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肉毒梭状芽孢杆菌检验技术 肉毒杆菌简介 肉毒杆菌是一种生长在缺氧环境下的细菌 在罐头食品及密封腌渍食物中具有极强的生存能力 是目前毒性最强的毒素之一 肉毒杆菌是一种致命病菌 在繁殖过程中分泌毒素 是毒性最强的蛋白质之一 军队常常将这种毒素用于生化武器 人们食入和吸收这种毒素后 神经系统将遭到破坏 出现头晕 呼吸困难和肌肉乏力等症状 二肉毒棱菌 cl botulinum 为腐物寄生菌 广泛分布于土壤和动物粪便中 革兰氏阳性粗大杆菌 单独或成双排列 有时可见短链状 有周身鞭毛 无荚膜 芽胞椭圆形 大于菌体 位于次极端 使菌体似网球拍状 芽胞抵抗力甚强 严格厌氧 在普通琼脂培养基上形成直径3 5mm不规则的菌落 血液琼脂平板上有 溶血 能消化肉渣 使之变黑 有腐败恶臭 分解葡萄糖 麦芽糖及果糖 产酸产气 液化明胶 产生hzs 不形成吲哚 三肉毒毒素是一种神经毒素 能透过机体各部的粘膜 肉毒毒素由胃肠道吸收后 经淋巴和血行扩散 作用于颅脑神经核和外周神经肌肉接头以及植物神经末梢 阻碍乙酰胆碱释放 影响神经冲动的传递 导致肌肉的松弛性麻痹 显微镜下 的 肉毒杆菌 眼角植入肉毒杆菌的对比图 肉毒素的检验程序 样品 食品 消毒检测增菌 产毒培养30度5天报告 一 毒素检测观察生长性状 染色镜检报告 二 分离培养增菌产毒培养30度5天观察菌落性状 染色镜检毒素检测培养检查报告 三 检验所需器材 培养基和试剂 庖肉培养基 卵黄琼脂培养基 明教磷酸盐缓冲液 肉毒分型抗毒诊断血清 胰酶 革兰氏染色液等 设备和器材 离心机及离心管 研波及细砂 培养箱 显微镜 厌氧培养装置 1ml和10ml吸管 1ml注射器 平皿 接种环 载玻片 小白鼠等 肉毒毒素检测 样品制备检出实验确证实验毒力测定定型试验 肉毒梭菌检验 样品处理增菌培养分离培养 1 典型的肉毒中毒 小白鼠会在4 6h内死亡 而且98 99 的小白鼠会在12h内死亡 因此 实验前24h内的观察是非常重要的 2 24h后的死亡是可疑的 除非有典型症状出现 3 如果小白鼠注射经1 2或1 5倍数稀释的样品后死亡 但注射更高稀释度的样品后未死亡 这也是非常可疑的现象 一般为非特异性死亡 4 小白鼠要用不会抹去的染料加以标记 5 小白鼠的饲料与水必须及时添加 充分供应 6 食物中发现毒素 表明未经充分的加热处理 可能引起肉毒中毒 7 检出肉毒梭菌 但未检出肉毒毒素
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