病原第二十三章

第二十三章 肝 炎 病 毒Hepatitis viruses,A型 甲型肝炎病毒（HAV） B型 乙型肝炎病毒（HBV） C型 丙型肝炎病毒（HCV） D型 丁型肝炎病毒（HDV） E型 戊型肝炎病毒（HEV） F型 已型肝炎病毒（HFV） G型 庚型肝炎病毒（HGV） TT型 TT型肝炎病毒（TTV）,肝炎病毒目前分8个型：,上述病毒分属不同的病毒科，生物学特性也显著不同，但均引起病毒性肝炎。,各型肝炎病毒比较,各型肝炎病毒比较,第一节 甲型肝炎病毒Hepatitis A virus ，HAV,小RNA病毒科、嗜肝RNA病毒；球型，二十面体对称，无包膜；基因组为线状+ssRNA；衣壳由 VP1VP4多种蛋白组成；一个血清型；可在非洲绿猴肾细胞、人胚肺二倍体细胞和人肝癌细胞株中增殖；抵抗力：病毒中最强者，仅次于芽孢。对乙醚、酸、热、稳定。,一、生物学性状,传染源：患者和隐性感染者；传播途径：粪口；病毒经口进入人体后，形成病毒血症入肝，引起肝炎，出现黄疸和转氨酶增高。急性期和恢复期早期产生 IgM抗体，恢复期后期产生IgG抗体。感染后可获得持久免疫力。,二、致病性与免疫性,潜伏期和急性早期用电镜检查粪便 HAV颗粒或用放射免疫、酶免疫检测 HAV抗原；ELISA法检测病人血清抗HAV IgM以明确诊断； 应用cDNA-RNA分子杂交及PCR技术检测HAV的RNA；用减毒活疫苗预防，应急预防用丙种球蛋白。,三、微生物学检查和预防原则,第二节 乙型肝炎病毒Hepatitis B virus，HBV,引起乙型肝炎（血清型肝炎）WHO估计，全球乙肝病毒感染者约3.5亿危害大严重公共卫生问题传播广泛 我国乙肝病毒携带者1.3亿，约占人口的10，慢性乙肝患者39,000,000易形成慢性感染、持续带毒，可并发肝硬化、肝癌可经母婴传播先天感染、婴儿无症状携带者。,一、生物学特性,大球形颗粒：即Dane颗粒，直径42nm，有双层衣壳，外衣壳（相当于包膜）脂质（宿主细胞成分）糖蛋白（HBsAg和Pre-S1，Pre-S2Ag），内衣壳为HBV核心抗原（HBcAg）和e抗原（HBeAg）。核衣壳内部为病毒DNA及DNA聚合酶。小球形颗粒：直径22nm，是HBV增殖合成过剩的HBsAg成分。管形颗粒：直径22nm，长50700nm，为小球形颗粒的串聚物。,1.形态结构：血清中存在三种病毒颗粒:,乙型肝炎病毒形态结构,大蛋白（HBsAg+PreS2Ag+PreS1Ag）,主蛋白（HBsAg）,中蛋白（HBsAg+PreS2Ag）,DNA为双股环状，其中长股为负股。DNA聚合酶具有反转录酶、核酸复制、RNaseH的特殊功能。病毒的多种抗原蛋白共用一个基因序列骨架，但有不同启动子转录。有S、C、P和X等4个开放读码框架。S区包括S基因、PreS1、S2基因编码外衣壳蛋白（HBsAg、PreS1、S2Ag）。C区基因编码HBcAg、 HBeAg 。P区基因编码DNA聚合酶等。X基因编码X蛋白（HBxAg）。,2. HBV的基因, 通过Pre-S1和Pre-S2蛋白吸附并进入于肝细胞，释放出DNA（1，2）； 在DNA聚合酶作用下以负链DNA为模板，生成 双股环状DNA分子（3）； 进入核内DNA转录形成4种mRNA（4，5）； RNA在胞浆内翻译成衣壳蛋白（68）； 在反转录酶作用下合成负链DNA（9）； 由DNA聚合酶合成正链DNA（10）； 在高尔基体获得包膜装配并成熟释放（1113）。,3.HBV的复制过程：,HBV的基因型：核苷酸序列8为判断标准，分为AH8种基因型；分布：具有人种和地域性特征。我国以B和C为主，也有少量的D和B/C基因型混合感染，北方以C型，南方以B型为多；与血清型的对应关系：A型-adw，B型-adw，C型-adr、adw和ayr，D型-ayw；基因型与流行特点、标志物的表达、致病性、病程转归及药物敏感性有关。,4. HBV的变异,5.HBV的抗原4种重要抗原,HBsAg,糖蛋白，具有抗原性，能刺激机体产生保护性抗体，三种颗粒共有分四种亚型（adr/adw、ayr/ayw），a为共同抗原决定簇，d/y，w/r是亚型决定簇（两组相互排斥），亚型有地区、种族差异：我国汉族以adr多见，少数民族ayw多见。血清HBsAg（+）是机体受HBV感染的标志。抗HBsAg（+）是人体有免疫力的标志。,内衣壳成分被HBsAg覆盖血清中不易检出可在感染的肝细胞表面表达致免疫病理（CD8T细胞作用）抗原性强 抗HBcAg IgM表示HBV在肝内复制。,HBcAg,游离于血清中可以检出与病毒体的消长一致HBV复制及血清具有传染性的标志。抗HBeAg具有保护作用预后良好的指标。,致癌蛋白；不作为HBV的血清学指标。,HBeAg,HBxAg,6.培养：不能在细胞中分离及培养。 