医学博士开题报告PPT课件

xx大学第一临床学院xxxx级外科学 泌尿 研究生开题报告 欢迎莅临指导 1 输尿管部分梗阻是一种常见的临床现象 可由多种因素引起 梗阻如不能及时解除 将导致肾积水 肾积水使肾盂内压力逐渐升高 压迫肾小管 肾小球及其附近的血管 造成肾组织缺血缺氧 肾实质逐渐萎缩变薄 肾容积增大 最后全肾成为一个无功能的巨大水囊 临床上由输尿管梗阻引起的肾积水较常见 输尿管完全梗阻与不全梗阻引起肾的病理生理学变化有很大的不同 1 2 输尿管梗阻大多数是部分梗阻 立题依据 2 目前对于与梗阻性肾积水发生发展过程有关的分子改变事件进行了许多的研究 结果表明梗阻性肾病发生发展过程存在着复杂的分子调控机制 但在肾积水病理演变过程中 也涉及了一系列梗阻后肾形态学如肾血管方面的变化 梗阻前后肾血管形态上有着怎样的变化 以及梗阻解除后随着积水程度的减轻 肾血管形态是否相应的恢复 如何解释这些现象 形态学与分子机制之间有着怎样的联系 3 研究现状 输尿管部分梗阻的动物模型的制作早在世纪中期就有学者进行研究 迄今为止已有多种输尿管部分梗阻模型报道 但各具优缺点 都有其相应的适用范围 3 10 输尿管套管法 输尿管腰大肌隧道包埋法 输尿管不全结扎法 银夹半环夹法 输尿管内支架置入法 4 血管铸型填充剂随着化工业的快速发展 不断出现新的铸型材料 血管铸型的方法也在不断的改进 常用的填充材料 5 X线填充剂 明胶氧化铅 20世纪30年代 法国解剖学家Salmon曾通过整尸灌注氧化铅进行血管造影 系统地研究了全身皮肤 肌肉的血管分布状况 21 22 1986年 Taylor对其灌注液的配方进行了改进 自此 明胶 氧化铅灌注技术成了皮瓣血管解剖学研究的重要手段 23 唐茂林 楼新法等进一步改良 不仅造影效果比以前大有提高 而且氧化铅的用量大幅度减少 24 25 并首次引入数字化图像处理技术对全身动脉进行了3D可视化研究及皮动脉的定位定量研究 26 27 氧化铅 leadoxide LO 颗粒小 水溶性 分散性好 一直被认为是较好的X线填充剂 但其目前所用载体成分明胶是动物胶原蛋白 分子量大 交链呈三维网状 氧化铅在其内的分布不是很均匀 在三维重建图像中 易出现血管造影空泡 毛刺等 6 羧甲基纤维素 氧化铅水凝胶 hydrogelofcarboxymethylcellulosewithleadoxide HCMCL 羧甲基纤维素 carboxymethylcellulose CMC 具有优异的分散性 在工业和医药化工行业中广泛应用 28 29 周小兵以CMC作为氧化铅 leadoxide LO 的载体 配制成CMC LO造影填充剂 从均匀性和CT值角度系统地研究分析了LO CMC最佳比例以及水凝胶物的体积变形特点和稳定性 在获取最佳配比的基础上 选用SD大鼠进行全身血管灌注试验 经CT扫描 三维重建所得图像清晰 取得了满意的效果 7 目前国内外对于正常人 动物肾动脉及分支 肾小球的形态分布 14 15 30 31 作了研究 对于动物模型肾动脉及分支 肾小球的研究报道少见 尤其是肾积水模型方面尚未见报道 肾血管三维重建的研究亦未见报道 梗阻性肾病的特征性病理学变化主要表现为肾小管萎缩和间质纤维化 而肾小管上皮细胞凋亡是肾小管萎缩和肾实质丧失的重要原因 32 33 在肾积水的过程中 肾动脉及其分支 毛细血管内皮细胞是否有凋亡 凋亡的程度如何 凋亡与血管形态的改变有着怎样的关联 血管形态的改变在肾积水的病理演变过程中起着怎样的作用 未见相关报道 因此 基于上述研究现状 得出研究题目 输尿管部分梗阻血管重塑的形态学改变及机制 8 研究目的 1 输尿管部分梗阻动物模型梗阻前 后 以及解除梗阻后的肾血管形态变化规律 2 对输尿管部分梗阻动物模型的血管灌注技术进行探索 以实现模型三维可视化 3 输尿管部分梗阻动物模型血管形态变化与肾血管内皮细胞凋亡的关系 为临床肾积水的防治提供理论依据 9 研究方法 可行性分析 铸型 肾小球铸型 肾动脉插管 采用聚甲基丙烯酸填充剂灌注 肾盂肾盏铸型 输尿管插管 采用过氯乙烯和自凝牙托材料的混合填充剂灌注 肾集合管铸型 输尿管插管 采用过氯乙烯填充剂灌注 扫描电镜 分别对梗阻前后肾小球和集合系统进行观察 比较 三维重建 首先采用羧甲基纤维素 氧化铅水凝胶经肾动脉插管灌注 使用螺旋CT扫描 