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文档简介
1工作条件11工作环境ABX PENTRA60只能在室内工作。建议海拔高度不能超过2000米。仪器设计符合安装目录和污染程度2规定的瞬时电压要求。如果不能达到建议条件,任何操作环境相关信息请与ABX维修工程师联系。12放置位置ABX PENTRA60应放在一张干净的水平工作台或桌子上。注意ABX PENTRA60、打印机和试剂总重大约40公斤。避免直接日晒,仪器的左端和后段与墙壁至少保留20cm空间以保持良好通风。13接地ABX PENTRA60要求正确接地。检查插头内地线是否连接到化验室地线。如果未接地接一根地线。地线必须符合电气标准。14湿度与温度条件ABX PENTRA60适宜工作温度在16到34。最大相对湿度在温度31到40之间从80%呈线性下降到50%的环境内,仪器可用。如果室温低于10,仪器开机一小时达到要求温度后方可使用。15电磁场环境ABX PENTRA60设计时考虑到要产生低水平电磁干扰以达到设计目标。ABX PENTRA60产生的电磁干扰限制在不影响其他设备正常运行的范围之内。16环境保护当仪器和附件需要淘汰时必须依照规定收集起来交给专门销毁和再生利用这类设备的单位处理。 注意:用户不能触摸和检查以下部分:-电源(仪器底部)-电路板注意:如果电池更换错误有爆炸的风险。更换与原来相同或制造商推荐的相同型号的电池。按照制造商的指导处理废电池。2. 声明ABX PENTRA60对本手册开头声明的标准和规定负责。ABX公司只在下述条件下保证仪器的可靠性与整体性能:-ABX公司授权的工程师提供服务与维修。-化验室电源符合国家或国际规定。-系统工作符合下述指令。3. 打印机符合下列条件才可连接打印机:-ABX公司授权的工程师建议的打印机型号-打印机符合EEC标志-仪器软件所支持的打印机第一章:特性1技术特性31.1.参数31.1.1.CBC模式31.1.2.CBC+5DIFF模式31.2.分析速度31.3.样本识别31.4.试剂31.5.键盘与显示31.6.数据处理31.7.测量与计算方法42物理特性42.1.电源要求42.2.工作温度与湿度42.3.体积与重量42.4.最小样本量42.5.稀释率42.6.血红蛋白检测42.7.计数孔直径42.8.废液42.9.试剂消耗43测试数据分析53.1.重复性53.2.线性度53.3.检测后残留物(交叉污染率)54试剂特性54.1.稀释液:ABX DILUENT64.2. ALPHA溶血素:ABX ALPHALYSE64.3.生物溶血素:ABX BIOLYSE64.4.清洁液:ABX CLEANER64.5.嗜酸染色剂ABX EOSINOFIX64.6.嗜碱溶血素ABX BASOLYSE74.7.废液处理注意事项75限制因素75.1.保养75.2.血样75.3.已知干扰因素71.技术特性ABX PENTRA60是全自动血细胞分析仪(微电脑控制),用于微量全血样本诊断检测。ABX PENTRA60可用CBC模式(12参数)和CBC+5DIFF模式(26参数)1.1.参数-1.1.1.CBC模式白细胞 WBC -红细胞 RBC 血红蛋白HGB 红细胞平均体积 MCV红细胞平均血红蛋白含量 MCH 红细胞压积 HCT 红细胞血红蛋白浓度 MCHC 红细胞体积分布宽度 RDW-血小板 PLT 血小板体积分布宽度 PDW 血小板平均体积 MPV血小板压积 PCT1.1.2.CBC+5DIFF模式白细胞 WBC 淋巴细胞LYM %和# 单核细胞MON %和# 嗜中性细胞NEU %和#嗜酸性细胞EOS %和# 嗜碱性细胞BASO %和# 巨大不成熟细胞LIC %和#异常淋巴细胞ALY %和#-红细胞 RBC 血红蛋白HGB 红细胞平均体积 MCV红细胞平均血红蛋白含量 MCH 红细胞压积 HCT 红细胞血红蛋白浓度 MCHC 红细胞体积分布宽度 RDW-血小板 PLT 血小板体积分布宽度 PDW 血小板平均体积 MPV血小板压积 PCT1.2.