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课题课题 2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 课时训练课时训练 5 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1 1 可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是 A 以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂 B 以尿素为唯一氮源的培养基中加二苯胺试剂 C 以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹 试剂 D 以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂 解析 细菌合成的脲酶可以催化尿素分解形成氨 氨会使培养基的碱性增强 pH 升高 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂 培养某种细菌后 如果 pH 升高 指示剂若变红 则说明该细菌能产生脲酶分解尿素 答案 A 2 2 关于微生物的培养 下列叙述错误的是 A 细菌一般在 30 37 的温度下培养 1 2 d B 放线菌一般在 25 28 的温度下培养 5 7 d C 霉菌一般在 25 28 的温度下培养 3 4 d D 不同种类的微生物 一般需要相同的培养温度和培养时间 解析 不同种类的微生物 往往需要不同的培养温度和时间 答案 D 3 3 在寻找目的菌株时 要根据它对生存环境的要求 到相应的环境中去寻找 下列 不属于厌氧细菌生存环境的是 A 土壤深层 B 人或动物体内 C 真空 D 池塘淤泥 解析 厌氧型微生物的生长繁殖不仅需要厌氧环境 同时还需要生存所必需的各 种营养物质 如碳源 氮源 水 无机盐等 真空环境只能提供无氧环境 却不 能提供其他营养物质 答案 C 4 4 需要在火焰旁操作的有 土壤取样 称取土壤 稀释土壤溶液 涂布平板 微生物的培养 A B C D 解析 除了土壤取样和微生物的培养不便于在火焰旁进行外 其他均要在火焰旁 进行 以防止杂菌污染 答案 D 5 5 分离土壤中分解尿素的细菌 对培养基的要求是 加尿素 不加尿素 加琼脂 不加琼脂 加葡萄糖 不加葡萄糖 加硝酸盐 不加硝酸盐 A B C D 解析 分离分解尿素的细菌 应该以尿素为唯一氮源 不用加硝酸盐来提供氮源 另外还要加葡萄糖提供碳源 加琼脂作为凝固剂 制成固体培养基 利于细菌的分 离 鉴定 计数等 答案 C 6 6 以下关于分解尿素的细菌的说法正确的是 A 能分解尿素的原因是能合成分泌蛋白酶 B 以尿素作为唯一的碳源 C 环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性 D 以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基培养该菌后不会使酚红指示 剂变红 解析 A 项 酶有专一性 分解尿素的细菌之所以能分解尿素是因为能合成分泌脲 酶 B 项 该菌能以葡萄糖作为碳源 C 项 环境中含有大量的尿素对分解尿素的 性状起了选择作用而非诱导作用 D 项 该菌产生脲酶把尿素分解为氨后 使 pH 升高 进一步使酚红指示剂变红 但添加酸碱缓冲剂后 阻止了 pH 的升高 因此培 养基不再使酚红指示剂变红 答案 D 7 7 稀释涂布平板法分离分解尿素的细菌时使用的涂布器应保存在体积分数为 70 的 酒精中 取出后又要放在酒精灯火焰上引燃 这两步分别属于什么技术 A 灭菌 灭菌 B 消毒 消毒 C 灭菌 消毒 D 消毒 灭菌 解析 消毒和灭菌是不同的 往往消毒比较温和 仅仅消灭危害健康的致病菌 而 灭菌就比较强烈 如高压蒸汽 灼烧等 它是杀死一切菌 因此本题前者属消毒 后者属灭菌 答案 D 8 8 下列有关土壤中微生物的分离与计数的说法中 错误的是 A 因为土壤中各类微生物的数量不同 所以 为获得不同类型的微生物要按不同 的稀释倍数进行分离 B 测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量 选用的稀释范 围不同 C 如果得到了 2 个或 2 个以上菌落数目在 30 300 的平板 则说明稀释操作比较 成功 并能够进行菌落的计数 D 牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目 说明选择培养基 已筛选出一些细菌菌落 解析 样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落的数目 实际操作中 通常选用 一定稀释范围的样品液进行培养 以保证获得菌落在 30 300 之间适于计数的平 板 测定土壤中细菌的数量 一般选用 104 105和 106倍的稀释液 测定放线菌 的数量一般选用 103 104和 105倍的稀释液 测定真菌的数量 一般选用 102 103和 104倍的稀释液 将菌液稀释相同的倍数 在牛肉膏蛋白胨培养基上 生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目 从而说明选择培养基的筛选作 用 答案 D 9 9 马丁培养基是实验室常用的培养基之一 下列为马丁培养基的化学成分 据此 回答下列问题 成分含量成分含量 KH2PO4 3H2O0 1 g 葡萄 糖 1 g MgSO4 7H2O 0 05 g 蛋白 胨 0 5 g 0 1 孟加拉红溶 液 0 33 mL 琼脂 1 5 2 g 2 去氧胆酸钠溶 液 2 mLH2O 100 mL 链霉素溶液 1 104 mL 0 33 mL 1 该培养基中加入了链霉素 能抑制细菌和放线菌 但真菌可以在上面生长 因 此培养基是一种 培养基 2 葡萄糖能给微生物生长提供 和 3 蛋白胨能给微生物生长提供 和 4 培养基中 KH2PO4 3H2O 可给微生物提供含 的无机盐 5 琼脂的作用是作为 解析 链霉素能抑制细菌和放线菌生长 真菌可以在上面生长 因此该培养基是 一种选择培养基 葡萄糖是一种含碳的有机物 既可给微生物提供碳源 又可给 微生物提供能源 该培养基蛋白胨可以给微生物提供氮源和维生素 答案 1 选择 2 碳源 能源 3 氮源 维生素 4 K P 5 凝固剂 1010 探究如何从土壤中分离自生固氮菌并计数 实验原理 农田的表层土壤中 自生固氮菌的含量比较多 将用表层土制成的稀 泥浆 接种到无氮培养基上进行培养 在这种情况下 只有自生固氮菌才能生长 繁殖 材料用具 农田的表层土壤 无氮培养基 牛肉膏蛋白胨培养基 盛 9 mL 无菌 水的大试管若干 无菌移液管 无菌涂布器 无菌培养皿 盛 90 mL 无菌水的 锥形瓶 酒精灯 恒温箱 方法步骤 1 倒平板 分别将无氮培养基 牛肉膏蛋白胨培养基倒平板 应在 操作 2 制备土壤稀释液 取土样 10 g 加入盛有 90 mL 无菌水的锥形瓶中 充分摇匀 用无菌移液管吸取上清液 1 mL 转至 9 mL 无菌水的大试管中 依次稀释到 107 倍稀释度 为实现无菌操作 试管口和移液管应在离火焰 cm 处 3 涂布 按照由 107 103稀释度的顺序分别吸取 0 1 mL 进行平板涂布 每个稀 释度下 无氮培养基应至少涂布 个平板 牛肉膏蛋白胨培养基涂布 个平板 4 培养 放入恒温箱内 在适宜温度条件下培养 3 4 d 一般每隔 小时 统计一次 选取 时的记录作为结果 这样可以防止 5 细菌的计数 当菌落数目稳定时 选取菌落数在 的平板进行计数 如果测试的平均值为 50 则每克样品中的菌株数是 稀释度是 105 6 预期结果 相同稀释度下 牛肉膏蛋白胨平板上的菌落数 填 多 于 或 少于 无氮培养基上的数目 理由是 解析 要分离自生固氮菌 采用选择培养基分离的方法 缺乏氮源的培养基可用来 分离自生固氮微生物 而其他微生物因缺乏氮源不能生长 实验步骤一般是 配 制无氮培养基 灭菌 倒平板 系列稀
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