酒石酸法茶多酚含量测定报告

茶多酚的含量测定茶多酚的含量测定 实验组员 赵实验组员 赵龙飞龙飞 赵奇慧赵奇慧 刘芳刘芳 陈小丽陈小丽 一 一 实验原理实验原理 茶多酚能溶于水 乙醇 甲醇 丙酮 乙酸乙酯 微溶于油脂 对热 酸较稳定 在 碱性条件下易氧化变质 酒石酸铁能与茶多酚生成紫褐色络合物 络合物溶液颜色的深浅与茶多酚的含量成正 比 络合物在 540nm 处有最佳吸收 因此可以用比色方法测定 二 二 仪器与试剂仪器与试剂 仪器 分光光度计 天平 1ml 移液枪 100ml 容量瓶 6 100ml 量筒 100ml 烧杯 3 10ml EP 管 试剂 1 FeSO4 7H2O 1 000g 含 4 个结晶水的酒石酸钾钠 5 000g 2 Na2HPO4 12H2O 6 02g NaH2PO4 2H2O 0 50g 3 儿茶素标准品 10mg 三 三 操作步骤操作步骤 1 酒石酸钾铁溶液 称取 FeSO4 7H2O 0 100g 含 4 个结晶水的酒石酸钾钠 0 500g 加蒸馏水溶解后 用蒸馏水稀释至 100mL 2 pH7 5 的磷酸缓冲液 6 020g Na2HPO4 12H2O 0 500g NaH2PO4 2H2O 加蒸 馏水溶解后 用蒸馏水稀释至 100mL 3 儿茶素标准液 称取 10mg 儿茶素 用蒸馏水定容至 10ml 浓度为 1000 g ml 分别稀释到 200 400 600 800 g ml 得 5 个浓度标准品溶液 4 标准曲线 分别吸取 1ml 标准液 磷酸缓冲液 3ml 酒石酸钾铁 1ml 混匀 3000 转离心 10min 吸取上清液 3ml 加入玻璃比色皿 用分光光度计测定 540nm 处的 OD 值三次 求平均值 并绘制浓度 OD 标准曲线 以蒸馏水代替标准品溶液加入同样的试剂作空白对 照 5 取提取物 10mg 用蒸馏水定容至 10ml 取 1ml 按上述同样方法测定 540nm 处 的 OD 值 3 次求平均值 以蒸馏水代替样品溶液加入同样的试剂作空白对照 4 计算计算 茶多酚含量 W C 1000 100 C 所测吸光度带入标准曲线得到样品中茶多酚浓度 g ml 1000 样品浓度 g ml 5 实验结果实验结果 吸光度 样品 123 平均 浓度含量 有机溶剂 萃取法 0 450 4490 450 402 40 26 金属离子 沉淀法 0 4490 4490 4490 449402 0701540 21 打孔树脂 30 醇洗脱 0 5250 5260 5250 466 46 62 打孔树脂 50 醇洗脱 0 3490 3490 3480 317 31 78 打孔树脂 80 醇洗脱 0 1110 1110 1110 111118 0318511 80 6 实验分析实验分析 由实验结果看出 30 的乙醇提取大孔树脂法提取的茶多酚的含量是最高的 而其余 的溶剂提取法 金属离子沉淀法 都相对较低 本实验数据不能代表各个提取分离方法的 绝对优略 要视各组在实验过程中的实际操作是否规准确 实验中存在以下问题 1 标准品溶液浓度过低 吸光值存在负数 仪器不够精密 无法准确测出对应的 OD 值 最后修改方案 浓度提高了 20 倍 2 样品测定时 同样浓度 吸光度却高于标准品 也就是含量超过 100