶液浸泡 D 70 酒精浸泡 5 次氯酸钠溶液浸泡 5 次氯酸钠溶液浸泡 2 如果 A 是大肠杆菌菌种 用于扩大培养接种 配制的培养基为 3 如果 A 是土壤稀释液 用于分离以尿素为氮源的微生物 则对照组配制的培养基 为 实验组配制的培养基使用的凝固剂是 含尿素的溶液可以用 过滤使之无菌 将 A 中的细菌分离 常用的方法是 接种以后 将培养皿倒置 在 37 恒温箱中培养后观察 用同浓度的土壤稀释液接种 实验组培养皿中的菌落数 对照组 能利用尿素的 细菌菌落周围有红色环带出现 其原因是 2 研究人员测试新抗生素对某种链球菌的杀菌效果 这种链球菌能引起人的咽喉感染 将此链球菌分别接种在三个培养皿中 在 2 号培养皿中放入一片浸过新型抗生素的圆片 3 号作为对照 三只培养皿如图 1 请对本实验做出假设 2 细菌喜荤 霉菌喜素 所以该细菌培养基一般用 来配制 制备培养 基的操作顺序是 用下列字母排序 a 倒置培养基 b 计算和称量 c 灭菌 d 调 pH e 溶解和熔化 3 为能彻底消灭培养基中的其他微生物 科学家研究出间隙灭菌法 其程序是 第 一天 将培养基在 100 下维持 30 min 然后在 35 37 下放置 24 h 第二天 第三天 重复第一天的操作 请分析 培养基在 100 下维持 30 min 的目的是 在 35 37 下放置 24 h 后再加热的目的是 怎样证明间隙灭菌法的效果 4 对照组培养皿 3 中的圆片应作怎样的处理 5 利用 法对培养皿 1 进行该链球菌接种 把聚集的菌种逐步分散到 培养基的表面 待长出菌落后 利用无菌绒布将培养皿 1 中的菌落转移到培养皿 2 和 3 中 转移过程要注意 6 三只培养皿都放在 37 的温度条件下培养 24 h 其中 1 号培养皿的变化结果如 图 在 2 号培养皿中画出假设的变化结果 3 1 在工业生产中 为了提高酶使用效率和产品的纯度 一般需要将酶进行固定化 处理 利用石英砂固定 淀粉酶的方法属于 A 吸附法 B 偶联法 C 交联法 D 包埋法 2 一定浓度的淀粉溶液流过 淀粉酶固化柱后 水解成 遇碘显 2 色 3 淀粉酶可以通过枯草杆菌发酵生产 以下是利用诱变育种方法培育获得产生较 多淀粉酶的菌株的主要实验步骤 原理 菌株生长过程可释放淀粉酶分解培养基中的淀粉 在菌落周围形成透明圈 第一步 将枯草杆菌株接种到 培养基上进行扩大培养 第二步 将枯草杆菌株分成两组 A 组用 处理 B 组不处理 作对照 第三步 制备多个含淀粉的固定培养基 第四步 将 A B 组分别稀释后 分别在含淀粉的固定培养基上利用 法分离 适宜条件下培养得到单菌落 第五步 观察 A B 组各菌落周围的 实验结果预期 根据诱发突变率低的特点 预期 根据诱发突变不定向性的特点 预期 4 根据材料回答下列有关问题 某大学科研人员利用双重固定法 即采用戊二醛作交联剂 使酶相互连接 海藻酸 钠来包埋小麦酯酶 研究固定化酶的性质 并对其最佳固定条件进行了探究 下图显示的是 部分研究结果 注 酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率 包括酶的活性和酶的数量 1 从图 1 可以看出 固定化小麦酯酶比游离的小麦酯酶对温度变化的适应性更 2 从图 2 可以看出 海藻酸钠浓度为 时的小麦酯酶活力最强 当海藻 酸钠浓度较低时 酶活力较低的原因是 某实验小组的同学制备固定化酵母细胞的过程如下 活化酵母细胞 称取定量干酵母与定量蒸馏水混合并搅拌 使酵母细胞活化 配制 CaCl2溶液 将无水 CaCl2溶解在定量蒸馏水中 配制成一定浓度的 CaCl2溶液 配制海藻酸钠溶液 用定量的海藻酸钠直接溶解在定量的蒸馏水或无菌水中 配制成 溶液 海藻酸钠溶液和酵母细胞混合 将活化的酵母细胞迅速加入刚配制成的海藻酸钠液中 充分搅拌混合均匀 固定化酵母细胞 用注射器以恒定的速度缓慢将海藻酸钠和酵母细胞混合液滴加到配 制好的 CaCl2溶液中 观察凝胶珠形成 1 请你改正其中两处错误的操作 第一处 第二处 2 刚形成的凝胶珠要在 CaCl2溶液中浸泡 30 min 左右 目的是 3 如果制作的凝胶珠颜色过浅 呈白色 则说明海藻酸钠浓度 过低 过高 5 2012 浙江部分重点中学 3 月联考 某兴趣小组就 泡菜腌制过程中亚硝酸盐含 