细胞培养系统HBV DNA转染系统：将HBV DNA导入肝癌等细胞后，病毒DNA与细胞染色体整合，使细胞表达病毒抗原(HBsAg、HBcAg或HBeAg)，有些细胞株还可持续地产生Dane颗粒。 应用：筛选抗HBV药物，用于制备疫苗。 敏感动物：黑猩猩，用来进行人类HBV的致病机制研究和对疫苗效果与安全性检测。7.抵抗力： 强。对低温、干燥、紫外线、醚、氯仿、酚等均有抵抗力。10010min可使HBV失去感染性。,二、致病性与免疫性,致病性：临床表现多样性1.无症状带毒者2.急性肝炎 前驱症状为发热、疲劳和厌食，常伴有恶心、呕吐和腹部不适。由于肝损伤出现典型的黄疸。约1黄疸性肝炎重症肝炎，死亡率较高。可出现变态反应。 3.慢性肝炎 约510HBV感染者慢性肝炎。临床表现轻微或仅能检出酶轻度升高等肝功能异常。 约10肝硬化，肝功能衰竭。,4.原发性肝细胞癌（PHC） 约80PHC 归因于慢性肝炎，潜伏期9年35年。 HBsAg携带者较无HBV感染者发生肝癌的危险性高217倍。 发生机理：肝细胞损伤和肝组织的不断修复、HBV基因组的整合、HBxAg的反式激活作用等均可导致肝细胞的过度生长，最终引发PHC。,免疫性,细胞免疫：CD8T细胞对HBV感染的肝细胞直接 杀伤作用。 体液免疫：抗-HBs中和体液中的HBV； 抗-HBe 有一定保护作用； 抗-HBc 无保护作用，是HBV感染的指标。,三、传染源与传播途径,传 染 源 患者和病毒携带者，传播途径 血液、血制品传播 医源性传播医疗器械污染 母婴传播 接触传播,包括性传播等非胃肠道感染,四、微生物学诊断,HBV抗原抗体系统检测：HBcAg存在于肝细胞内，检查方法繁琐，一般不查。临床上主要用用血清学方法检测HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗HBe和抗HBc，俗称“两对半”。2. 用途,诊断判断传染型判断预后筛选献血员检测疫苗接种效果流行病学调查,（一）抗原、抗体检测,乙型肝炎抗原抗体系列检查结果,1. 俗称大三阳，为急性或慢性肝炎活动期，有较强的传染性。2. 俗称小三阳，为慢性携带者，或趋向恢复，传染性弱，如持续过久，可转为肝癌。3. 急性感染阶段或慢性HBsAg携带者，传染性弱。,4. 既往感染过,有一定免疫力，为不典型的恢复期或为急性感染期。5. 既往感染过，为肝炎恢复期，少数人仍有传染性。6. 过去有乙肝感染或现在正处于急性感染。,乙型肝炎抗原抗体系列检查结果（续1）,乙型肝炎抗原抗体系列检查结果（续2）,7. 打过疫苗或感染过乙肝。8. 急性乙肝恢复期或感染过乙肝。9. 急性感染早期或慢性HBsAg携带者，传染性弱。,10. 慢性HBsAg携带者，较易转阴或急性感染趋向恢复。11. 早期乙肝感染或慢性HBsAg携带者，传染性强。12. 急性乙肝感染趋向恢复或慢性HBsAg携带者。,乙型肝炎抗原抗体系列检查结果（续3）,（二）血清HBV DNA检测,血清HBV DNA是HBV感染、复制、血液有传染性的直接标志。,斑点ELISAPCR定量PCR能测出DNA拷贝数量，不仅可用于诊断，还可观察血清HBV DNA的动态变化，作为疗效的考核标准。,一般不单独依靠PCR进行临床诊断。,五、防治原则,切断传播途径：严格筛选献血员，严格消毒防止血液传播；注射乙型肝炎疫苗（基因重组HBsAg）：最有效的预防方法；紧急预防用含高效价抗HBs的免疫球蛋白（HBIg）；IFN对慢性肝炎有一定治疗作用治疗型乙肝疫苗。,第三节 丙型肝炎病毒 Hepatitis C virus, HCV,一、生物学性状：核酸为+ssRNA，有脂蛋白包膜。 有9个基因区，至少有6个基因型，我国流行为B 型为主，也有C型。二、致病性：是血源和医源感染的主要类型。 临床表现 70持续或慢性感染； 15%急性肝炎；15重型肝炎； 1015年内发展为肝硬化。 肝组织的不断修复与增生可诱发癌变。 免疫性：免疫力不牢固。三、诊断与防治同HBV,第四节 丁型肝炎病毒hepatitis D virus, HDV,1. 生物学性状： 缺陷病毒，缺少合成胞膜蛋白的基因，必须在HBV辅助下获得包膜才有致病性。,丁型感染只发生在HBV感染者。传播方式：输血或使用血制品传播；密切接触和母婴垂直传播。感染有两种形式,2.致病性：,共同感染（co-infection)：从未感染过HBV的正常人同时发生HBV和HDV的感染； 重叠感染 (superinfection)：已受HBV感染的乙型肝炎患者或无症状的HBsAg携带者再发生HDV感染。重叠感染常可导致原有的乙型肝炎病情加重与恶化，故在发现重症肝炎时，应注意有无HBV与HDV的重叠感染。,3.微生物学诊断与防治 感染后产生抗HDV IgM，IgG，抗HDV不能清除病 毒。检测 抗原为特异诊断指标。防治同HBV。,第五节 戊型肝炎病毒hepatitis E virus, HE