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物质的分离和定性 高效薄层色谱法 目录 简介工作原理仪器与材料操作应用优点 1简介 薄层色谱 或称薄层层析 thin layerchromatography 是以涂布于支持板上的支持物作为固定相 以合适的溶剂为流动相 对混合样品进行分离 鉴定和定量的一种层析分离技术 这是一种快速分离诸如脂肪酸 类固醇 氨基酸 核苷酸 生物碱及其他多种物质的特别有效的层析方法 从50年代发展起来至今 仍被广泛采用 2工作原理 薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法 它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同 使在移动相 溶剂 流过固定相 吸附剂 的过程中 连续的产生吸附 解吸附 再吸附 再解吸附 从而达到各成分的互相分离的目的例如用硅胶和氧化铝作支持剂 其主要原理是吸附力与分配系数的不同 使混合物得以分离 当溶剂沿着吸附剂移动时 带着样品中的各组分一起移动 同时发生连续吸附与解吸作用以及反复分配作用 由于各组分在溶剂中的溶解度不同 以及吸附剂对它们的吸附能力的差异 最终将混合物分离成一系列斑点 如作为标准的化合物在层析薄板上一起展开 则可以根据这些已知化合物的Rf值 后面介绍Rf值 对各斑点的组分进行鉴定 同时也可以进一步采用某些方法加以定量 3仪器与材料 载板 玻璃板是最常用的 要求光滑 平整 洗净后不附水珠 晾干 固定相 吸附剂 或载体最常用的有硅胶G 硅胶GF 254 硅胶H 硅胶HF 254 其次有硅藻土 硅藻土G 氧化铝 氧化铝G 微晶纤维素 微晶纤维素F 254 等 涂布器 点样器 展开室 4操作 薄层板制备 点样 展开 显色 5应用 食品和营养 食品中的营养成分是蛋白质 氨基酸 糖类 油和脂肪 维生素 食用色素等 与食品和营养有害的物质则有残留农药 致癌的曲黄霉素等 这些成分都可用薄层色谱法定性和定量 药物和药物代谢 薄层色谱法在合成药物和天然药物中的应用很广例如磺胺 巴比妥 苯骈噻嗪 甾体激素 抗菌素 生物碱 强心甙 黄酮 挥发油和萜等 都包括几种或十几种化学结构和性质非常相似的化合物 可以在上述文献中找出一 二种全盘的展开剂 一次即能把每一类的多种化合物很好地分开 农药 十多种有机磷农药和六种有机氯农药都可在硅胶G薄层上分开并测定含量 可用于农药分析及其残留量分析 毒物分析和法医化学 目前毒物分析和法医化学采用薄层色谱法等新的手段 对麻醉药 巴比妥 印度大麻 鸦片生物碱等均可分析 6优点 薄层层析有许多优点 它保持了操作方便 设备简单 显色容易等特点 同时展开速率快 一般仅需15 20分钟 混合物易分离 分辨力一般比以往的纸层析高10 100倍 它既适用于只有0 01 g的样品分离 又能分离大于500
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