量变化 开展了研究 操作如下 某年 1 月 4 日下午选取 1 2 3 号三只相同的泡菜坛 在 每个坛中加入洗净的新鲜莲花菜 0 6 kg 再分别倒入相同量的煮沸并冷却的 10 盐水 将坛 密封 置于同一环境中 封坛前进行第一次取样测定亚硝酸盐含量 后来定时测定 结果见 下图 3 1 实验中盐水需煮沸并冷却后才可使用 原因是 在腌制过程中 会出现坛中溶液量 增加 这是由于 2 测定亚硝酸盐含量的方法是 其原理是 在盐酸酸性条件下 亚硝 酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后 与 N1 萘基乙二胺盐酸盐结合形成 将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较 可以大致估计出泡菜中亚硝酸盐的 含量 3 该小组对实验数据的处理方法是否合理 并说明理 由 4 根据图中数据进一步分析 可推测在腌制过程中的第 天 泡菜中的亚硝酸 盐含量达到最大值 若要食用 至少要在腌制的第 天比较好 5 实验中 3 只坛中产生的亚硝酸盐含量存在差异 最可能的原因是 6 下图甲是以李子为原料生产果醋的生产工艺 乙曲线表示温度 酒精度对醋酸发酵 的影响 请分析回答下列问题 甲 4 乙 1 酒精发酵时一般将温度控制在 温度过高时 酵母菌代谢减慢甚至死 亡 原因是 2 根据乙图 醋酸发酵过程中 适宜的温度为 适宜的酒精度范围为 较高的酒精度通常不适宜进行醋酸发酵 原因是 3 酒精发酵后转入醋酸发酵前 除改变温度外 还需调整的发酵条件是 4 李子果汁生产时 加入果胶酶可提高果汁的出汁率和澄清度 为了使果胶酶得到 充分的利用 节约成本 需探究果胶酶的最适用量 请简单描述实验思路 7 2012 浙江台州期末 植物组织培养技术是 20 世纪初发展起来的 在快速繁殖 除去植物病毒 育种和代谢产物的生产上都有广泛的应用 以下是用植物组织培养的方法培 育月季 过程如图 1 植物组织培养的原理是 A 过程表示 B 过程表示 2 多选 A 过程必需的条件有 A 营养 B 激素C 光照 D 适宜 pH 3 在培养过程中 首先用 素相对较多和 素相对较少的发 芽培养基进行培养 使其长出较多的丛状苗 然后将丛状苗分株培养 分株后 再移入生根 培养基进行培养 使其生根 4 植株 叫做 5 植物组织培养实验用人工合成的植物生长调节剂 还是使用植物中存在的天然激 素 为什么 5 参考答案参考答案 1 解析 解析 1 植物组织先要在 70 乙醇中浸泡 10 min 再放入 5 次氯酸钠溶液中浸泡 5 min 然后用另一 5 次氯酸钠溶液浸泡 5 min 最后在超净台用无菌水清洗 2 LB 液体 培养基可用于扩大培养 3 作为对照组需要各种营养物质齐全的全营养培养基 筛选用的 实验组不能使用琼脂作为凝固剂 而是要用琼脂糖作为凝固剂 因为琼脂是未被纯化的混合 物 内含一定量的含氮化合物 不利于筛选 G6 玻璃漏斗可以对不能进行常规灭菌操作的培 养基等进行无菌处理 常用稀释涂布分离法分离土壤中以尿素为氮源的微生物 由于对照是 全培养液 所以菌落数要多一些 红色环带的出现是因为脲酶分解尿素产生的氨使指示剂酚 红呈红色 答案 答案 1 D 2 LB 液体培养基 3 LB 固体全营养培养基 LB 固体培养基 琼脂糖 G6玻璃砂漏斗 稀释 涂布 分离法 少于 因为能利用尿素的细菌产生的脲酶 将培养基中的尿素分解 产生的氨使指 示剂 酚红 呈红色 2 解析 解析 题干中描述本题的目的是测试新抗生素对某种链球菌的杀菌效果 所以可以 假设 新型抗生素能够抑制细菌的生长 当然也可以假设 新型抗生素对细菌的生长无影 响 细菌培养时要用蛋白胨和酵母提取物来配制 还要加入一定量的氯化钠 以维持一定 的渗透压 配制培养基时 先计算和称量各种物质 再进行溶解和溶化成溶液 然后再调 pH 和灭菌 最后倒置培养基 灭菌的最终目标是杀灭或清除环境中一切微生物 包括芽孢和孢 子 3 号作为对照不需要加任何抗生素 采用印章法转移菌种时 绒布不能进行转动 才能 确保细菌位置不变 有抗生素的周围部位没有菌落的形成 其他部位仍有菌落 答案 答案 1 这种新型抗生素对细菌的生长无影响 或这种新型抗生素对细菌的生长有 抑制作用 写出一种即可 2 蛋白胨和酵母提取物 