分析速度.CBC模式:60/h.CBC+5DIFF模式:60/h1.3.样本识别-面板键盘输入-条形码识别1.4.试剂共5种试剂,4种放在机箱内:-ABX稀释液(20L)-ABX清洁液(1L)-ABX嗜酸染色剂(1L)-ABX嗜碱溶血素(1L)-ABX ALPHA溶血素或生物溶血素(0.4L)1.5.键盘与显示-ABX专用键盘-LCD显示屏,点阵128*240,LED背景发光1.6.数据处理-68331型微处理器-RS232C串口输出1.7.测量与计算方法-WBC、PLT、RBC、BASO: 阻抗变化法-HGB :光化学法-LYM、MON、NEU、EOS、ALY、LIC: 阻抗变化与光散射法-HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW、MPV、PCT、PDW: 公式计算2.物理特性2.1.电源要求-电源:电压100-240V,频率50HZ-60HZ-功率: 最大200W2.2.工作温度与湿度-室温16-34C-最大相对湿度在温度31到40之间从80%呈线性下降到50%。2.3.体积与重量-体积:高约51.6cm .宽约44.4cm .深约48.1cm-重量:约35kg2.4.最小样本量-CBC模式:30ul-CBC+5DIFF模式:53ul2.5.稀释率-WBC/BASO:1/200-LMNE :1/80-RBC/PLT :1/10000-HGB :1/2502.6.血红蛋白检测-HGB池,LED 555nm波长-氰化物光电比浊法-光源:发光二极管-波长:550nm10nm2.7.计数孔直径-WBC/BASO = 80um-LMNE = 60um-RBC/PLT = 50um2.8.废液根据地方/国家规定处理废液2.9.试剂消耗循环稀释液嗜碱清洁液嗜酸ALPHA溶血素估计时间CBC(不分类)20.52.10.9X0.460DIFF(五分类)25.62.10.910.460STARTUP(启动)*622.13.711.4340SHUTDOWN(关机)25.5X14X1245PRIME DILUENT(灌注稀释液)35.5XXXX230PRIME CLEANER(灌注清洁液)XX25.8XX120PRIME EOSINFIX(灌注嗜酸染色剂)XXX25.8X130PRIME BASOLYSE(灌注嗜碱溶血素)X25.8XXX120PRIME ALPHALYSE(灌注溶血素)2.5XXX4.2100PRIME ALL REAQENTS(灌注全部试剂)23.11616164.2320AUTO CLEAN CYCLE(自动清洗循环)12.5X16XX135AUTO CONTROL CYCLE(自动控制循环)24X1.4XX125*只包括一次背景计数(最多3次)3测试数据分析3.1.重复性基于无报警新鲜全血20次连续采样。参数%CV测试水平WBC2%10*109/lRBC2%5*1012/lHGB1%15g/dlHCT2%45%MCV1%90flPLT5%300*109/l3.2.