南医大药物分析第10章-巴比妥与苯并二氮杂卓类镇静催眠药物分析

巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 主要内容 药物结构 理化性质鉴别试验杂质检查含量测定体内药物分析 一 巴比妥类药物的结构分析 基本结构 1 环状丙二酰脲类2 R1 R2 H时 为巴比妥酸 3 多为巴比妥酸的5 5 二取代物 少数为1 5 5 三取代物或C2为硫取代 第一节巴比妥类药物的分析 代表药物 5 5 二取代 R1R2 巴比妥 苯巴比妥 戊巴比妥 异戊巴比妥 司可巴比妥 速可眠 1 5 5 三取代 甲苯巴比妥 己琐巴比妥 1 5 5 三取代 硫喷妥钠 C2上S取代 二 理化性质 一 弱酸性 二级电离 19 五 紫外吸收光谱 二 水解反应 红色石蕊试纸变蓝 应用 鉴别巴比妥类药物JP 15 采用此反应鉴别异戊巴比妥和巴比妥 1 巴比妥类药物 2 巴比妥类药物钠盐 三 与重金属离子的反应 1 与银盐的反应 白色沉淀 应用 鉴别 含量测定 Ch P 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 ppt 23 幻灯片23 2 与铜盐的反应 Zwikker试验 注意 a 巴比妥类药物呈紫堇色或生成紫色沉淀 鉴别试验 Ch P b 含S巴比妥类药物显绿色硫喷妥 特征反应 d 吡啶作用 1 吸收H 使巴比妥类易解离2 孤对电子生成配位体 c 可区别巴比妥类与硫代巴比妥类药物 5 5 二取代基不同的巴比妥类药物生成的化合物在氯仿中的溶解度不同 可用于本类药物的鉴别 3 与钴盐反应 Parri试验 紫堇色 应用 鉴别 含量测定 注意 反应在无水条件下 溶剂 无水乙 甲 醇 b 钴盐 醋酸钴 硝酸钴或氧化钴 c 碱 以有机碱为好 异丙胺 4 与汞盐反应 四 与香草醛反应 丙二酰脲基团中的H 五 紫外吸收光谱 10 幻灯片10 六 色谱行为 1 TLC2 HPLC 七 显微结晶 生物样品中微量巴比妥类药物的检验 巴比妥 长方形苯巴比妥 球形花瓣状巴比妥铜吡啶 十字形紫色苯巴比妥铜吡啶 浅紫色细小不规则或类菱形 三 鉴别试验 母核的反应 本类药物共有的反应 取代基的反应 类内区别 一 丙二酰脲类鉴别反应 母核反应 ChP 1 银盐反应 取供试品约0 1g 加碳酸钠试液1ml与水10ml 振摇2min 滤过 滤液中逐滴加入硝酸银试液 即生成白色沉淀 振摇 沉淀即溶解 继续滴加过量的硝酸银试液 沉淀不再溶解 取供试品约50mg 加吡啶溶液 110 5ml 溶解后加铜吡啶试液1ml 即显紫色或生成紫色沉淀 2 铜盐反应 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 ppt 12 幻灯片12 二 特殊取代基或元素的鉴别反应 1 芳环反应 苯巴比妥及钠盐 1 硝化反应 黄色 2 硫酸 亚硝酸钠反应 苯巴比妥及钠盐Ch P 苯巴比妥 H2SO4 NaNO2橙黄色橙红色 3 与甲醛 硫酸反应 苯巴比妥及钠盐ChP 2 不饱和取代基的鉴别反应 司可巴比妥钠 加成 加成 氧化 3 硫元素的反应 硫喷妥钠 Ch P 应用 区别硫代巴比妥与巴比妥类 四 IR 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 ppt 43 幻灯片43 三 测定熔点 四 特殊杂质检查 一 苯巴比妥的特殊杂质检查1 酸度 副产物苯基丙二酰脲2 溶液澄清度 乙醇不溶性杂质3 中性或碱性物质 副产物 分解产物4 有关物质 HPLC主成分自身对照 二 