利用Mimics软件重建 凋亡检测 石蜡切片采用TUNEL法原位检测血管内皮细胞凋亡 免疫组化检测Bcl 2 bax 研究方法 10 可行性分析 输尿管部分梗阻模型已制备本实验采用输尿管部分梗阻模型 输尿管部分梗阻模型报道的方法很多 各有优缺点 选择何种模型呢 通过预实验对输尿管套管法和输尿管不全结扎法两种造模方法的对比 发现输尿管套管法由于套管的刺激作用 粘连较重 解除梗阻较困难 输尿管不全结扎法对输尿管周围组织粘连轻 梗阻易解除 解除梗阻后尿流通畅 图2 实验所需的药品试剂 仪器设备已具备 药品试剂 图3 压力灌注器 图4 技术路线的设计合理可行 在铸型技术上拟请一名经验丰富的技术员指导灌注 图1 人员组成齐备 11 日本大耳白兔100只 梗阻观察组 O 48只 正常对照组 N 12只 建模 O1组 O4组 O8组 扫描电镜 统计分析 技术路线图 肾盂 肾盏 肾血管铸型 大体标本解剖 肾动脉分支 分段 血供及管径测量 大体标本观测 假手术组 SO 4只 O2组 三维重建 血管形态 梗阻解除组36只 2周 4周 1周 肾小球形态观察 凋亡 TUNEL法Bcl 2 baxHoechst 12 创新和特色 1 采用铸型技术对输尿管部分梗阻动物模型肾血管 肾盂肾盏 肾集合管进行灌注 对今后此类动物模型的铸型制作提供参考 2 采用铸型技术对输尿管部分梗阻的肾血管形态变化进行探讨 直接观测肾血管的变化过程 从形态学方面解释肾积水后肾功能损害的机制 3 使用数字人虚拟技术对输尿管部分梗阻的肾血管进行三维重建 为数字化虚拟泌尿道血管及模拟临床手术入路方式提供有益的经验 13 实验进展安排 2009 5 2009 6完成肾血管 肾盂肾盏 集合管铸型及X线填充剂的配置 探索最佳的灌注浓度 进行小样本的预实验 2009 6 2009 12完成梗阻前后及梗阻解除组肾血管铸型 肾盂肾盏 集合管铸型 CT扫描 凋亡实验指标的检测 2010 1 2010 5完成实验资料的收集 分析 整理 撰写和发表科研论文 14 项目 支出依据 金额 万元 实验动物 兔 0 8 动物饲养 0 9 灌注用药品试剂 0 1 扫描电镜 0 4 TUNEL Bcl 2bax检测 0 5 消耗品及玻璃器材 0 1 学术交流 复印 论文发表 0 4 科研业务费 实验材料费 仪器设备费 合计 3 2 经费预算 15 参考文献 1 MurphyGP ScottWW Therenalhemodynamicresponsetoacuteandchronicureteralocclusions J Urol 1966 95 5 636 657 2 MoodyTE VaughnEDJr GillenwaterJY Comparsionoftherenalhemodynamicresponsetounilateralandbilateralocclusion J InvestUrol 1977 14 6 455 459 3 chengEY MaizelsM ChouP etal Responseofthenewbornureteropelvicjunctioncomplextoinducedandlaterreversedpartialureteralobstructionintherabbitmodel J Urol 1993 150 2pt2 782 789 4 BartrumRJJr smithEH D OrsiCJ etal Theultrasonicdeterminationofrenaltransplantvolume J ClinUltra 1974 2 4 281 285 5 吴阶平 泌尿外科 M 济南 山东科学技术出版社 2001 272 287 6 曾甫清 鲁功成 刘博 等 一种新的可复性慢性不全梗阻性肾积水动物模型的建立 J 临床泌尿外科杂志 1996 11 5 299 301 7 ChevalierRL ThornhillBA WolstenholmeJTetal Unilateralureteralobstructioninearlydevelopmentaltersgrowth dependenceonthedurationofobstruction J Urol 1999 161 1 309 313 16 8 马胜利 叶章群 陈志强 