线性度线性度检测需要购买低值和高值线性测试试剂盒,测试后,根据制造商要求分析数据,每个试剂包包括6种测试水平,一种作为参考值,每种水平做4次,结果如下:参数线性范围误差范围WBC(103/ul)0.5800.2或3%RBC(106/ul)0.27.50.05或2%PLT(103/ul)10100010或6%HGB(g/dl)2.5230.3或2%HCT(%)11.6555662.42或3%5或5%3.3.检测后残留物(交叉污染率)通过分析高浓度WBC、RBC、HGB、PLT样本来检测残留物(交叉污染率),每个样本做三次,然后做三次空白循环,用下面公式计算残留物(交叉污染率)百分数:残留物(交叉污染率)=(空白1-空白3)/(样本3-空白3) *100项目WBCRBCHGBPLT水平63.07.5823.4988残留物%(实际)0.300.000.000.00残留物%(预计)0.5%0.5%0.5%0.5%4试剂特性为了保证仪器的正常性能,请使用高质量试剂,ABX公司提供所需全部试剂。注意:-全部试剂根据生物分析试剂有关规定注册。-全部试剂用于微量分析。-本手册第2章与第3章有关于试剂使用和结果的描述。-全部试剂由ABX公司生产4.1稀释液: ABX DILUENT-功能:血细胞计数与分类过程所必须-成分:稳定盐溶液,包括有机缓冲液,防腐剂,叠氮化钠少于0.1%-描述:无味透明水溶液-理化特性:沸点:约100,PH值:中性-注意事项:避免与皮肤和眼睛接触,接触试剂时需戴手套,大量饮入会损伤黏膜。-紧急处理:如果皮肤和眼睛接触到该试剂,用大量水冲洗。如果不慎大量饮入,立即饮水并诱发呕吐-储存:在1825时避光保存4.2溶血素:ABX ALPHALYSE-功能:用于溶解血细胞,测定血红蛋白浓度,危险。-成分:包括0.03%氰化钾,四氨盐、磷酸盐缓冲液,叠氮化钠少于0.1%-描述:透明水溶液-理化特性:沸点:100,PH值:碱性,有氰化物气味。-注意事项:避免与眼、皮肤和衣服接触,接触试剂时需戴手套。饮入本品有害。本品可通过创口吸入或呼吸吸入。-紧急处理:如果眼睛或皮肤接触本品,用水冲洗;如果呼吸吸入,马上呼吸新鲜空气;如果不慎大量饮入,立即饮水并诱发呕吐,与本地防毒中心联系或找医生诊治。-储存:在1825时避光保存4.3溶血素:BIOLYSE-功能:用于溶解血细胞,测定血红蛋白浓度-成分:四氨盐-描述:无色无味-理化特性: PH值:6.65-注意事项:避免与眼睛接触,饮入本品有害-紧急处理:如果眼睛或皮肤接触本品,用水清洗,如果不慎饮入本品马上找医生诊治-储存条件:无特定要求4.4清洁液 ABX CLEANER-功能:清洗液,有害-成分:蛋白酶溶液-描述:透明液体-理化特性:沸点:100左右,PH=9.6-注意事项:避免接触眼睛、皮肤和衣物-紧急处理:如果眼睛或皮肤接触本品,用水清洗,如果不慎饮入本品马上找医生诊治-存储:18254.5嗜酸染色剂ABX EOSINOFIX-功能:溶解红细胞,稳定白细胞,给嗜酸性粒细胞染特定颜色-成分:乙醇溶液包括丙二醇,蚁酸染料,缓冲液,碱性盐,保湿物和醛防腐剂-描述:深兰色水溶液,酒精味-理化特性:PH值:6.9-注意事项:避免与眼睛、皮肤和衣物接触,接触本品需要戴手套,吸入或饮入本品有害,不用时盖紧盖子。-紧急处理:如果眼睛或皮肤接触本品,用水冲洗;如果呼吸吸入或饮入,与本地防毒中心联系或找医生诊治。-存储条件:室温18254.6嗜碱溶血素 BASOLYSE-功能:溶解红细胞用于粒细胞计数和嗜碱细胞核分类-成分:酸性溶液,包含一种溶解成分-描述:无色水溶液-理化特性: PH值:2.4-注意事项:避免与眼睛、皮肤和衣物接触,接触本品需要戴手套,吸入或饮入本品有害,不用时盖紧盖子。