司可巴比妥钠的特殊杂质检查1 溶液澄清度 水不溶性杂质2 中性或碱性物质 副产物 分解产物 五 含量测定 一 银量法 1 原理 白色 2 测定方法取供试品用甲醇溶解 加入碳酸钠 照电位法 用硝酸银滴定液滴定 3 终点指示 稍过量的Ag 与巴比妥类药物生成白色浑浊银 玻璃电极电位法 4 举例异戊巴比妥的测定方法 ChP 取本品约0 2g 精密称定 加甲醇40ml使溶解 再加新鲜配制的3 无水碳酸钠溶液15ml 照电位滴定法 用硝酸银滴定液 0 1mol L 滴定 即得 每1ml硝酸银滴定液 0 1mol L 相当于22 63mg的C11H18N2O3 5 讨论 1 化学计量关系 1 1 2 优点 操作简便 专属性强 4 Na2CO3的作用 二 溴量法 1 原理 Br2 定量过量 1C12H17N2NaO3 1Br2 司可巴比妥钠 ChP 取本品约0 1g 精密称定 置250ml碘瓶中 加水l0ml 振摇使溶解 精密加溴滴定液 0 05mol L 25m1 再加盐酸5m1 立即密塞并振摇1min 在暗处静置15min后 注意微开瓶塞 加碘化钾试液l0ml 立即密塞 摇匀后用硫代硫酸钠滴定液 0 1mol L 滴定 至近终点时 加淀粉指示液 继续滴定至蓝色消失 并将滴定结果用空白试验校正 每lml溴滴定液 0 05mol L 相当于13 01mg的C12H17N2NaO3 2 测定方法 3 讨论 1 化学计量关系 1 1 2 密塞目的 3 为何在近终点时加指示剂 4 空白试验校正 三 酸碱滴定法 1 原理 2 测定方法 1 水 乙醇混合溶剂 滴定剂 氢氧化钠 指示剂 麝香草酚酞 终点颜色 淡蓝色 电位法指示终点 2 胶束水溶液 表面活性剂使巴比妥类药物的酸性增强 滴定剂 氢氧化钠 溶剂 有机表面活性剂 溴化十六烷基三甲基苄铵 指示剂 麝香草酚酞 电位法指示终点 3 非水溶液 巴比妥类药物的酸性增强 有机溶剂 二甲基甲酰铵 甲醇 丙酮等 滴定剂 甲醇钾 钠 氢氧化四丁基铵 指示剂 麝香草酚蓝 电位法指示终点 四 紫外分光光度法 1 原理 巴比妥类药物在碱性介质中电离为具有紫外吸收的结构 2 特点 1 专属性强 灵敏度高 2 用于巴比妥类药物原料及制剂的含量测定 3 体内药物的检测 3 测定方法 1 直接紫外分光光度法 a 根据样品溶液的pH值 选用对应的 maxb 采用对照品法 计算药物含量 取装量差异项下的内容物 混合均匀 精密称取适量 约相当于硫喷妥钠0 25g 置500ml量瓶中 加水稀释至刻度 摇匀 量取此溶液用0 4 氢氧化钠溶液定量稀释制成每1ml中约含5 g的溶液 另取硫喷妥对照品 加0 4 氢氧化钠溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含5 g的溶液 照分光光度法 在304nm波长处测定吸收度 根据每支的平均装量计算 每1mg硫喷妥相当于1 091mg的C11H17N2NaS c 举例 2 提取分离后紫外分光光度法 苯巴比妥钠 USP 24 可消除干扰物质对测定的影响 五 HPLC RP HPLCHPLC测定苯巴比妥片的含量 ChP 六 体内药物分析 RP HPLC同时测定血清中巴比妥类的浓度GC MS同时测定人体液中巴比妥药物HPCE法测定体内尿液中巴比妥和苯巴比妥两种药物LC MS联用技术监测巴比妥类药物 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析 ppt 26 幻灯片26 苯巴比妥 第二节苯并二氮卓类药物的分析一 基本结构与主要化学性质1 结构与典型药物 