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文档简介

减数分裂的观察 实验目的 学习并掌握动植物减数分裂玻片标本的制作方法 了解动植物减数分裂的过程 观察减数分裂中染色体的动态变化 二 减数分裂 实验原理 第一次分裂前期I prophaseI 第一次减数分裂的前期特别长 包括细线期 偶线期 粗线期 双线期 终变期 细线期leptotene 染色体细长如丝 首尾难分 彼此缠绕在一起 偶线期zygotene 同源染色体开始彼此靠拢联会配对 粗线期pachytene 二价体凝缩变短变粗呈粗线状可发生非姊妹染色单体的交换 粗线期 染色体继续缩短变粗 两条同源染色体配对完毕 因此原来是2n条染色体 经配对后形成n组染色体 每一组合有2条同源染色体 这种配对的染色体叫做双价体 二价体 双线期diplotene 染色体继续变短变粗 同源染色体开始排斥 有交叉结出现 呈麻花状 双线期 双价体中的两条同源染色体开始分开 但分开不完全 并不形成两个独立的单价体 而是在两个同源染色体之间仍有若干处发生交叉而相互连接 交叉的地方实际上是染色单体发生了交换的结果 终变期diakinesis 交叉节端化 染色体更粗短 二价体分散在核区内靠近核膜 可计数 终变期 两条同源染色体仍有交叉联系着 所以仍为n个双价体 染色体变得更为粗短 螺旋化达到最高度 双价体开始向赤道面移动 分裂进入中期I 2 中期I 各个双价体排列在赤道面上 两个同源染色体上的着丝粒逐渐远离 双价体开始分离 但仍有交叉联系着 核仁核膜消失 纺锤丝形成 二价体着丝粒相对排列在赤道面上 同源染色体两个成员随机朝向一极 3 后期I 双价体中的两条同源染色体分开 分别向两极移动 每一染色体有两个染色单体 在着丝粒区相连 相当于有丝分裂前期的一条染色体 这样 每一极得到n条染色体 即在后期I时染色体数目减半 双价体中哪一条染色体移向哪一极是完全随机的 4 末期I 核膜重建 核仁重新形成 接着进行胞质分裂 成为两个子细胞 注意 末期I的染色体只有n个 但每个染色体具有两条染色单体 而有丝分裂末期的染色体数为2n个 每个染色体只有一条染色单体 染色体到达两极 解螺旋 核膜核仁逐渐形成 胞质分裂形成二分体 5 减数间期 在第一次分裂之末 两个子细胞进入间期 这时细胞核的形态与有丝分裂间期相似 但有许多生物没有间期 后期染色体直接进入第二次减数分裂的晚前期 染色体仍旧保持原来的浓缩状态 不过不论有没有间期 在两次减数分裂之间都没有DNA的合成及染色体的复制 6 前期II 中期II 后期II和末期II 前期II 中期II 后期II和末期II的情况和有丝分裂过程完全一样 也是每一染色体具有两条染色单体 所不同的是染色体在第一次分裂过程中已经减数 只有n个染色体了 第二次分裂 前期IIprophase 每条染色体有两个单体 共一个着丝点 常呈X状 子细胞染色体数目为n 中期IImetophase 核膜核仁消失 纺锤丝出现 每条染色体以着丝粒排列在赤道面上 后期IIanaphase 每条染色体的着丝粒分裂为二 每条单体在纺锤丝作用下分别移向两极 末期IItelophase 到达两极的染色体解螺旋 核膜核仁相继出现 胞质分裂 四分体thetetrad 由原来的一个母细胞经过两次连续的分裂产生四个子细胞 称为四分子 实验原理 在植物的花粉形成过程中 花药内的一些细胞分化为小孢子母细胞 2n 每个小孢子母细胞经减数分裂产生4个小孢子 n 在适当的时期采集植物的花药 经固定 染色 压片等操作程序后 就可以在显微镜下看到细胞减数分裂过程中染色体的动态变化 实验原理 在动物的有性生殖过程中 精巢首先分化为精母细胞 2n 经第一和第二次分裂 形成4个精子 n 在适当的时间给动物注射秋水仙素 并取动物的精巢 经低渗 固定等处理后 可观察到减数分裂不同时期染色体的变化 实验用品 蝗虫 Oxyaintricatastal 其染色体数为 雌虫 2n 2x 24 XX 雄虫 2n 2x 23 XO 雌虫比雄虫个体长 腹部末端为产卵器 呈分叉状 雄虫腹部末端为交配器 形似船尾 性成熟的雄性小白鼠 Musmusculus 2n 2x 40 玉米 Zeamays 2n 2x 20 蚕豆 Viciafaba 2n 2x 12 显微镜 离心机 培养皿 小手术剪 解剖针 小弯镊 离心管 吸管 载玻片 镊子 大培养皿 染缸 酒精灯 吸水纸等 甲醇 冰乙酸 0 075N氯化钾 0 1 秋水仙素 Giemsa染色液 醋酸洋红 改良品红 二甲苯 加拿大树胶 正丁醇等 实验步骤 压片法制备蝗虫精巢减数分裂装片 1 取材剪去翅膀 在翅基部后方的背端 仔细剪开体壁 可见上方两侧 第4 7背板之间 各有一团黄色团状块 精巢 2 固定卡诺氏固定液固定2 4小时 经95 酒精洗2 3次后 转入70 酒精保存 3 染色夹取一小枚管状精巢 放置于载玻片上 滴加适量醋酸洋红 或改良品红液 染色10 20min 4 压片用解剖针挑取少量材料 一条精小管 到一张新载片上 加1滴新鲜染料或45 醋酸 拔碎 加盖玻片 复吸水纸压片 5 镜检 压片法制备植物减数分裂装片1 取材获得处于适当减数分裂期的材料是制片成败的关键因素 而最适的时期又因实验主要目的不同而异 2 固定最常用的固定液是卡诺氏固定液 经过固定处理的材料更易于染色 分色和保存 3 涂抹用镊子直接从固定液或保存液中取出材料 花蕾 花序 幼穗等 用洁净的刀片或镊子压在小孢子囊或花药上向一端轻轻抹去 将花粉母细胞压挤出来 注意勿使花药太过破碎 将挤出花粉母细胞 呈半透明胶状 小范围内涂成薄层 4 染色在涂好的载玻片上滴加一滴或半滴染液 稍后用镊子把所有可见花药壁残渣清除干净 5 初检与压片染色后置于低倍显微镜下初步检查 若花粉母细胞正处于分裂期 即可压片 6 镜检观察在低倍镜下寻找适当视野 并正确区分处于减数

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