-紧急处理:如果眼睛或皮肤接触本品,用水冲洗;如果呼吸吸入,马上呼吸新鲜空气;如果不慎大量饮入,立即饮水,注意不要诱使呕吐,与本地防毒中心联系或找医生诊治。-存储条件:室温18254.7废液处理注意事项如果本地或国家有要求,ABX PENTRA 60废液排放前可以用如下方法中性化:-20L废液加50ml的200g/l的氢氧化钠溶液,再加250ml漂白液(可购买48Cl溶液当天配制12Cl溶液)-过期试剂:溶血素内氰化物处理:1L溶血素加50ml的200g/l氢氧化钠溶液,再加100ml当天配制的 200g/l过硫酸氨溶液;或者加500ml的200g/l氢氧化钠,再加500ml的30%的次氯酸钠溶液5.限制因素5.1.保养第5章将列出具体保养措施,为了保证ABX PENTRA 60正常使用和运行,必须进行保养。第5章建议的任一过程运行失败都将导致系统不稳定。5.2.血样对任意异常测试结果(包括超出参考范围或带异常标志的结果)应该用参考方法或标准实验方法检测再做出结论,下面将列出利用阻抗法和光吸收法作为检测原理的全自动血球仪的已知限制因素5.3.已知干扰因素WBC: 白细胞白细胞结果超出线性范围需要稀释样本,重新检测稀释后样本可得出正确结果。未溶解红细胞-极少情况下样本中红细胞未完全溶解,这些未溶解红细胞在白细胞直方图上可能检测到且带L1标志或者白细胞直方图上淋巴细胞群边上基线升高,未溶解的红细胞可能引起白细胞虚假增高。多发性骨髓瘤-多发性骨髓瘤病人的蛋白质沉淀可能引起白细胞增高。白血病-这类疾病可能使白细胞变脆,导致计数时白细胞破裂,使得白细胞计数值很低。这些白细胞碎片也会影响分类。化疗-细胞毒性和免疫抑制药物会增加白细胞脆性,导致白细胞计数值低。冷球蛋白-冷球蛋白增加与骨髓瘤、癌、白血病、巨球蛋白血血症、淋巴组织增生、自身免疫紊乱、感染、动脉瘤、怀孕、血栓栓塞现象和糖尿病等可导致白细胞、红细胞或血小板计数以及血红蛋白浓度增加。该样本必须在一双重蒸锅内加热30分钟至37,然后马上重测(用血球仪或手工法)。RBC: 红细胞红细胞溶液内包含血液中全部有形成分:红细胞,白细胞和血小板。红细胞计数时,由于血小板体积低于最小阈值而不会被计数。凝集红细胞-可能导致红细胞计数虚假降低。MCH和MCHC值升高以及观察血液染色推片可怀疑血样中有红细胞凝集。冷凝集素-冷凝集病引起的lgM免疫球蛋白增加回降低红细胞和血小板计数HGB: 血红蛋白血样浑浊-任何生理性和/或治疗性因素都会导致血红蛋白测值虚假升高。当血样发生浑浊时,找出混浊原因,采取如下合适方法,以得出精确的血红蛋白测值。1白细胞值增高:白细胞值增高会导致大量光散射。此时运用参考(手工)方法。将稀释后样本离心,用分光光度计测量上层清亮液体。2脂质增高:血样内脂质增高会使血浆呈乳白色。此类情况发生于高血脂症、高蛋白血症(如R-球蛋白增多)以及高胆红质血症。运用参考(手工)方法和血浆空白可得到精确的血红蛋白测值。3浑浊度增加也会发生在红细胞抗溶血时。此时会导致血红蛋白测值虚假升高,但是通过观察异常MCH,MCHC值以及白细胞直方图边上基线升高可以发现这种现象。血红蛋白测值错误也会导致红细胞平均血红蛋白含量(MCH)和红细胞血红蛋白浓度(MCHC)结果错误。4胎儿血-当胎儿血与母亲血混合时会导致血红蛋白测值虚假升高。HCT:红细胞压积红细胞凝集-会导致红细胞压积和红细胞平均血红蛋白含量结果错误。通过红细胞平均血红蛋白含量(MCH)和红细胞血红蛋白浓度(MCHC)值异常以及观察血液染色推片可发现红细胞凝集,此时需要运用手工方法以得到精确红细胞压积值。MCV:红细胞平均体积红细胞凝集-会导致红细胞平均体积结果错误。