过硫酸钾氧化紫外分光光度法

过硫酸钾氧化紫外分光光度法过硫酸钾氧化紫外分光光度法 1 原理原理 总氮 total nitrogen TN 指可溶性及悬浮颗粒中的含氮量 包括水中亚硝酸盐氮 硝酸盐氮 无机铵盐 溶解态氨及大部分 有机含氮化合物中氮的总和 在60 以上水溶液中 过硫酸钾可 分解产生硫酸氢钾和原子态氧 硫酸氢钾在溶液中离解而产生氢 离子 分解出的原子态氧在120 124 条件下 使水样中含氮 化合物的氮元素转化为硝酸盐 采用紫外分光光度法于波长 220nm和275nm处 分别测定吸光度A220及A275 按以下公式计算 校正吸光度A A A220 2A275 总氮 以NO3 N计 含量与校正吸光度成正比 过硫酸钾分解反应式如下 K2S2O8 H2O 2KHSO4 21O2 KHSO4 K HSO4 HSO4 H SO42 本方法的有效测定范围为0 20mg L 7 00mg L 2 实验用品实验用品 2 1 仪器 1000ml 容量瓶 100ml 容量瓶 10ml 比色管若干 最大 量程分别为 5ml 1ml 0 2ml 的移液枪一支 分光光度 计 2 2 药品 氢氧化钠 过硫酸钾 硝酸钾 浓盐酸 HCl 1 19g ml 浓硫酸 H2SO4 1 84g ml 2 3 试剂配制 1 碱性过硫酸钾溶液 称取 40 0g 过硫酸钾 溶于 600ml 水中 可置于 50 水浴中加热至全部溶解 另称取 15 0g 氢 氧 化钠溶于 300ml 水中 待氢氧化钠溶液恢复到室温后 混合 两种溶液定容至 1000ml 并存放在聚乙烯瓶内 可 保存一周 2 硝酸钾标准贮备液 称取 0 7218g 硝酸钾 溶于适量水中 移至 1000ml 容量瓶中定容 混匀 其中的总氮含量为 100mg L 加入 1ml 2ml 三氯甲烷为保护剂 在 0 10 暗处保存 可稳定 6 个月 3 标准硝酸钾工作液 准确移取硝酸钾标准贮备液 10 00ml 至 100ml 容量瓶中定容 混匀 临用现配 其中的总氮含 量为 10mg L 4 5mol L NaOH 溶液 称取 20gNaOH 加水定容至 100ml 5 硫酸溶液 取 10ml 浓硫酸加入 350ml 水中冷却备用 6 盐酸溶液 取 10ml 浓盐酸加入 90ml 水中冷却备用 3 实验步骤实验步骤 3 1 标准曲线 取 10 支试管 按下列表格加入试剂显色 以蒸馏水为参 比水样进行调零 并测定吸光值 A220 A275 项目0123456 硝酸钾标准工作液 ml00 40 81 21 62 02 4 各个管分别加水稀释至 4ml 碱性过硫酸钾溶液 ml2 02 02 02 02 02 02 0 塞紧管口后 于高压蒸汽灭菌锅 121 C 反应 30min 冷却至室温 盐酸溶液 ml0 40 40 40 40 40 40 4 用蒸馏水定容至 10ml 对应各管中 4ml 溶液 总氮浓度 以 NO3 N 计 mg L 01 02 03 04 05 06 0 A2750 0110 0100 0140 0100 0140 0120 015 Ar A220 2 A275 0 0530 1320 2450 3220 3820 4700 561 A Ar Ar 0 0 0790 1920 2690 3290 4170 508 以编号 1 7 的数据作标准曲线 横坐标为对应各管中 10ml 溶液总氮浓度 以 NO3 N 计 mg L 纵坐标为 A 附图为 3 月 28 日数据 3 2 水样的测量 取 0 2ml 经处理过的水样 如有必要先稀释或减少用量 于 10ml 比色管 用氢氧化钠溶液或硫酸溶液调节 pH 至 5 9 然后加入蒸馏水稀释至 4ml 后 分别加入 2ml 碱性过硫 酸钾溶液 然后塞紧管口后 置于高温蒸汽灭菌锅 121 C 加 热 30min 冷却至室温 之后分别加入盐酸溶液 0 4ml 用水 稀释至 10ml 以蒸馏水为参比水样进行调零 并测定各管吸 光值 A220 A275 计算各个吸光值 Ar A220 2A275各值减去空 白试验 即标准曲线 0 号管的吸光值 Ar 0 A220 0 2A275 0 即为校正值 A 此全过程应与标准曲线同时操作 项目0ABCDEF 水样 ml00 20 20 20 20 20 2 各个管分别加水稀释至 4ml 稀释倍数1111111 碱性过硫酸钾溶液 ml2 02 02 02 02 02 02 0 塞紧管口后 于高压蒸汽灭菌锅 121 C 反应 30min 冷却至室 温 盐酸溶液 ml0 40 40 40 40 40 40 4 用蒸馏水定容至 10ml A220 A275 Ar A220 2 A275 A Ar Ar 0 对应各管中 10ml 溶液 总氮浓度 以 NO3 N 计 mg L 3 3 水中氨氮的浓度按下式计算 N TN 4 A a b V D 式中 N TN 原水样中总氮的浓度 mg L 以 N 计 A 试样校正后的吸光值 b 标准曲线的斜率 a 标准曲线的截距 V 所取试样的体积 ml D 稀释倍数 水样未经稀释时此值为 1 4 注意事项注意事项 实验中玻璃器皿应用硫酸溶液浸泡 用自来水冲洗后再用蒸 馏水冲洗数次 该方法可测量范围跨度很大 但也意味着溶液中总氮浓度过