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专题1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过_,赋予生物以_,创造出_。基因工程是在_上进行设计和施工的,又叫做_。(一)基因工程的基本工具1.“分子手术刀”_(1)来源:主要从_中分离纯化出来的,常见的有_ 和_。(2)功能:能够识别双链DNA分子的_ _ ,并且使每一条链中_ 部位的两个核苷酸之间的_ _断开,因此具有_ 性。(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式: _ 和 _ _2.“分子缝合针”_ (1)DNA连接酶的种类( 和 )的比较:相同点:都缝合_ _键。区别:EcoliDNA连接酶来源于_ _,只能将双链DNA片段互补的_ 之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶来源于_ _能缝合_ ,但连接平末端的之间的效率较_ 。(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将_ _ _加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接_ _的末端,形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”_ _(1)载体具备的条件: _ _ _ (2)最常用的载体是_ _,其本质是_ (它并非只存在于原核细胞,某些真核细胞中也存在) (3)其它载体:_ _(二)基因工程的基本操作程序第一步:_ _1.目的基因是指: 。2.获取目的基因的方法有_ _、_ _ 、_ 。3.PCR技术扩增目的基因(1)原理:_ _。(2)条件:_ 、_ _ 、_ 、_ _ 。(3)过程:第一步:加热至9095使_ _; 第二步:冷却到5560,_ _;第三步:加热至7075,_ 酶从引物起开始互补链的合成(4)结果:目的基因以_ 形式扩增,即_ _。第二步:_ _(基因工程的核心)1.目的:使目的基因在受体细胞中_ _,2.组成:_ _ _ _ _(1)启动子:是一段有特殊结构的 ,位于基因的_ _,是_ 酶识别和结合的部位,能驱动基因 ,最终获得所需的 。(2)终止子:也是一段有特殊结构的 ,位于基因的 。(3)标记基因的作用: ,常用的标记基因是_ 。 第三步:_ _1.转化的概念: 进入 内,并且在受体细胞内_ 和_ _的过程。2.常用的转化方法:将目的基因导入植物细胞:常用的方法是 _ ,其次还有_ _和 _ _等。将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是 。此方法的受体细胞是 _ _。将目的基因导入微生物细胞:最常用的原核细胞是 _,其转化方法是先用 _ _处理细胞,使其成为 _ ,再将 _ _溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程。第四步:_ _1.首先要检测 上是否插入了 ,方法是采用_ _2.其次还要检测 _,方法是采用 作探针与 杂交。3.最后检测 ,方法是从转基因生物中提取 ,用相应的 _ _进行_。4.有时还需进行 水平的鉴定。如 。(三)基因工程的应用1、基因治疗的概念:_ 。(四)蛋白质工程1、概念:蛋白质工程是指以 作为基础,通过_ _,对现有蛋白质进行 ,或制造一种
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