通过红细胞平均血红蛋白含量(MCH)和红细胞血红蛋白浓度(MCHC)值异常以及观察血液染色推片可发现红细胞凝集,此时需要运用手工方法以得到精确红细胞平均体积值。大体积血小板数目过多和/或白细胞计数过高回干扰红细胞平均体积的精确值。此时通过仔细观察血液染色推片可发现错误。MCH:红细胞平均血红蛋白含量红细胞平均血红蛋白含量根据血红蛋白值和红细胞计数来计算。以上列出的血红蛋白和红细胞限制因素也会影响红细胞平均血红蛋白含量,可能导致错误结果。MCHC:红细胞血红蛋白浓度红细胞血红蛋白浓度根据血红蛋白值和红细胞压积来计算。以上列出的血红蛋白和红细胞压积限制因素也会影响红细胞血红蛋白浓度,可能导致错误结果。RDW:红细胞体积分布宽度红细胞体积分布宽度根据红细胞计数来计算。红细胞凝集-会导致红细胞虚假降低以及红细胞体积分布宽度结果错误。通过红细胞平均血红蛋白含量(MCH)和红细胞血红蛋白浓度(MCHC)值异常以及观察血液染色推片可发现红细胞凝集。营养不良或输血-由于缺铁和/或缺维生素B12和/或缺叶酸盐而造成的红细胞体积分布宽度结果增加。PLT:血小板极小红细胞(小红细胞)、红细胞碎片和白细胞碎片会干扰血小板正常计数,引起血小板值上升。红细胞凝集-会阻止血小板通过计数微孔,引起血小板计数值错误降低。通过红细胞平均血红蛋白含量(MCH)和红细胞血红蛋白浓度(MCHC)值异常以及仔细观察血液染色推片可发现红细胞凝集,此时需要运用手工方法以得到精确红细胞平均体积值。巨大血小板过多-由于这些巨大血小板超出血小板参数阈值上限而不被计数,引起血小板计数值错误降低化疗-细胞毒性和免疫抑制药物会增加血小板脆性,导致血小板计数值降低。此时需要运用参考(手工)方法以得到精确血小板计数值。溶血-溶血样本内含有红细胞碎片引起血小板计数值上升。枸橼酸抗凝血-用枸橼酸抗凝的血样由于有血小板聚集会降低血小板计数值。血小板凝集-血小板凝集会造成血小板计数值降低和/或白细胞计数值上升。重新采样且用枸橼酸钠抗凝,只对血小板计数重新分析。由于枸橼酸钠溶液的作用,血小板最终结果会被更正。然而血小板凝集肯定会造成L1,LL,LL1标志出现。MPV:血小板平均体积巨大血小板-由于这些巨大血小板超出血小板参数阈值上限而不被计数为血小板。因此这些巨大血小板不会包括在血小板平均体积计算中。极小红细胞(小红细胞)、红细胞碎片和白细胞碎片会干扰血小板的正常计数和正常体积。红细胞凝集-会阻止血小板通过计数微孔,造成血小板平均体积错误结果。通过红细胞平均血红蛋白含量(MCH)和红细胞血红蛋白浓度(MCHC)值异常以及仔细观察血液染色推片可发现红细胞凝集,此时需要运用手工方法以得到精确红细胞平均体积值。化疗-也会影响血小板体积。重要:保存在EDTA中的血样不能保持稳定的血小板平均体积。保存在EDTA中的血小板体积膨胀受采集时间和温度所限。淋巴细胞绝对值,淋巴细胞百分数淋巴细胞计数直接来自于白细胞计数。有核红细胞、某些寄生虫以及抗溶血性红细胞等会影响淋巴细胞精确计数。以上列出的白细胞限制因素也适用于淋巴细胞绝对值和百分数计数。单核细胞绝对值,单核细胞百分数单核细胞计数直接来自于白细胞计数。大淋巴细胞、异常淋巴细胞、未成熟细胞和过多嗜碱细胞的存在会影响单核细胞精确计数。以上列出的白细胞限制因素也适用于单核细胞绝对值和百分数计数。嗜中性细胞绝对值,嗜中性细胞百分数嗜中性细胞计数直接来自于白细胞计数。嗜酸性细胞、晚幼粒淋巴细胞、髓细胞、前髓细胞、未成熟细胞和浆细胞的大量存在会影响嗜中性细胞精确计数。嗜酸性细胞绝对值,嗜酸性细胞百分数嗜酸性细胞计数直接来自于白细胞计数。异常粒细胞(失粒细胞区域、毒性粒细胞)的存在会影响嗜酸性细胞精确计数。