MD PACIFIC 淋巴细胞分离液说明书

MD PACIFIC 淋巴细胞分离液说明书 主要用途 淋巴细胞分离试剂是一种旨在通过葡聚糖和泛影酸钠混合液 达到特定比重 然后离心分层以获得纯化完整的单核细胞 淋 巴细胞的权威而经典的技术方法 可以被用于动物 大鼠 小 鼠等 单核细胞 淋巴细胞的分离 鉴定 染色 标记 培养 DNA 萃取 线粒体分离 细胞因子测定和细胞流式仪分析等研 究 产品严格无菌 即到即用 操作简易 分离出色 性能 稳定 细胞活性保证 技术背景 全血溶液含有血清 各种蛋白因子 无核血红细胞 血小板 多核白细胞和单核白细胞等 为了获得纯化完整的单核白细胞 淋巴细胞 采用 Boyum 1968 的离心技术 可以方便快速地 从全血和骨髓中分离 产品内容 淋巴细胞分离液 200 毫升 产品说明书 1 份 产品特点 密度变化率依照 Ficoll400 泛影酸和氢氧化钠 最佳分离溶液的密度为参照具 体产品的标签 生理学参数 在 低粘度时高密度 无菌 即用型 溶液产品规格 检测标准 热源检测结果 0 5EU ml 无菌检测结果 已检测 应用 人外周血中分离出淋巴细胞的最佳试剂 这种分离液同样可被 用作从其它途径分离人的淋巴细胞 包括骨髓血细胞 脐带血 细胞及组织匀浆 实验步骤 实验开始前 室温预热淋巴细胞分离液 然后进行下列操作 注 上述方法适用于从外周血中分离淋巴细胞 如从骨髓 脐带及组织匀浆中分离 需要先去除红细胞后再进行上述步骤 分离淋巴细胞 1 准备无菌的锥形离心管 2 加入淋巴细胞分离液 3 用 hank s 液或用户自备的 PBS 缓冲液 1 1 比例 如果全 血样本粘稠 可适当增大比例 稀释抗凝过的全血样品 3 小心沿着管壁 接近分离液层面 非常缓慢地加入新鲜的稀 释过的全血样品在淋巴分离液上面 注意 切记不要搅浑淋巴细胞分离液 4 小心放进台式离心机离心 30 分钟 速度为 400g 5 小心取出离心管 切记不要震动 6 可见 最上层为淡红色透明血浆 其次为薄薄的致密白色环 状层 然后为离心液层 最后为红色沉淀在管底的红细胞层 7 小心抽掉白色环状层以上三分之二血浆液 切记不要搅动白 色环状层 8 用无菌塑料吸管小心吸取白色环状层液体 9 移入到新的无菌的锥形离心管 10 加入用户自备的 PBS 缓冲溶液 11 轻柔上下倾倒混匀 12 放进台式离心机离心 10 分钟 13 小心倒掉上清液 14 用手指轻弹离心管至下 使白细胞颗粒群松动 15 选择步骤 加入毫升用户自备的淋巴细胞完全培养液 进 行细胞培养 16 选择步骤 或加入毫升用户自备的白细胞冻存液 放进 80 冻存 17 选择步骤 或即刻进行各种后续实验 包括白细胞分离 鉴定 染色 标记 DNA 萃取 线粒体分离 细胞因子测 定和细胞流式仪分析等 分离图例 Ficoll Paque Ficoll Paque 注意事项 1 上述方法适用于从外周血中分离淋巴细胞 如从骨髓 脐带 及组织匀浆中分离 需要先去除红细胞后再进行上述步 骤分离淋巴细胞 2 所有操作均须无菌状态下进行 3 细胞分离液启封后应置 4 保存避免微生物污染 4 细胞分离液从冰箱取出后 不可立即使用 需待溶液温度升 到室温时 摇匀后使用 5 操作时 在室温下进行 18 25 6 组织 血液 细胞要求新鲜 避免冷冻和冷藏 7 全血样品采集须使用血液抗凝液 8 如果血液出现凝块 不宜进行分离操作 9 美德太平洋公司生产的细胞分离产品属于敏光型的 因此在 运输和贮藏过程中应注意避光保温 由于各品牌离心机的性能 不同 国内南北地区温度环境和四季的差异 可能影响分离效 果 用户可以调节离心转数 调节离心的时间 摸索最佳的分离条件 具体分离条件各实验室自定 保存方式 18 25 避光保存 启封后置 4 保存 本品为真空包装 未启 封前置于 10 以下易出现白色结晶 影响分离效果 保存期限为 2 年 天津美德太平洋科技有限公司 天津市新技术产业园区华苑产业区海泰发展六道 6 号海泰绿色产业基地 C 座 101 Te