苯并二氮杂卓类药物为含氮杂原子 六元和七元环双并合而成的有机化合物 其中1 4 苯并二氮杂卓类药物是目前临床应用最广泛的镇静剂 地西泮 1959年合成 氯氮卓 1955年合成 奥沙西泮 2 主要化学性质 1 二氮杂卓环为七元环 环上氮原子具有碱性 苯基的取代使碱性降低 可进行非水滴定法测定 2 环一般比较稳定 可在强酸性下水解 形成相应的二苯甲酮衍生物 可用于鉴别和比色测定 地西泮水解生成芳仲胺基和甘氨酸 3 UV吸收 用于含量测定 4 本品多为游离碱 不溶于水 而溶于甲醇 乙醇和氯仿中 二 鉴别试验 一 化学鉴别1 沉淀反应 生物碱性质a 氯氮卓和阿普唑仑的盐酸液 9 1000 遇碘化铋钾试液 生成橙红色沉淀 b 盐酸氟西泮的水溶液和氯硝西泮的稀盐酸溶液遇碘化铋钾试液 也生成橙红色沉淀 c 阿普唑仑的盐酸溶液 9 1000 遇硅钨酸试液 生成白色沉淀 2 硫酸 荧光反应苯并二氯杂卓类药物溶于硫酸后 在紫外光 365nm 下 呈现不同颜色的荧光 地西泮黄绿色黄色氯氮卓黄色紫色艾司唑仑 H2SO4亮绿色 稀硫酸天蓝色硝西泮淡蓝色蓝绿色奥沙西泮淡黄绿色 3 水解后呈芳伯胺反应氯氮卓 艾司唑仑和奥沙西泮的盐酸溶液 1 2 缓缓加热煮沸 放冷 加亚硝酸钠和碱性 萘酚试液 生成橙红色沉淀 而后者放置色渐变暗 4 分解产物的反应有机氯化合物 用氧瓶燃烧法破坏 生成氯化氢 以5 氢氧化钠溶液吸收 加硝酸酸化 显氯化物反应 5 氯化铜焰色反应含氯的药物 在铜网上燃烧发出氯化铜的绿色火焰 此反应药典未用于本类药物鉴别 二 紫外特征吸收和红外吸收光谱 三 色谱法TLCHPLC 三 特殊杂质的检查 一 有关物质检查1 氯氮卓中有关物质的检查USP 24 薄层色谱法 杂质对照品法 BP 2003 薄层色谱法 高低浓度对比法 杂质对照品法 ChP HPLC法 杂质对照品法 主成分自身对照法 溶液的澄清度控制中间体等水不溶性杂质2 三唑仑中有关物质的GC法 USP 一 非水溶液滴定法是国内外药典采用较多的含量测定方法 对于 a 在水溶液中不能滴定的化合物 一些很弱的酸 碱以及某些盐类 在水溶液中进行滴定时 没有明显的滴定突跃 终点难于掌握 b 在水溶液中不溶的化合物 有些有机化合物在水中溶解度很小 以水作为滴定介质受到一定的限制 四 含量测定 1 定义非水滴定 在水以外的溶剂中进行的酸碱滴定分析方法 1 酸性溶剂 有机弱碱在酸性溶剂中可显著地增强相对碱度 2 碱性溶剂 有机弱酸在碱性溶剂中可显著地增强相对酸度 3 两性溶剂 具有酸 碱性能 如methanol 4 惰性溶剂 没有酸 碱性的溶剂 丙酮 氯仿 2 应用讨论 1 适用范围pKb为8 13的弱碱性药物可用本法滴定 一般来说 当Kb为10 8 10 10时 宜选冰醋酸作溶剂 Kb为10 10 10 12时 宜选用冰醋酸与醋酐的混合溶剂作溶剂 Kb 10 12时 应用醋酐作溶剂 另外 在冰醋酸中加入不同量的甲酸 也能使滴定突跃显著增大 使一些碱性极弱的杂环类药物获得满意测定结果 2 终点指示方法常用电位法和指示剂法 指示剂 橙黄 萘酚苯甲醇 喹哪啶红 孔雀绿电位法 玻璃电极 饱和甘汞电极常用指示剂为结晶紫结晶紫酸式色为黄色 碱式色为紫色 由碱区到酸区的颜色变化为 紫 蓝 蓝绿 绿 黄绿 黄 指示剂的终点颜色变化 需要电位法来确定 3 应用实例尼可刹米 地西泮及氯氮卓药物的碱性强弱不同 测定时所采用溶剂 指示剂及其指示终点的方法也不尽相同 药物名称取样量 g 溶剂指示剂终点颜色尼可刹米0 15冰醋酸10ml结晶紫蓝绿色地西泮0 2冰醋酸 酸酐10ml结晶紫绿色氯氮卓0 3冰醋酸10ml结