嗜碱性细胞绝对值,嗜碱性细胞百分数嗜碱性细胞计数直接来自于白细胞计数。第二章:描述和技术1.描述11 1.1. 概述11 1.2. 前面板和功能健11A.使用健盘11B.功能健11 1.3. 后面板12 1.4. 机械和水路模块12 1.4.1.采样针架12 1.4.2.采样注射器12 1.4.3.计数池集合12 1.4.4.排空注射器12 1.4.5.稀释液缓冲12 1.4.6.计数注射器13 1.4.7.LMNE分类注射器模块13 1.4.8.试剂分配注射器模块13 1.4.9.光学座13 1.4.10.主板132.检测原理14 2.1. 样品多层分布系统(MDSS) 14 2.2. RBC/PLT检测原理14 2.3. HGB检测15 2.4. HCT检测15 2.5. RDW计算15 2.6. MCV,MCH,MCHC计算15 2.7. MPV测量15 2.8. PCT计算16 2.9. PDW计算16 2.10. WBC计数与分类16 2.10.1. 原理概述16 2.10.2. BASO/WBC计数16 2.10.3. LMNE立方图161. 描述1.1概述1-上盖 如果要打开上盖,首先打开气路侧门.2-气路侧门 用于操作者保养时接触水路部份,该门保证稀释液加热,在检测循环中必须关闭并锁紧.3-采样针用于53ul全血采样4-控制面板 实现了人机对话-观察各种循环过程-区分病人-设置仪器参数5-试剂门当试剂用完后更换试剂瓶1.2前面板和功能健- A.使用键盘仪器所有功能在菜单内都可找到。按”ESC”键从主菜单内都可找到这些功能。用功能键”和” ”移动光标到该功能前,按“ENTER”键进入该功能.B.功能键 1-“Startup”键:清洗和冲洗过程,紧接空白计数。 2-“Shutdown”键:每天工作完毕做清洗循环,仪器被清洗液浸泡处于“待机备用”模式。 3-“print”键:(软件V1.1版本以上可用),打开一弹出菜单,打印最后一个结果,定标结果或化验室项目参考范围等。 4-“CBC/DIFF”键:从CBC模式转化到DIFF模式或相反。 5-“START”分析循环功能键:激活采样循环,吸样53ul全血用于测量(与采样板功能相同)。 6-数字键:键“0”到“9”允许操作者输入如下数字:日期、定标值、化验室项目参考范围、病人号、标志值。 7-“DEL”键:删除LCD显示屏上的信息。 8-“ENTER”键:确认LCD显示屏上的信息。 9-“ESC”键:退出一个功能,返回上一级菜单。 10-箭头:翻转菜单,选择病人识别码内的字母。1.3.后面板1-废液输出口(4*6塑料管,最长2m);2-稀释液入口(3*6塑料管,最长2m); 3-机身编码铭牌; 4-条形码扫描器接口; 5-打印机接口; 6-RS 232C串口输出; 7-主电源线1. 4.机械和水路模块1.4.1.采样针架-保证采样和样品分配不同阶段样品针准确定位。-支持采样注射器和血样分配。1.4.2.采样注射器-精确取样,按比例分配到不同计数池。-从一次稀释池取样并分配到红细胞/血小板池。1.4.3.计数池集合-接收各种冲洗和稀释-保证稀释液加热。-保证WBC、BASO、RBC、PLT、HCT、HGB计数。1.4.4.排空注射器-排空各个计数池。-往样品和试剂混合液内吹气泡以充分混匀。-通过真空把混合池内LMNE样品传送到光学池注射器。 1.4.5.稀释液缓冲池-保证一次分析循环必须的稀释液。-避免稀释液被注射器推动时产生气泡。-该缓冲池利用真空被计数注射器充满稀释液。-1.4.6.计数注射器-保证WBC和BASO计数时真空。-保证RBC和PLT计数时真空。-保证稀释液缓冲池充稀释液时所需真空。