bedca 3 杀死活的微生物 杀死 24 h 中由细菌芽孢萌发而生长的微生物 将培养基 处于 37 下放置 3 5 d 如仍无微生物生长 证明培养基已达到灭菌效果 4 将圆片在不添加任何抗生素的无菌水中浸泡一段时间 5 平板划线法或稀释涂布平板 不能转动绒布 6 3 解析 解析 利用石英砂固定 淀粉酶的方法 是把酶吸附在石英砂表面 故属于吸附法 淀粉溶液流过 淀粉酶固化柱后 在 淀粉酶催化下先被水解成糊精 糊精遇碘显红色 将枯草杆菌株接种到液体培养基上进行培养 转入含有化学诱变剂的培养基上培养 可以获 得突变体 分别在含淀粉的固定培养基上利用稀释涂布法分离 适宜条件下培养得到单菌落 对比菌落周围形成透明圈 根据突变率低 可以预期 A 组多数菌落周围的透明圈与 B 组差 异不显著 根据突变不定向的特点 可以预期 A 组有少数菌落的透明圈比 B 组明显小 有 少数比 B 组明显大 或 A 组透明圈大小不一 B 组较一致 答案 答案 1 A 2 糊精 红 3 液体 诱变剂 化学诱变剂 砷化物 亚硝胺 联苯胺 硫酸二乙酯 涂布 透明圈大小 A 组多数菌周围的透明圈与 B 组差异不显著 A 组有少数菌落周围的透明圈比 B 组明显小 有少数比 B 组大 或 A 组透明圈大小不一 B 组较一致 4 解析 解析 1 从图 1 可以看出 固定化小麦酯酶达到最大活力所需的温度比游离 的小麦酯酶所需温度要高 故其对温度变化的适应性更强 2 从图 2 可以看出 海藻酸钠 浓度为 3 时的小麦酯酶活力最强 当海藻酸钠浓度较低时 酶活力较低的原因是海藻酸钠包 埋的酶少 1 具体可参看答案或课本的相关内容 2 刚形成的凝胶珠要在 CaCl2溶 6 液中浸泡 30 min 左右 目的是让凝胶珠形成稳定的结构 3 如果制作的凝胶珠颜色过浅 呈白色 则说明海藻酸钠浓度过低 答案 答案 1 强 2 3 酶的数量不足 1 海藻酸钠溶解应适当加热至完全溶化 海藻酸钠溶液冷却至常温再加入酵母细胞 2 让凝胶珠形成稳定的结构 3 过低 5 解析 解析 加热煮沸可以杀灭各种杂菌 冷却后再加菌种 可以使菌种进行正常的生命 活动 腌制过程中 微生物代谢产生代谢产物排放到外界 增大了外界溶液的浓度 使细胞 渗透失水 增加了坛中溶液量 可以用光电比色法定量测定亚硝酸盐含量 数据应分别记录 再算出平均值 从三个曲线图中可以看出第 3 天亚硝酸盐的含量最高 第 8 天后亚硝酸盐浓 度降到比较低水平 可以食用泡菜 微生物的种类和数量不同可能会导致产生的亚硝酸盐的 量发生差异 答案 答案 1 加热煮沸是为了杀灭盐水中的杂菌 冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微 生物的生命活动不受影响 外界溶液浓度过高使细胞渗透失水 2 比色法 紫红色产物 3 不合理 应将三个坛中每次测定的亚硝酸盐的含量分别记录 求出平均值 然后 以时间为横坐标 亚硝酸盐的含量为纵坐标画出一条曲线 4 3 10 5 各坛中微生物种类和数量可能存在差异 其他合理答案也可 6 解析 解析 酒精发酵需要在 25 30 的条件下 2 3 d 温度过高会直接导致酵母菌体 内的酶失活 最终会导致酵母菌死亡 从图中可以看出 醋酸发酵的最适温度是 30 适 宜的酒精度则是 6 0 6 5 之间 较高浓度的酒精会直接抑制菌体内酶的活性 导致菌的生 长和代谢受到抑制 酒精发酵需要在无氧条件 而醋酸发酵则需要有氧条件 所以需要通入 无菌空气才能进行醋酸发酵 答案 答案 1 25 30 温度过高 影响酶的活性 2 30 6 0 6 5 较高浓度的酒精会抑制醋酸菌的生长和代谢 使产酸量下降 3 通入无菌空气 4 取相同体积的李子榨汁若干份 分别加入不同量的果胶酶 在相同且适宜的条件 下处理一段时间后 观察果汁的出汁率和澄清度 7 解析 解析 1 利用植物细胞的全能性可以把离体植物组织培养成完整的植株 先脱分 化形成愈伤组织 再分化长出丛芽 生根 形成幼苗 2 脱分化不需要光 但需要一定的 营养物质 激素和适宜的 pH 条件才能形成愈伤组织 3 发芽培养基就是指细胞分裂素相 对较多 而生长素相对较少的一种

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