等 输尿管部分梗阻后肾小球滤过率的时相性变化研究 J 武汉大学学报 医学版 2006 27 3 299 405 9 UlmAH MillerF Anoperationtoproduceexperimentalreversiblehydronephrosisindogs J Urol 1962 88 3 337 341 10 WenJG ChenY FrokierJ etal Experimentalpartialunilateralureterobstruction Pressureflowrelationshipinaratmodelwithmildandsevereacuteureterobstruction J Urol 1998 160 4 1567 1571 11 李富德 张德元 铸型标本填充剂的研制 吉林大学学报 医学版 1992 01 55 12 王兴海 王起云 刘牧之等 过氯乙烯铸型标本在电镜扫描技术上的应用 解剖学研究 1981 01 121 122 13 李忠华 王起云 钟世镇 用过氯乙烯制备肾集合管扫描铸型的方法 解剖学研究 1981 01 123 124 14 张朝佑 魏宝林 侯广棋 成人肾小球铸型的扫描电子显微镜观察 解剖学报 1980 11 1 1 4 15 袁发焕 史景泉 光丽霞 不同溶剂ABS液用于大鼠肾血管铸型的对比研究 中华物理医学杂志 1995 17 3 139 141 17 16 李忠华 人体铸型标本的设计和制作 M 广州 华南理工大学出版社 1992 4 19 17 李泽宇 吴坤成 刘畅等 过氯乙烯和牙托材料的混合填充剂在铸型标本中的应用 解剖学杂志 2008 31 2 282 283 18 钟世镇 韩震 有机玻璃及其单体在解剖技术学上的应用 解剖学研究 1980 01 114 117 19 李培 聚甲基丙烯酸甲酯 过氯乙烯在头颈部血管铸型标本制作中的应用 中外健康文摘 2007 4 9 1156 20 黄海龙 改良环氧树脂的几点改进 解剖学杂志 2006 29 3 23 21 SalmonM Art resdelapeau tudeanatomiqueetchirurgicale M Paris Masson 1936 22 SalmonM Art resdesmusclesdelateteetducou M Paris Masson 1936 23 ReesMJ TaylorGI Asimplifiedleadoxidecadaverinjectiontechnique J PlastReconstrSurg 1986 77 1 141 145 24 TangM GeddesCR YangD etal Modifiedleadoxide gelatininjectiontechniqueforvascularstudies J JClinAnat 2002 SRI 1 73 78 25 楼新法 梅劲 GeddesCR 等 明胶 氧化铅血管造影术的优化 J 中国临床解剖学杂志 2006 24 3 259 262 18 26 张志浩 李严斌 梅劲 等 应用放射造影术进行血管3D可视化研究初探 J 中国临床解剖学杂志 2006 24 3 255 258 27 梅劲 宋铁山 戴开宇 等 人体皮动脉的解剖学定位定量研究 J 中国临床解剖学杂志 2006 24 3 236 239 28 秦益民 制作医用敷料的羧甲基纤维素纤维 J 纺织学报 2006 27 7 97 99 29 刘跃平 王恩浦 羧甲基纤维素水溶液流变性质的研究 J 广州化学 1988 2 23 28 30 BEATRIZP S MARQUES SAMPAIO MARCOA PEREIRA SAMPAIO 2DogKidney AnatomicalRelationshipsBetweenIntrarenalArteriesandKidneyCollectingSystem THEANATOMICALRECORD 290 1017 1022 2007 31 ANDREWP EVAN BRETA CONNORS JAMESE LINGEMAN BranchingPatternsoftheRenalArteryofthePig THEANATOMICALRECORD246 217 223 1996 32