1.4.7.LMNE分类注射器模块-保证LMNE准备池中保留稀释液的合适比例。-注射样品到光学池。-注射内部和外部增益到光学池。1.4.8.试剂分配注射器模块-保证不同试剂的正确比例。-血红蛋白溶血素(ABX Alpha LYSE)-清洁液(ABX cleaner)-LMNE溶血素(ABX Eosinfix)-稀释液(ABX DILUENT),LMNE保留稀释液除外。-白细胞/嗜碱溶血素(ABX BASOLYSE )。 1.4.9.光学座-支持和调节光学池; -支持和调节卤素灯; -支持和调节光电元件。-1.4.10.主板位于ABX PENTRA 60左侧,为了水路模块维护方便,电路板用螺丝固定到门上。电路板主要功能:-基于下列信号进行放大、处理和计数:.阻抗信号和LMNE光学信号.红细胞信号.血小板信号.白细胞/嗜碱信号-血红蛋白测量-马达元件控制-人机对话管理(键盘屏幕、串口、打印机等)-数据处理和计算结果。2. 检验原理2.1. MDSS样品多层分布系统ABX PENTRA 60分析循环需要3段血样,分配如下:-一段样品用于红细胞/血小板一次稀释和血红蛋白测量。-另一段样品用于白细胞/嗜碱计数池。-最后一段用于LMNE分类。这三段样品通过多层分配原理提供53ul全血抽取进入采样针(保证所有稀释过程的足够用量),然后将血样不同部分分配到各计数池,与试剂混合。血样上下两端废弃不用。样品分配到计数池内与试剂形成涡流,保证充分混匀,防止凝块出现(这种多分配系统是ABX专利)。2.2. RBC/PLT检测原理细胞通过定标微孔产生阻抗变化。1-血样稀释到电解质溶液内(导体)并通过定标微孔,两个电极置于微孔两侧,电流持续通过电极之间。2-当细胞通过微孔时,两电极之间的电阻与细胞体积成正比变化。3-产生的脉冲电压很低,通过放大电路放大,电路部分可以消除背景噪音并分析红细胞和血小板计数的技术参数稀释 测量方法血样初始体积:10ul 方法:阻抗法ABX稀释液体积:2500ul 宝石孔孔径:50mm最终稀释比例*:1/10000 计数气压:200mp反应温度:35C 计数时间:2*5秒*执行两次连续稀释RBC和PLT计数,一次稀释血样:10ul ; ABX稀释液:1700ul ; 稀释率:1/170RBC和PLT二次稀释(来自一次稀释液)一次稀释液42.5ul ; ABX稀释液2500ul; 稀释率1/58.8 最终稀释液 1/170 * 1/58.8 =1/10000结果:单位体积细胞数*定标系数。直方图:RBC:从30fl到300fl 256个计数通道的分布曲线。PLT:从2fl到浮动阈值128个计数通道的分布曲线,这个浮动阈值根据检验区域内小红细胞群的变化而移动。2.3.HGB检测红细胞与氰化钾结合释放血红蛋白或氰化亚铁血红蛋白化合物,在一次稀释池光学部分通过550nm波长,分光光度法测量该化合物。HGB测量技术参数:稀释 测量血样体积10ul 方法:光度法ABX稀释液体积1700ul 波长:550nmABX ALPHA溶血素400ulABX稀释液400ul最终稀释率 1/250反应温度 35结果:测得吸光度值X定标系数。2.4. HCT测量细胞通过微孔时产生的脉冲幅度与红细胞体积成正比,通过对MCV数学积分可得HCT2.5. RDW计算通过对红细胞分布的研究,检测红细胞大小不均的异常状况。红细胞分布宽度(RDW)使你得到与细胞数目和平均体积相关的曲线宽度的变化状况RDW=K* SD/MCV K:系统常数 SD:细胞分布统计结果的标准差 MCV:红细胞平均体积2.6. MCV、MCH、MCHC计算-MCV:直接从红细胞直方图计算得出。