刘海英过敏变态反应实验室检查

小儿过敏变态反应疾病实验室检查与临床意义,刘海英广州市妇女儿童医疗中心免疫实验室,变态反应（allergy)过敏反应（anaphylaxis)超敏反应（hypersensitivity) 均指机体受同一抗原物质再次刺激后产生的一种异常或病理性免疫反应。机体防御反应的一种特殊表现形式。,变态反应类型,过敏原检测（一）皮内特异性诊断原理：I型或IV型变态反应适应症：速发型外源性过敏、迟发型中属于接触性过敏；应不在强烈过敏反应发作期；近期内未使用有关治疗药物；无明显的皮肤划痕征；受试皮肤没有没有湿疹、荨麻疹等皮肤损害。,1、斑贴试验前臂，24-48 h观察，72 h报告阴性。I度：皮肤呈轻度红肿、皮疹、皮痒；II度：散在小皮疹出现、明显痒；III度：有成片的皮疹或大泡疹出现；IV度：皮肤渗出、溃疡、坏死。,注意事项假阴性：皮肤不能吸收变应原假阳性：变应原对皮肤有非特异性刺激；局限性：每次受试品种有限，时间长，造 成反应过重的痛苦使用范围：化妆品、化学制剂过敏 接触性过敏,2、划痕试验成人前臂，儿童背心，15-20min。+：皮肤稍隆起，周边轻度红斑；+：丘疹样隆起超出划痕范围，周边明显红斑；+：丘疹出现伪足，周边呈宽而不规则红斑；+：丘疹出现2个以上伪足、发痒，周边红肿 明显。,3、点刺试验 划痕试验的改良，因方法简便，近年广泛采用，尤其适用于儿童。国际标准化试剂：德国阿罗格皮肤点刺液方法：患儿前臂内侧皮肤，酒精消毒，间隔 2cm,滴点刺液，5min吸去，20min后 观察。,结果判断 变应原与组胺风团直径之比判定结果，如风团出现伪足加一级。 + 1：4 + 1：2 + 1：1 + 2：1,注意事项适应症、强烈反应、延长观察时间三岁以下幼儿不适合设置阴、阳对照,4、皮内试验 方法同青霉素皮试不同变应原，浓度不同其他注意事项、防范措施同青霉素皮试,5、眼结膜试验6、鼻内激发试验7、支气管激发试验8、离子透入试验9、舌下试验10、食物激发,（二）、体外特异性诊断放射变应原吸附试验（RAST）Radioallergosorbent test 为一种检测异性IgE的固相放射免疫测定法。先将食物抗原与溴化氰活化的固相载体结合，加入待检的血清共同孵育。再经洗涤离心后，加入125I标记的抗IgE血清，与结合在变应原上的特异性IgE发生反应。孵育后再次洗涤，测定固相载体的放射活性，以其判断血清中IgE含量。,变应原：纯化、标准化载体：试管法、纸片法、CAP 提高灵敏度 缩短试验时间 增强特异性标记二抗：多克隆、单克隆显示方法：放免法、酶标法、荧光酶标法 保持灵敏度、特异性，安全性提高,RAST商品化检测系统： CAP、Master、DPC、PXUniCAP100荧光酶标法：T-IgE, S-IgE,ECP变应原：单价多价，几种性质相似（真菌、花粉）过筛用变应原：吸入性Phadiatop 食物性Fx5E,标准CAP：T-IgE羊抗人IgE ECP - 羊抗人ECPIgE标准品：6个浓度，WHO75/502荧光酶标二抗：-半乳糖苷酶标记抗人IgE底物：4-甲基伞桂- -半乳糖苷标本采集要求： T-IgE,S-IgE: 空腹静脉血3-5毫升，干燥管ECP：2-3毫升，硅化真空管（SST管）严重溶血、脂血标本不可用！,特异性IgE(S-IgE)定量结果分级标准及临床意义,参考范围：T-IgE： 60 KU/LECP： 15g/L （SST管）影响因素：年龄 性别 种族 寄生虫感染建议建立每个试验室的正常参考区间,结果分析 1、T-IgE正常，S-IgE升高 S-IgE 18 KU/L IV级 T-IgE 18 KU/L 结论：T-IgE高不一定是过敏，过敏者T-IgE 不一定高，S-IgE检测有重要意义,结果分析 2、S-IgE与皮试差别区域差别：豚草国外多，国内少 葎草国内常见，国外少特殊物质：S-IgE对某些小分子变应原（青 霉烯酸）检测灵敏度不高。S-IgE低或正常并不能排除该项过敏的可能性,结果分析 3、吸入性过筛试验 Phadiatop包含多种吸入性变应原，阳性者分为1-6级，为多种S-IgE的总和，浓度越高，表明体内S-IgE越多。可以是某种S-IgE很高，也可能是多种变应原S-IgE累加的结果。未包括我国重要的变应原葎草花粉、蚕丝及真菌，可能会漏检只对这三种过敏的患儿。,结果分析 4、ECP EC