-MCH:通过血红蛋白值和红细胞数计算得出。-MCHC: 每个红细胞中平均血红蛋白含量(MCH)计算公式 MCH(pg)=HGB/HCT *100。2.7. MPV测量平均血小板体积(MPV)直接分析血小板分布曲线得出。2.8. PCT计算血小板压积(PCT)计算公式 PCT%=PLT(103/ul)*MPV(um3)/10000。2.9. PDW计算血小板分布宽度(PDW)通过分析血小板直方图计算得出,血小板直方图上从2ul开始血小板总数15%(s1)和从浮动阈值开始血小板总数15%(S2)之间的宽度代表PDW。2.10. WBC计数与分类-2.10.1.原理概述:白细胞数通过2个不同传感器计数两次。-在嗜碱计数池与嗜碱性粒细胞同时计数。-在光学部分测LMNE立方图时计算(软件版本V1.1以上可用)在白细胞和嗜碱性粒细胞计数池内测得白细胞值作为参考计数。-2.10.2.BASO/WBC计数检测原理与红细胞相同,利用新型BASOLYSE特异的溶血功能进行嗜碱性粒细胞和其他粒细胞之间的分类。嗜碱性粒细胞位于阈值2与3之间,白细胞总数包括;BASOLYSE溶血后形成的细胞核数与嗜碱性粒细胞之和。在曲线上位于阈值1到3之间。嗜碱性粒细胞百分数通过阈值2到3之间的细胞数来计算。WBC/BASO计数的技术参数。稀释 测量血样体积10ul 方法:阻抗法BASOLYSE体积200ul 宝石孔径:80nm稀释率1/200 Depression of count 200mb反应浓度 35 计数时间:2*6秒结果:白细胞:单位体积细胞数*定标系数。嗜碱性粒细胞:单位体积细胞数*与待计数细胞数(BASO+WBC核)相关的以百分数形式给定的定标系数。2.10.3 LMNE立方图ABX PENTRA60的白细胞立方图分析,基于3条基本原理。1-双鞘流系统“DHSS” (ABX专利)。2-体积测量:阻抗变化。3-检测0角透射光原理是细胞核内部结构不同而产生不同的反射光,以及偶尔光散射造成的吸光度不同。25ul全血被嗜酸酸染色剂染色后,分配到LMNE池,嗜酸酸染色剂溶解红细胞,使白细胞稳定在初始状态,将嗜酸细胞核染成特定颜色,之后将形成的溶液与稀释液混合,传送到测量池,每个细胞同时检测吸光度(细胞化学法)和阻抗(体积)测量WBC计数与立方图获取技术参数。稀释 测量血样体积25ul 方法:阻抗法嗜酸染色剂体积1000ul 宝石孔径:60um稀释液体积1000ul 流体直径:42um最终稀释率1/80 注射时间:12秒反应温度35 注射体积:72ul孵育时间12秒结果: 采用下述方法绘制白细胞立方图,X轴代表体积,Y轴代表吸光度。研究白细胞立方图能够清晰分辨出五种白细胞中的四种,事实上在微量血中嗜碱细胞与其他5种相比体积很小。嗜酸(EOS): 试剂作用于细胞膜,白细胞保持初始大小,只有嗜酸性粒细胞被染色,利用光学特性进行分类,嗜酸性粒细胞由于较强的吸光能力和体积位于代表吸光度的Y轴上部,嗜酸性粒细胞的体积与大中性粒细胞基本相同。中性(NEU):嗜中性粒细胞由于细胞质粒和大部分细胞核由于形态不同造成光散。淋巴(LYM):淋巴细胞体积较小,形状规则位于立方图左下角。正常淋巴细胞体积均一性较好,呈高斯分布。大淋巴细胞位于异常淋巴细胞区域,该区域还有反应性淋巴形状,刺激性淋巴细胞和浆细胞。淋巴细胞区域最左端情况下应该是空白,当小淋巴细胞存在时,该区域会有图形存在。从立方图边缘(背景区域)到淋巴细胞区域之间如果有血小板聚集会存在细胞分布。有核红细胞象正
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